揭秘肺癌顺铂耐药机制：FOXD1/ANXA3/ANXA4轴的关键作用

为探究肺癌 ANXA3介导顺铂（DDP）耐药机制，研究发现相关调控轴，助力克服耐药。

　　Annexin A3（ANXA₃）的表达被认为与肺癌的化疗耐药性有关。然而，ANXA₃介导肺癌顺铂（DDP）耐药的潜在分子机制仍有待进一步探索。研究人员通过 qRT-PCR 或蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测 ANXA₃、叉头框 D1（FOXD₁）和 Annexin A4（ANXA₄）的水平。采用细胞计数试剂盒 8（CCK8）检测、噻唑蓝（MTT）检测、流式细胞术、脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）染色、Transwell 实验和划痕愈合实验来测定 DDP 耐药性、细胞活力、细胞凋亡、侵袭和迁移能力。双荧光素酶报告基因检测和染色质免疫沉淀（ChIP）实验证实了 FOXD₁与 ANXA₃启动子之间的相互作用。免疫共沉淀（Co-IP）实验和免疫荧光染色用于验证 ANXA₃和 ANXA₄的相互作用。动物实验进一步证实了 ANXA₃对肿瘤组织 DDP 耐药性的影响。ANXA₃在肺癌 DDP 耐药组织和细胞中高表达。敲低 ANXA₃可抑制肺癌细胞的生长和转移，从而提高对 DDP 的敏感性。FOXD₁与 ANXA₃启动子区域结合，激活其转录。在挽救实验中，沉默 FOXD₁增强了肺癌细胞对 DDP 的敏感性，而 ANXA₃过表达则消除了这种作用。此外，ANXA₃与 ANXA₄相互作用，促进 ANXA₄的表达，ANXA₄过表达可以逆转敲低 ANXA₃对肺癌细胞 DDP 敏感性的促进作用。另外，FOXD₁通过激活 ANXA₃正向调节 ANXA₄的表达。在体内，沉默 ANXA₃可以通过降低 ANXA₄的表达减少肺癌的发生，并增强对 DDP 的敏感性。由 FOXD₁激活的 ANXA₃可能通过调节 ANXA₄促进肺癌对 DDP 的耐药性，这为克服肺癌化疗耐药提供了新的思路。