新型抗体偶联药物 OBI-992 用于癌症治疗的临床前评估：开启肿瘤治疗新征程

为探究新型抗体偶联药物 OBI-992 疗效，研究人员开展体外研究，发现其具独特优势，支持临床开发。

　　《新型抗体偶联药物 OBI-992 用于癌症治疗的临床前评估：开启肿瘤治疗新征程》

在癌症治疗的领域中，肿瘤的复杂性和异质性一直是难以攻克的难题，使得传统治疗手段在应对癌症时往往捉襟见肘。抗体偶联药物（Antibody–drug conjugates，ADCs）的出现，犹如一道曙光，为癌症治疗带来了新的希望。它就像一枚精准制导的 “智能炸弹”，能够将有毒的药物分子直接输送到癌细胞中，大大提高了治疗的针对性和有效性，同时减少对正常细胞的损伤。

滋养层细胞表面抗原 2（Trophoblast cell surface antigen 2，TROP2），作为一个在多种上皮癌中高度表达的跨膜糖蛋白，成为了癌症治疗领域的 “热门靶点”。目前，已经有针对 TROP2 的 ADCs 药物获批上市，如 sacituzumab govitecan（SG）和 datopotamab deruxtecan（Dato-DXd），还有像 MK-2870 等处于临床开发后期阶段。然而，现有的这些药物在使用过程中，逐渐暴露出一些问题，比如耐药性的产生，这使得癌症治疗的效果大打折扣。因此，开发更有效的 TROP2 靶向 ADCs 药物迫在眉睫。

来自台北的 OBI Pharma, Inc. 的研究人员，针对这一现状开展了一项关于新型抗体偶联药物 OBI-992 的临床前评估研究。他们希望通过深入研究 OBI-992 的特性，为癌症治疗提供更优的选择。该研究成果发表在《Scientific Reports》上，引起了广泛关注。

研究人员在开展此项研究时，采用了多种关键技术方法。在细胞实验方面，通过培养多种癌细胞系，如人前列腺癌 DU145 细胞、人胰腺癌 Capan-1 细胞等，为后续实验提供研究样本。利用酶联免疫吸附测定（ELISA）来分析抗原结合情况，以此确定抗体与 TROP2 的结合特性。运用表面等离子共振（SPR）技术测定 TROP2 抗体与 TROP2 蛋白的结合动力学。借助流式细胞术评估抗体与癌细胞的结合亲和力、抗体和 ADC 的内化情况。通过蛋白质免疫印迹（Western blot）检测相关蛋白的表达水平，探究药物作用机制和耐药机制。

研究结果如下：

• R4702 的独特结合特性：通过 ELISA 实验发现，R4702 与 TROP2 的结合表位与 sacituzumab 和 datopotamab 不同，它特异性结合 TROP2 胞外结构域的富含半胱氨酸结构域（CRD）中的 CRD2.1 区域。SPR 分析显示，R4702 对 TROP2 具有较高的结合亲和力，其平衡解离常数（KD）表明它与 TROP2 的结合亲和力分别是 datopotamab 的 320 倍和 sacituzumab 的 8 倍。
• OBI-992 的结合与内化：在结合亲和力方面，虽然 R4702 基于 SPR 测量显示出更好的 TROP2 亲和力，但在乳腺癌 MCF-7 细胞和胃癌 NCI-N87 细胞中，其与 datopotamab 和 sacituzumab 表现出相当的细胞结合亲和力。在 TROP2 表达的胰腺癌细胞 BxPC-3 和胃癌细胞 NCI-N87 中，OBI-992 和 R4702 在 2 小时（BxPC-3 细胞）和 4 小时（NCI-N87 细胞）时达到最大内化，约为 40%。与基准抗体相比，R4702 的最大内化水平低于 sacituzumab 和 datopotamab，但高于参考抗 HER2 曲妥珠单抗。
• OBI-992 的细胞毒性：在比较拓扑异构酶 I（Topoisomerase I，TOP1）抑制剂的效力时，exatecan 对三阴乳腺癌 MDA-MB-231、胃癌 NCI-N87 和胰腺癌 Capan-1 细胞表现出的细胞毒性比 DXd 和 SN-38 强 2 - 5 倍。在评估 OBI-992 细胞毒性与 TROP2 表达水平的关系时，发现两者呈正相关。在 3D 前列腺癌 DU-145 细胞球体模型中，OBI-992 与 Dato-DXd 在相似浓度下表现出相当的细胞毒性活性，而 SG 在较低浓度下表现出更高的细胞毒性。
• 耐药机制研究：研究人员建立了对 TROP2 - ADCs 耐药的 DLD-1 结肠癌细胞系。Western blot 分析显示，OBI-992 耐药细胞（R-OBI-992）中 TROP2 蛋白表达水平略有降低，乳腺癌耐药蛋白（Breast cancer resistance protein，BCRP）和 P - 糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）水平与亲本细胞对照相当；而在 SG 耐药（R-SG）和 Dato-DXd 耐药（R-Dato-DXd）细胞中，BCRP 水平较高，且 R-SG 中 BCRP 水平显著高于 R-Dato-DXd，R-Dato-DXd 细胞中 TROP2 表达水平大幅降低。
• 与 PARP 抑制剂的协同效应：研究发现 TOP1 抑制剂与聚（ADP - 核糖）聚合酶（Poly (ADP-ribose) polymerase，PARP）抑制剂具有协同作用。筛选研究表明，talazoparib 与 exatecan 联合使用时，在 MDA-MB-231 细胞中，talazoparib 的 IC₅₀值提高了 42 倍，在 NCI-N87 细胞中，不同 PARP 抑制剂与 exatecan 联合使用时细胞毒性增加 1.7 - 8.6 倍，talazoparib 增强效果最明显。进一步研究发现，talazoparib 与 OBI-992 联合在不同癌细胞系（MDA-MB-231、NCI-N87 和 Capan-1）中均表现出协同效应，联合处理后癌细胞中 DNA 损伤标记 γH2AX 水平高于单独使用 OBI-992 或 talazoparib 时的水平。

综合上述研究结果，OBI-992 展现出了与现有 TROP2 ADCs 药物不同的特性。其使用的 TROP2 抗体 R4702 具有独特的结合表位，这可能使其在克服因 sacituzumab 和 datopotamab 结合表位突变导致的耐药性方面具有优势。OBI-992 在多种癌细胞类型中表现出高细胞毒性，且其细胞毒性与 TROP2 表达呈正相关。此外，OBI-992 与 PARP 抑制剂联合使用具有协同效应，这为癌症治疗提供了新的联合治疗策略，有望扩大其临床应用范围。然而，研究也发现 OBI-992 耐药细胞中虽然 BCRP 和 P-gp 未上调，但 TROP2 表达略有下降，仍需进一步探究其潜在的耐药机制。总体而言，这项研究为 OBI-992 的进一步临床研究和开发奠定了重要基础，为癌症治疗带来了新的希望和方向。