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研究人员开展番石榴 L49 品种内生细菌检测与清除研究,发现庆大霉素可有效控污,优化微繁殖技术。
番石榴(
Psidium guajava L.)是全球重要的水果品种,开发优良番石榴品种的有效微繁殖(micropropagation)方案对大规模克隆繁殖至关重要。然而,内生细菌污染仍是番石榴微繁殖面临的重大挑战。本研究旨在采用体外(
in vitro )方法检测并清除 L49 番石榴品种节段外植体中的内生细菌。外植体分别取自三个不同来源 —— 德哈加姆水果研究站(D)、巴桑森林研究区(B)和苗圃培育植株(N),其污染率分别为 95%、50% 和 15%。这些外植体还表现出较高的褐化率(80%)和较低的响应率(10%)。培养接种 20 天后,通过 16S rRNA 测序鉴定出 6 种内生细菌:栖稻假单胞菌(
Pseudomonas oryzihabitans)、台湾假单胞菌(
P. taiwanensis)、青岛假单胞菌(
P. qingdaonensis)、谈谷甲基杆菌(
Methylobacterium dankookense)、耐辐射甲基杆菌(
M. radiotolerans)和土壤鞘氨醇单胞菌(
Sphingopyxis soli)。抗生素敏感性测试确定了 8 种有效的抗生素(四环素类、氨基糖苷类和氟喹诺酮类),其中庆大霉素的抑菌圈最大(3.5 cm)。浓度为 300 ppm 和 400 ppm 的庆大霉素可完全消除污染,显著优于对照组(污染率 100%)、100 ppm(污染率 65%)和 200 ppm(污染率 45%)的浓度。基于这些结果,选择 300 ppm 的庆大霉素添加到培养基中,可有效控制污染,且对植株外植体的叶片和茎生长无任何不利影响。本研究首次报道通过鉴定和应用有效抗生素(尤其是庆大霉素)成功在体外根除 L49 番石榴中的内生细菌,通过解决关键的污染问题改进了微繁殖方案。
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