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研究人员针对膀胱癌（BCa）预后差问题，研究 SLC7A7 作用，发现其经 miR-152-3p/FGFR3 轴促血管生成，为治疗提供新方向。
膀胱癌（Bladder cancer，BCa）是泌尿系统常见的恶性肿瘤，如同隐藏在人体内部的 “定时炸弹”，严重威胁着人们的健康。在众多 BCa 患者中，15 - 20% 会发展为肌肉浸润性膀胱癌（muscle-invasive BCa，MIBC），这大大增加了患者的死亡率。尽管现代医学在不断进步，各种治疗手段层出不穷，但 BCa 患者的总体生存率（overall survival，OS）却依旧没有明显改善。目前，靶向治疗虽被视为治疗 BCa 的新希望，但合适的靶向位点和作用机制仍有待探索。肿瘤血管生成在 BCa 的发展进程中起着关键作用，本应是抗癌治疗的理想靶点，可现有的血管内皮生长因子 / 血管内皮生长因子受体（VEGF/VEGFR）抑制剂在临床应用中，与单独化疗相比，并未提升患者的 OS，这表明抗血管生成疗法还有很大的研究空间。在这样的背景下，南方医科大学南方医院等机构的研究人员开展了深入研究，试图揭开 BCa 发展的神秘面纱，为治疗提供新的方向 。该研究成果发表在《npj Precision Oncology》上。
研究人员主要运用了多种技术方法来开展此项研究。在数据挖掘方面，从 TCGA 和 GEO 数据库获取 BCa 患者数据进行分析；细胞实验技术上，培养多种细胞系，如人 BCa 细胞系 T24、UMUC-3、SW780 等，并进行细胞转染；动物实验方面，构建了裸鼠皮下移植瘤模型；检测技术层面，采用蛋白质免疫印迹法（Western blot）、实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）等检测相关蛋白和基因的表达，还运用了外泌体提取与鉴定技术。通过这些方法，研究人员逐步深入探索 BCa 的发病机制。
研究结果如下：
- SLC7A7 在 BCa 组织中高表达且与不良预后相关：研究人员对 Geo 公共数据库中的 GSE32548 基因集进行分析，将样本分为 MIBC 和非 MIBC（non-MIBC，NMIBC）组。发现 MIBC 组有 58 个上调基因和 102 个下调基因，对上调基因的 KEGG 富集分析显示，其在蛋白质消化和吸收过程中显著富集，这暗示了氨基酸代谢在 MIBC 发展中的重要作用。进一步对 SLC7A 家族十个主要成员转录水平分析发现，SLC7A7 在 MIBC 中表达极高，在高等级 BCa 组织，尤其是 TIII期和 TVI期表达增加。同时，BCa 样本中 SLC7A7 的 RNA 和蛋白质水平均显著升高，且 MIBC 肿瘤组织中更高。 Kaplan-Meier 生存分析表明，SLC7A7 高表达的 BCa 患者 OS 更低，这表明其与不良预后相关。
- SLC7A7 是潜在的血管生成促进因子：通过基因集富集分析（GSEA）发现，与 SLC7A7 正相关的基因在细胞表面黏附和细胞黏附分子相关过程中富集。同时，内皮细胞标记物血小板内皮细胞黏附分子 - 1（PECAM1/CD31）和血管内皮钙黏蛋白（Ve-cadherin，CDH5）与 SLC7A7 表达呈正相关。对 44 例 BCa 患者临床组织样本的分析也证实，SLC7A7 与 CD31 表达正相关，这表明 SLC7A7 在血管生成中可能起着关键作用。
- 沉默 SLC7A7 抑制体内血管生成：研究人员在 BCa 细胞系 T24 和 SW780 中通过慢病毒转染构建了稳定沉默 SLC7A7 的细胞系。利用裸鼠皮下肿瘤模型研究发现，沉默 SLC7A7 后，肿瘤体积、重量和大小均显著减小，且 CD31 表达明显降低，这表明沉默 SLC7A7 可抑制肿瘤血管生成，进而抑制肿瘤进展。
- SLC7A7 介导的外泌体参与 BCa 血管生成：研究人员假设高表达 SLC7A7 的肿瘤细胞可能影响肿瘤微环境（TME）促进血管生成。通过鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）模型验证，发现 SLC7A7 敲低的肿瘤细胞条件培养基（CM）可显著减少血管数量和分支。进一步研究发现，SLC7A7 可能通过外泌体机制调节血管生成。从细胞培养上清中提取的外泌体经鉴定为 100 - 150nm 的膜泡，且能被人脐静脉内皮细胞（HUVECs）摄取。功能实验表明，SLC7A7 敲除细胞来源的外泌体（shSLC7A7-Exos）可显著抑制 HUVECs 的增殖、血管生成、迁移，并促进细胞衰老。
- SLC7A7 沉默介导外泌体 miR-152-3p 上调影响 HUVECs 血管生成：研究人员对分离的外泌体进行 miRNA 测序，发现沉默 SLC7A7 后，外泌体中 miR-152-3p 显著上调。qRT-PCR 检测也证实，SLC7A7 敲除细胞来源的外泌体和经其处理的 HUVECs 中 miR-152-3p 水平均显著升高，这表明 miR-152-3p 与血管生成相关。
- 外泌体 miR-152-3p 抑制 HUVECs 的增殖、侵袭和血管生成：研究人员转染 miR-152-3p 抑制剂进行功能验证，结果显示，该抑制剂可显著促进 HUVECs 的增殖、血管生成、迁移，并抑制细胞衰老，这进一步证明了 SLC7A7 通过调节外泌体 miR-152-3p 水平在血管生成中起关键作用。
- miR-152-3p 通过靶向 FGFR3 抑制血管生成：利用 Starbase 预测并通过双荧光素酶报告基因分析、qRT-PCR 和 Western blot 验证，发现 miR-152-3p 可靶向成纤维细胞生长因子受体 3（FGFR3），抑制其表达。过表达 miR-152-3p 可抑制 HUVECs 的增殖、管腔形成和迁移，促进细胞衰老，而转染 miR-152-3p 抑制剂则产生相反效果。
- SLC7A7 通过 miR-152-3p/FGFR3 轴促进血管生成：体内实验表明，敲低 SLC7A7 可延迟肿瘤生长，增加 miR-152-3p 表达，降低 CD31 和 FGFR3 水平，这表明 SLC7A7 可通过 miR-152-3p/FGFR3 信号网络促进血管生成。
综上所述，该研究揭示了 SLC7A7 在 BCa 组织中高表达，且与血管生成正相关。外泌体 miR-152-3p 在 SLC7A7 沉默后发挥抑制血管生成的作用，其机制与 miR-152-3p/FGFR3 轴密切相关 。这一研究成果为 BCa 的治疗提供了新的潜在靶点和理论依据，有望推动 BCa 靶向治疗的发展，为众多 BCa 患者带来新的希望。不过，研究也存在一些局限性，如未探究 SLC7A7 调节 miR-152-3p 水平的具体机制，还需进一步研究加以完善。
