塞拉利昂冈比亚按蚊杀虫剂抗性机制研究：为疟疾防控提供关键依据

为明确塞拉利昂疟疾媒介杀虫剂抗性状况，研究人员开展相关研究，发现多种抗性特征，为防控决策提供依据。

　　疟疾，这个古老而又致命的疾病，长期以来一直威胁着人类的健康。在全球范围内，尤其是非洲地区，疟疾的肆虐令人揪心。2021 年，全球约有 2.47 亿疟疾病例，61.9 万人死亡，其中 95% 的病例来自非洲 。在非洲，疟疾死亡人数的 96% 发生在当地，5 岁以下儿童更是占了疟疾死亡人数的 80%。从 2000 年到 2015 年，全球疟疾病例有所下降，但自 2015 年后，下降速度明显放缓，甚至在 2021 年出现停滞。

室内滞留喷洒（IRS）和杀虫剂处理蚊帐（ITNs）曾是控制疟疾的有效手段，在过去二十年为全球疟疾防控做出了重要贡献。然而，随着杀虫剂在农业和公共卫生领域的大量使用，蚊子对杀虫剂产生了抗药性，这使得疟疾防控成果面临巨大威胁。

塞拉利昂是疟疾的高发地区，疟疾常年稳定传播，严重影响着当地居民的健康，是导致发病率和死亡率居高不下的主要原因。此前，由于内战等因素，塞拉利昂对疟蚊的杀虫剂抗性研究受到阻碍，相关情况并不明确。为了更好地指导疟疾防控工作，塞拉利昂国家疟疾控制规划（NMCP）与 PMI VectorLink 项目合作，开展了一项重要研究，相关成果发表在《Malaria Journal》上。

研究人员主要采用了以下几种关键技术方法：一是通过世界卫生组织（WHO）管试法和美国疾病控制与预防中心（CDC）瓶试法，评估冈比亚按蚊对多种杀虫剂的敏感性；二是运用分子生物学技术，包括 SINE 聚合酶链反应（PCR）和 PCR - 限制性片段长度多态性（PCR - RFLP），对蚊子进行分子物种鉴定；三是利用 TaqMan 检测法，筛查杀虫剂抗性的分子标记，如击倒抗性（kdr）的 L1014F、1014S、N1575Y 以及 Ace-1^G119S突变。

研究结果如下：

1. 杀虫剂敏感性和强度测定：研究人员成功饲养并测试了 5326 只冈比亚按蚊。结果显示，来自所有采样地点的冈比亚按蚊对溴氰菊酯、氯菊酯和 α - 氯氰菊酯这三种拟除虫菊酯类杀虫剂的诊断剂量均产生了抗性。在 24 小时暴露后，死亡率较低，如在博城，α - 氯氰菊酯处理后的死亡率仅为 10% 。而且，对这三种拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性强度较高，在 10 倍诊断剂量下，死亡率仍低于 98% 。不过，冈比亚按蚊对氯虫酰胺、噻虫胺和甲基嘧啶磷表现出敏感，对恶虫威则可能存在抗性。
2. 增效剂测定：暴露于 4% 的增效醚（PBO）后，每种拟除虫菊酯类杀虫剂处理下的蚊子死亡率均有所增加，但在任何地点，都没有使蚊子的敏感性完全恢复到 98% 以上。例如，在博城，经 PBO 预处理后，溴氰菊酯处理的蚊子死亡率绝对增加了 43.9% - 52.9%。
3. 分子物种鉴定：在 200 只接受分子分析的蚊子样本中，191 只（95.5%）成功鉴定出了同胞物种。其中，冈比亚按蚊狭义种（An. gambiae s.s.）占主导地位（81.7% ，95% 置信区间 75.3 - 86.7），其次是科卢兹按蚊（An. coluzzii，17.8% ，95% 置信区间 12.8 - 24.1），还有一只为冈比亚按蚊和科卢兹按蚊的杂交种（0.5% ，95% 置信区间 0.03 - 3.3）。
4. 抗性机制的分子特征：kdr L1014F 抗性等位基因的频率较高，达到 0.98（373/380；95% 置信区间：0.94 - 0.99），而 kdr L1014S 突变频率较低，为 0.02（8/382；95% 置信区间：0.01 - 0.04） 。N1575Y 突变的频率为 0.089（34/384），且均为杂合形式。此外，Ace-1^G119S突变的总体频率为 0.14（N = 52），在科卢兹按蚊中未发现该突变，但在冈比亚按蚊狭义种中存在，且在该位点检测到了与哈迪 - 温伯格平衡的显著偏差和杂合子的缺乏。

研究结论和讨论部分表明，冈比亚按蚊狭义种是塞拉利昂的主要疟疾传播媒介，其次是科卢兹按蚊。塞拉利昂的冈比亚按蚊对拟除虫菊酯类杀虫剂高度抗性，不过 PBO 预处理可部分恢复其敏感性，这表明 P450 酶介导的代谢抗性可能发挥了作用。同时，kdr L1014F 抗性突变的高频率存在，与对拟除虫菊酯类杀虫剂的高表型抗性相符。新发现的 N1575Y 突变值得密切关注，因为它可能进一步降低杀虫剂的效果，威胁疟疾防控工作，这也为推广非拟除虫菊酯类蚊帐提供了依据。此外，研究还发现冈比亚按蚊对部分杀虫剂敏感，对恶虫威可能存在抗性，这为室内滞留喷洒（IRS）项目选择合适的杀虫剂提供了关键数据。例如，由于对噻虫胺敏感，所以选择其用于 IRS。然而，恶虫威相关的 Ace-1^G119S突变需要持续监测，以指导未来的 IRS 工作。总体而言，该研究为塞拉利昂疟疾防控策略的制定提供了重要依据，有助于进一步开展昆虫学研究和杀虫剂抗性监测与管理工作。