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为解决杂交狼尾草青贮问题,研究人员探究副法拉格乳杆菌(L. parafarraginis)等对其青贮品质影响,成果显著。
# 接种副法拉格乳杆菌提升杂交狼尾草青贮品质的研究解读
在当今畜牧业蓬勃发展的时代,动物源性食品成为人类获取蛋白质的关键来源,占全球食品供应的 16%。这使得对牲畜饲料的需求与日俱增,平衡饲料与粮食作物生产的难题也愈发凸显。杂交狼尾草(Pennisetum Americanum × Pennisetum purpureum)作为一种极具潜力的饲料作物,虽产量高,但在保存和利用方面却困难重重。其新鲜植株水分含量高,主要产区的气候不利于鲜草储存,而且加工成干草时,水溶性碳水化合物含量低、木质素含量高,这些因素都限制了它的有效利用。
青贮发酵是保存青饲料营养价值的常用方法,但新鲜牧草表面的微生物组成复杂,乳酸菌(LAB)比例较低,发酵时有害微生物易过度繁殖,导致营养流失,青贮品质下降。发酵后,氧气的重新引入会促进好氧微生物生长,消耗营养,提高青贮温度和 pH 值,引发霉菌滋生和腐烂,造成经济损失,还存在食品安全隐患。
为应对这些挑战,福建农林大学的研究人员开展了一项极具意义的研究,旨在探究副法拉格乳杆菌(L. parafarraginis)单独或与柠檬酸联合使用对杂交狼尾草青贮品质、微生物群落结构和代谢特征的影响。该研究成果发表在《BMC Plant Biology》上,为安全、优质杂交狼尾草青贮的生产提供了重要的理论依据。
研究人员采用了多种关键技术方法。在实验设置上,将杂交狼尾草分为三组,分别添加 10ml 蒸馏水(CON)作为对照组,添加1 × 1 0 6 cfu/g 的 L. parafarraginis(LP),以及添加1 × 1 0 6 cfu/g 的 L. parafarraginis 和 1% 柠檬酸(LCA)。发酵在 25℃下持续 60 天。实验结束后,运用多种检测技术测定营养成分和发酵指标,如用 pH 计测 pH 值,用自动氮分析仪测总氮(TN),进而计算粗蛋白(CP)等;通过有氧暴露实验评估青贮在有氧环境下的稳定性;利用 16S rRNA 基因和内部转录间隔区(ITS)区域扩增、测序来分析微生物群落;采用液相色谱 - 串联质谱(LC-MS/MS)技术进行代谢组学分析;使用统计学方法分析数据,评估发酵时间、处理效果及其相互作用的显著性。
研究结果
营养和发酵特征 :与 CON 组相比,LP 组和 LCA 组发酵后的杂交狼尾草青贮干物质(DM)、水溶性碳水化合物(WSC)和粗蛋白(CP)含量增加,酸性洗涤纤维(ADF)和中性洗涤纤维(NDF)浓度显著降低。LP 组的 CP、WSC 浓度更高,ADF 和 NDF 浓度更低。LP 组和 LCA 组的乳酸(LA)含量显著高于 CON 组,LCA 组的 LA 水平略高于 LP 组。LP 组的乙酸(AA)和丙酸(PA)含量最高,LCA 组最低。
有氧条件下饲料质量变化 :所有处理组的 pH 值随有氧暴露时间延长而升高,但 LP 组和 LCA 组在有氧暴露 0 - 9 天内的 pH 值均低于 CON 组。LA 含量在所有处理组中随有氧暴露时间增加而降低,但 LP 组和 LCA 组的 LA 浓度始终高于 CON 组。LP 组在有氧暴露 9 天后,乳酸菌(LAB)含量最高,CON 组最低;而酵母和需氧细菌数量在所有组中呈上升趋势,CON 组最多。
杂交狼尾草青贮的微生物生态系统 :LP 组细菌 α - 多样性指数(ACE 和 Chao1)显著低于 LCA 组,CON 组居中。在物种水平上,CON 组的优势菌群有害菌较多,如广西梭菌(Clostridium guangxiense)等;LP 组主要为有益的乳酸菌,如副法拉格乳杆菌(Lentilactobacillus parafarraginis)和植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum);LCA 组的优势菌与 LP 组不同,且 L. parafarraginis 不再是优势菌。真菌群落方面,接种组的真菌丰度和多样性高于 CON 组,LP 组的真菌群落与 CON 组和 LCA 组差异较大。
杂交狼尾草青贮的代谢组学特征 :LC-MS/MS 分析共鉴定出 2712 种代谢物,主要分为有机酸、脂质、碳水化合物等九类,其中羧酸(有机酸的一种)含量最多。主成分分析显示不同处理组的代谢谱存在显著差异。LP 组和 LCA 组的脂质、有机酸、肽和核酸浓度高于 CON 组,而碳水化合物、核酸和某些肽的水平较低。在氨基酸代谢方面,LP 组和 LCA 组均调节了氨基酸谱,LCA 组中 L - 酪氨酸浓度上调,且 “色氨酸代谢” 途径显著富集。
研究结论与讨论
接种 L. parafarraginis 显著提升了杂交狼尾草青贮的发酵品质,减少了有害微生物的数量,增加了有机酸含量,这表明其有助于改善青贮的风味。当 L. parafarraginis 与柠檬酸联合使用时,进一步优化了氨基酸代谢,增加了 L - 酪氨酸浓度,富集了色氨酸代谢途径,从而全面提升了青贮的品质。
在青贮发酵过程中,L. parafarraginis 促进 LA 发酵,降低 pH 值,抑制有害微生物生长,减少营养损失。同时,它产生的 AA 和 PA 增强了青贮的有氧稳定性。而柠檬酸的添加在一定程度上影响了微生物群落结构和代谢途径,与 L. parafarraginis 协同作用,改善了青贮的品质。
这项研究为青贮饲料的生产提供了新的思路和方法,证实了 L. parafarraginis 及其与柠檬酸的组合作为青贮添加剂的巨大潜力,有望推动畜牧业青贮饲料品质的提升,促进畜牧业的可持续发展。
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