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为明确急性淋巴细胞白血病（ALL）前白血病干细胞免疫表型，研究人员分析脐带血造血干细胞亚群，发现其遗传不稳定，ALL 或可筛查。
急性淋巴细胞白血病（Acute lymphoblastic leukemia，ALL）是儿童中最常见的癌症之一，多在 2 - 3 岁发病。它的发病起始于胎儿期造血干细胞 / 祖细胞（hematopoietic stem/progenitor cells，HSPC）的染色体易位，形成前白血病融合基因（preleukemic fusion gene，PFG）。这些 PFG 编码的异常蛋白会阻碍正常干细胞分化。不过，虽然 PFG 在 ALL 发病中的重要性已被认知，但 ALL 的细胞起源仍不明确，不同研究对其起源细胞的观点不一，且由于检测手段的局限，很难在白血病发作前监测前白血病干细胞（preleukemic stem cells，PSC）。
为了深入了解 ALL 的发病机制，寻找早期诊断和治疗的新策略，斯洛伐克科学院癌症研究所等机构的研究人员开展了相关研究。该研究成果发表在《Scientific Reports》上。
研究人员采用了多种关键技术方法。首先，收集了 4 例 ALL 患儿和 10 例健康儿童的脐带血（umbilical cord blood，UCB）样本。接着，通过梯度离心法分离出单个核细胞（mononuclear cells，MNCs），并利用流式细胞术（FACS）将 UCB MNCs 分选成 8 个 HSPC 亚群。之后，将这些亚群细胞在间充质干细胞饲养层上进行扩增。最后，运用荧光原位杂交（fluorescent in situ hybridization，FISH）技术检测 TEL/AML1、BCR/ABL 和 MLL 基因的重排情况；对于部分样本，还用逆转录定量聚合酶链反应（RT - qPCR）检测融合转录本，并通过测序进行验证；同时，使用方差分析（ANOVA）结合 Fisher LSD 进行统计分析。
研究结果如下：
- TEL/AML1?细胞的分布：在不同患者中，TEL/AML1?细胞出现在不同的 HSPC 亚群。如患者 1 中，TEL/AML1?细胞仅在祖细胞（1.5%）中被 FISH 检测到；患者 2 中，仅在 HSC/MPP（0.1%）中发现；患者 3 中，通过 RT - qPCR 和测序在祖细胞中确认有 TEL/AML1 融合；患者 4 中，约一半分析的亚群存在 TEL/AML1?细胞，包括 HSPC、Pre - Pro B 细胞、HSC 和 MPP 等。
- 基因增益和重排情况：在患者的样本中，多个基因存在增益和重排现象。例如，患者 1 的 MNC 有 AML1 增益（0.3%），在多个亚群也检测到；患者 2 的 MNC 有 TEL 增益（0.25%），在祖细胞、HSC/MPP 和 MPP 中也有较高水平；患者 3 的 MNC 和多个亚群存在 MLL 重排；患者 4 的多个亚群检测到 TEL/AML1、BCR/ABL PFGs 以及 MLL 增益和缺失。
- 基因重叠现象：研究中观察到部分细胞存在 TEL 和 AML1 基因或 BCR 和 ABL 基因的随机重叠。患者 1 - 3 中，这类细胞在各亚群中不超 2%，而患者 4 中数量较多，这可能增加了急性白血病发生的可能性。
- 健康对照样本结果：健康对照的 HSPC 亚群经 FISH 检测，仅发现少量 BCR、ABL 和 MLL 基因的零星遗传变化，RT - qPCR 未检测到 TEL/AML1 融合转录本。
- 遗传不稳定性分析：统计分析显示，与健康受试者相比，ALL 患者的祖细胞和 HSC/MPP 中，TEL/AML1 和 BCR/ABL 探针检测到的遗传不稳定性显著增加。
研究结论和讨论部分指出，该研究首次分析了 ALL 患儿 UCB 中不同 HSPC 亚群的诊断相关 PFG，发现祖细胞和 HSC/MPP 更易发生与 ALL 相关基因的遗传不稳定，可能是 ALL 的起源细胞，有望成为免疫治疗的细胞靶点。同时，研究还证实了儿童 ALL 是一种潜在可筛查的疾病，遗传不稳定性可作为潜在生物标志物，用于排除脐带血库中可能导致供体细胞来源白血病的样本。不过，该研究存在样本量小、无法分析所有患者的所有 HSPC 亚群等局限性。但总体而言，该研究为理解 ALL 的发病机制、早期诊断和治疗提供了重要依据，对推动 ALL 相关研究和临床实践具有重要意义。
