综述：循环肿瘤 DNA：淋巴瘤诊疗的新曙光

为解决淋巴瘤诊疗难题，研究人员探究循环肿瘤 DNA（ctDNA）在淋巴瘤中的应用，发现其有重要诊疗价值。

　　淋巴瘤是一种起源于淋巴细胞和淋巴组织的恶性肿瘤，近年来发病率显著上升。其病理类型复杂多样，不同亚型的临床表现差异很大，这使得准确的分类和个性化治疗变得至关重要。目前，淋巴瘤的诊断金标准是淋巴结或淋巴组织的侵入性病理检查，但对于腹膜后和中枢神经系统等深部肿瘤，这种方法存在局限性，而且活检还可能引发并发症。此外，计算机断层扫描（CT）和正电子发射断层扫描 / 计算机断层扫描（PET/CT）虽然在治疗评估和监测中很重要，但无法检测早期的克隆演变和微小残留病（MRD）。

为了攻克这些难题，中国科学院合肥物质科学研究院、中国医科大学附属第一医院、山东大学齐鲁医院等机构的研究人员开展了关于循环肿瘤 DNA（ctDNA）在淋巴瘤中应用的研究。该研究成果发表在《Journal of Hematology & Oncology》上，为淋巴瘤的诊疗带来了新的希望。

研究人员主要运用了基于聚合酶链反应（PCR）的方法和下一代测序（NGS）技术。其中，PCR 方法包括 BEAMing（beads, emulsion, amplification, and magnetics）、等位基因特异性寡核苷酸 PCR（ASO-PCR）和数字液滴 PCR（ddPCR）等；NGS 技术则涵盖了全基因组测序（WGS）、全外显子组测序（WES）、癌症个性化深度测序（CAPP-seq）等多种手段。研究涉及多个淋巴瘤患者样本队列，通过对这些样本的检测分析来探究 ctDNA 的作用。

淋巴瘤的分子遗传学特征：淋巴瘤主要分为非霍奇金淋巴瘤（NHL，约占 85 - 90%）和霍奇金淋巴瘤（HL，约占 10 - 15%）。NHL 中又以 B 细胞来源的居多，如弥漫大 B 细胞淋巴瘤（DLBCL）、滤泡性淋巴瘤（FL）等。不同类型的淋巴瘤具有独特的基因变异特征，DLBCL 存在显著的遗传异质性，其致病变异影响 B 细胞分化、受体信号传导、细胞凋亡等多个关键过程；MCL 由 t (11;14)(p13;q32) 易位导致 CCND1 过表达；FL 则常出现 t (14;18)(q32;q21) 易位。这些基因变异为后续研究 ctDNA 在淋巴瘤中的应用奠定了基础。

ctDNA 检测技术：传统的基因组分析在淋巴瘤诊疗中面临挑战，而 ctDNA 分析提供了一种非侵入性的替代方法。基于 PCR 的检测方法成本效益高、周转时间快，BEAMing 可通过微乳液中的磁珠 PCR 扩增和流式细胞术，实现对核苷酸变异的高灵敏度检测和定量；ASO-PCR 利用独特设计的引物检测单核苷酸变异（SNV）；ddPCR 能将 DNA 分子分区进行单个 PCR 扩增，实现高灵敏度和绝对定量。NGS 技术则能对 DNA 分子进行大规模平行测序，全面评估突变情况，免疫球蛋白高通量测序（IgHTS）可用于检测 MRD，CAPP-seq 结合独特的条形码策略和生物信息学算法，提高了 ctDNA 检测的灵敏度。

ctDNA 在淋巴瘤诊疗中的应用

• 疾病负担评估和治疗疗效预测：在 DLBCL 中，治疗前的 ctDNA 水平与疾病负担相关，可预测患者的临床结局。研究表明，基线 ctDNA 水平与总代谢肿瘤体积（TMTV）、国际预后指数（IPI）等指标相关，且对接受标准免疫化疗患者的无事件生存期（EFS）有预测价值。
• 风险分层和治疗反应监测：ctDNA 在 DLBCL 的风险分层和治疗反应监测中发挥重要作用。通过 ctDNA 分子反应评估，可将患者分为早期分子反应（EMR）和主要分子反应（MMR）等不同风险组，这比治疗前的 ctDNA 水平更能预测患者的预后。在复发 / 难治性（R/R）DLBCL 中，ctDNA 水平也可用于评估治疗反应和预测生存结局。
• 微小残留病监测：ctDNA 监测为 DLBCL 的 MRD 检测提供了一种非侵入性、无辐射的方法。多项研究显示，ctDNA 监测在检测复发方面比传统影像学更具优势，能够提前数月发现复发迹象，有助于及时干预。
• 其他淋巴瘤类型中的应用：在其他淋巴瘤类型中，ctDNA 同样具有重要价值。在 MCL 中，治疗前 ctDNA 水平与预后指标相关，且 ctDNA 分析可揭示治疗耐药机制；在 FL 中，ctDNA 可用于筛查基因变异、评估预后和监测疾病复发；在中枢神经系统淋巴瘤（CNSL）中，ctDNA 分析有助于诊断、监测和预后评估；在周围 T 细胞淋巴瘤（PTCL）中，ctDNA 可用于诊断、监测治疗反应和预测预后；在 HL 中，ctDNA 分析可用于诊断、评估克隆结构和进化，以及监测治疗反应和预测复发。

研究表明，ctDNA 作为一种生物标志物，在淋巴瘤的诊断、风险分层、治疗监测和 MRD 评估等方面具有巨大潜力。它能够通过非侵入性采样提供全面的分子信息，实现对疾病负担、治疗反应和克隆进化的实时跟踪，为淋巴瘤的个性化治疗开辟了新道路。不过，ctDNA 检测要想完全融入常规临床实践，还需克服一些挑战，比如规范预分析工作流程、确定最佳临床阈值以及开发强大的计算方法来处理复杂的数据等。未来，随着技术的不断进步和研究的深入，ctDNA 有望成为淋巴瘤诊疗中不可或缺的工具，进一步提高淋巴瘤患者的治疗效果和生存率。