全反式维甲酸增强 PI3K 和 mTOR 双重抑制剂 NVP-BEZ235 对三阴性乳腺癌的抗癌效果

为解决三阴性乳腺癌（TNBC）治疗难题，研究人员探究 NVP-BEZ235 与全反式维甲酸（ATRA）联合治疗效果，发现该联合疗法有抗癌潜力。

　　三阴性乳腺癌（TNBC）是乳腺癌中极具挑战性的亚型，严重威胁女性健康。在全球范围内，乳腺癌是女性最常被诊断出的癌症，也是癌症相关死亡的主要原因之一。TNBC 约占所有乳腺肿瘤的 20%，因其缺乏有效的靶向治疗手段、化疗效果不佳且副作用严重，使得治疗困难重重。当前针对 TNBC 的治疗策略，如单一使用 PI3K 抑制剂，效果并不理想，还可能引发严重不良反应。在此背景下，探寻更有效的治疗方案迫在眉睫。

来自土耳其健康科学大学等机构的研究人员开展了一项研究，旨在评估全反式维甲酸（ATRA）和 PI3K 与 mTOR 双重抑制剂 NVP-BEZ235 联合治疗对 TNBC 细胞系 MDA-MB-231 的抗癌效果。该研究成果发表在《Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology》上。

研究人员主要运用了以下几种关键技术方法：通过细胞活力测定（MTS 法）检测细胞活性；采用集落形成实验评估细胞的长期增殖能力；利用侵袭实验测定癌细胞穿透细胞外基质的能力；借助流式细胞术分析细胞周期；运用定量聚合酶链反应（qPCR）检测相关基因的表达水平。

研究结果如下：

1. ATRA 和 NVP-BEZ235 抑制 MDA-MB-231 细胞增殖：MTS 实验表明，NVP-BEZ235 以剂量和时间依赖的方式显著降低 MDA-MB-231 细胞活力，而 ATRA 单独处理时，除最高剂量（40 μM）在 48 h 有显著降低外，其他剂量处理后细胞活力无明显变化。确定联合治疗的有效剂量为 5 μM ATRA 和 1 μM NVP-BEZ235，该组合处理 MDA-MB-231 细胞 48 h 后，细胞活力降至约 50%，且对健康上皮细胞 MCF-10A 的毒性较低。
2. 联合治疗降低 MDA-MB-231 细胞集落形成潜力：集落形成实验显示，与对照组相比，ATRA、NVP-BEZ235 单独处理及二者联合处理均显著减小 MDA-MB-231 细胞的集落直径和数量，联合处理的抑制效果更明显。
3. NVP-BEZ235 和 ATRA 抑制 MDA-MB-231 细胞侵袭潜力：侵袭实验结果表明，ATRA 单独处理对 MDA-MB-231 细胞侵袭能力影响不显著，NVP-BEZ235 单独处理及联合处理则显著抑制细胞侵袭，且联合处理组的抑制效果更优。
4. 联合治疗使 MDA-MB-231 细胞周期阻滞于 G₀/G₁期：流式细胞术分析发现，与对照组相比，NVP-BEZ235 单独处理及联合处理使 MDA-MB-231 细胞在 G₀/G₁期的细胞数量增加，Sub G₀期（凋亡细胞）的频率也显著增加。
5. NVP-BEZ235 和 ATRA 诱导 MDA-MB-231 细胞凋亡相关基因表达变化：qPCR 分析显示，与对照组相比，ATRA、NVP-BEZ235 单独处理及联合处理均使 mTOR 和 BCL-2 基因表达水平下降，Caspase-3 和 Caspase-9 基因表达水平上升，其中联合处理对 Caspase-3 基因表达的影响最为显著。

研究结论与讨论部分指出，该联合治疗显著抑制了 MDA-MB-231 细胞的增殖、集落形成和侵袭能力，使细胞周期阻滞于 G₀/G₁期，并诱导细胞凋亡。这一联合疗法展现出对 TNBC 细胞系 MDA-MB-231 潜在的抗增殖效果，为未来 TNBC 的临床治疗提供了新的方向和理论依据，有望改善 TNBC 患者的治疗现状，具有重要的临床意义。