CD69+ CD8+组织驻留记忆 T 细胞：预测食管鳞癌新辅助治疗预后的新指标

为探究食管鳞癌（ESCC）新辅助治疗后病理完全缓解（pCR）的异质性及潜在生物标志物，研究发现 CD69+ CD8+ TRM 或可预测预后。

　　在全球范围内，食管癌是癌症相关死亡的第六大原因，其中约 90% 为食管鳞状细胞癌（ESCC） 。目前，局部晚期食管鳞癌（LA-ESCC）的标准治疗方案是新辅助放化疗（nCRT）联合手术，但免疫治疗时代的到来对传统 nCRT 提出了挑战，新辅助免疫化疗（nICT）因其能提高病理完全缓解（pCR）率且副作用较小而备受关注。然而，pCR 在免疫治疗中的作用仍存在争议，不同新辅助治疗方案的 pCR 率与患者预后的关系也尚不明确，并且缺乏精确的预后和疗效预测标志物，这让医生在选择治疗方案时面临困惑。

为了解决这些问题，山东大学等多家机构的研究人员开展了一项多中心回顾性研究。该研究成果发表在《Cancer Immunology, Immunotherapy》上，为食管鳞癌的治疗提供了重要参考。

研究人员从中国四个中心纳入了 445 例 LA-ESCC 患者，其中 228 例接受 nCRT，217 例接受 nICT。通过倾向得分匹配（PSM）确保两组具有可比性，然后评估 pCR 率及其与总生存期（OS）、无病生存期（DFS）和复发模式的关系，并通过 RNA 测序、免疫浸润分析和多重免疫荧光染色等技术研究免疫相关生物标志物。

在研究方法上，主要采用了以下关键技术：一是收集患者术前活检和术后病理标本，进行 RNA 测序（RNA-Seq），分析基因表达差异；二是运用多重免疫荧光染色（mIF）技术，对特定细胞进行标记和计数；三是利用 ImmuCellAI 等工具进行免疫浸润分析，评估免疫细胞的浸润情况；四是借助 TCGA 数据库和 GEPIA2 网络工具进行泛癌分析。样本队列来源于中国四个中心的 ESCC 患者。

研究结果如下：

• 新辅助治疗疗效：nCRT 组 3 级及以上淋巴细胞减少的发生率更高（68.6% vs. 11.51%），pCR 率也更高（42.9% vs. 27.2%），达到 ypT0 阶段的患者比例更大（50.8% vs. 28.8%），阳性淋巴结检测率更低（25.7% vs. 41.4%），但两组的 DFS 和 OS 并无显著差异，且 nCRT 组 2 年复发率（28.3% vs. 27.7%）和远处转移率（11.5% vs. 5.2%）略高。这表明 nCRT 虽然肿瘤退缩效果较好，但血液学毒性风险更高，且更高的 pCR 率并未转化为生存优势。
• pCR 的异质性：亚组分析发现，pCR 亚组中 nICT 对预后更有利（nICT vs. nCRT 单独治疗，HR=0.20 [0.05–0.87]，P=0.031）。对于达到 pCR 的患者，nICT 组的 DFS 显著优于 nCRT 组（HR=0.2 [0.05-0.86]，P=0.031），OS 虽有改善趋势但未达统计学意义（HR = 0.36 [0.04-3.1]，P=0.356）；而未达到 pCR 的患者，两组的 DFS 和 OS 无差异。这说明 pCR 存在异质性，nICT - pCR 患者的 DFS 优于 nCRT - pCR 患者。
• CD8⁺ TRM 样细胞的作用：对术后样本进行 RNA 测序和免疫浸润分析，发现 nICT 组 pCR 患者的 CD8⁺ T 细胞、中性粒细胞和细胞毒性 T 细胞（Tc）浸润显著增加，且 nICT 组中 CD69 基因及一些 T 细胞共抑制分子表达升高。通过对 TCGA 泛癌数据集的分析，发现 CD69 高表达与更好的 DFS 相关（P<0.001），而 CD103 未达统计学意义。
• CD69⁺ CD8⁺ TRM 细胞亚群的差异：mIF 染色分析显示，pCR 患者术后 CD8⁺ T 细胞浸润更多，nICT 组 pCR 患者的 CD69⁺ CD103^? CD8⁺ TRM 亚群比例高于 nCRT 组，且 nICT - pCR 患者的 CD69⁺ CD8⁺ TRM 细胞浸润水平显著更高。此外，术前样本分析表明，达到 pCR 的患者术前 CD69⁺ CD8⁺ TRM 细胞比例更高，术后 nICT 和 nCRT 均使该细胞比例显著增加，且高比例的 CD69⁺ CD8⁺ TRM 细胞与更好的 DFS（p=0.016）和 OS（p=0.015）相关。

研究结论和讨论部分指出，nCRT 虽 pCR 率高，但 nICT 在控制远处转移和降低血液学毒性方面具有优势。pCR 存在异质性，nICT - pCR 患者生存获益更多。CD69⁺ CD8⁺ TRM 细胞比例或可作为食管鳞癌新辅助治疗预后的预测指标，免疫治疗可能通过增加该细胞浸润抑制肿瘤复发和转移。不过，该研究也存在局限性，如回顾性研究的固有偏倚、未全面比较两种治疗方式的副作用、随访时间较短以及未深入探究相同治疗方案下 pCR 患者的预后预测指标等。未来需进一步研究加以完善。

总的来说，该研究为食管鳞癌的新辅助治疗提供了新的见解，有助于指导临床医生更精准地选择治疗方案，改善患者预后，推动食管鳞癌治疗领域的发展。