突尼斯首次发现柑橘裂皮类病毒 - 开心果株系侵染野生阿月浑子树

为探究突尼斯开心果植株是否感染柑橘裂皮类病毒（CBCVd-pis），研究人员开展调查，首次发现其侵染阿月浑子树，需加强防控。

　　# 突尼斯野生阿月浑子树的 “神秘杀手”：柑橘裂皮类病毒的新发现
在广袤的植物世界里，病害就像隐藏在暗处的 “幽灵”，时刻威胁着植物的健康。柑橘裂皮类病毒（Citrus bark cracking viroid，CBCVd）便是其中之一，它是隶属于 Cocadviroid、Pospiviroidae 科的一种重要植物病原体。这种病毒此前在加利福尼亚被称为柑橘类病毒 IV，它对柑橘植株有着不小的破坏力，在枳（Poncirus trifoliata）上，会导致树皮开裂的症状。在斯洛文尼亚，它还让啤酒花（Humulus lupulus L.）染上重病。而在加利福尼亚的开心果树上，人们又发现了一个特殊的菌株 ——CBCVd_-pis 。

在突尼斯，之前已有报道称柑橘类植物受到 CBCVd 的侵害，但开心果植株是否也被这种病毒 “盯上”，却一直是个未知数。为了揭开这个谜团，2021 年 10 月，一场针对开心果植株的研究拉开了帷幕。来自突尼斯迦太基大学植物保护实验室（Laboratoire de Protection Des Végétaux）、园艺实验室（Laboratoire d’Horticulture）以及意大利巴里地中海农业研究所（Istituto Agronomico Mediterraneo Di Bari）的研究人员，把目光投向了突尼斯北部的野生阿月浑子树（Pistacia atlantica）。

研究人员在野外进行了细致的调查，发现这些阿月浑子树出现了各种异常症状，比如叶片变形、黄化，植株也变得矮小。带着疑问，研究人员采集了阿月浑子树的叶片样本，利用逆转录聚合酶链反应（Reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）技术，使用特定的引物对（Det F/Det R），来检测样本中是否存在此前报道过的能感染开心果的类病毒。

经过检测，研究人员发现，在被分析的 66 株植株中，有 75% 的植株检测结果为 CBCVd_-pis 阳性。随后，研究人员对其中 8 个 CBCVd_-pis 分离株（PV006687 - PV006694）进行了测序。令人惊讶的是，这些分离株与来自美国的 W11 菌株（MF198463.1）以及来自土耳其的 GA/8 菌株（OR419772.1）在核苷酸上具有 100% 的同一性。

这项研究的结果发表在《Journal of Plant Pathology》上，具有重要的意义。它首次证实了 CBCVd_-pis 在突尼斯能够侵染野生阿月浑子树，这为植物病理学研究提供了新的信息。同时，也给农业生产敲响了警钟，因为这意味着需要加强对类病毒的监测和生物安全措施，尤其是对于那些以阿月浑子树为砧木嫁接的果树，以防止病毒进一步传播，保护开心果作物的健康生长。

此次研究主要运用了两种关键技术：

1. 样本采集：研究人员从突尼斯北部野生阿月浑子树上采集叶片样本，这些样本是后续研究的基础。
2. RT-PCR 检测与测序：利用 RT-PCR 技术，通过特定引物对扩增出 199bp 的片段，以此检测 CBCVd_-pis 的存在；对部分阳性样本进行测序，确定其与其他菌株的核苷酸同一性。

研究结果

1. 症状观察：通过野外调查，发现野生阿月浑子树出现叶片变形、黄化和植株矮化等症状。
2. 病毒检测：运用 RT-PCR 技术，从阿月浑子树叶片样本中成功检测出 CBCVd_-pis 的 cDNA，66 株植株中有 75% 检测结果呈阳性。
3. 序列分析：对 8 个 CBCVd_-pis 分离株进行测序，发现其与美国的 W11 菌株和土耳其的 GA/8 菌株在核苷酸上 100% 相同。

研究结论与讨论

研究人员首次发现 CBCVd_-pis 能够侵染突尼斯的野生阿月浑子树。这一发现不仅填补了该地区在这方面研究的空白，也为全球植物病理学研究提供了新的案例。从实际应用角度看，为防止 CBCVd_-pis 的传播，农业生产者和相关部门需要加强对开心果作物的监测，严格执行生物安全措施，避免使用受感染的阿月浑子树作为砧木，从而保障开心果产业的可持续发展。这一研究成果为植物病毒防控提供了重要的理论依据和实践指导，对维护植物生态系统的稳定和农业生产的安全有着不可忽视的作用。