抑制组蛋白去乙酰化酶 6 缓解神经性疼痛的机制研究

研究人员针对神经性疼痛难题，研究 HDAC6 抑制剂 ACY-1215，发现其可缓解疼痛，具重要意义。

　　

在神经的世界里，一场无声的 “战争” 正在悄然上演。神经性疼痛，这个由神经系统损伤或功能障碍引发的 “顽敌”，如同隐匿在黑暗中的幽灵，悄无声息地影响着全球约 7 - 10% 人口的生活。它带来的自发疼痛、痛觉过敏、异常性疼痛和感觉异常等症状，就像一道道枷锁，严重束缚着患者的生活，降低他们的生活质量。

目前，临床治疗神经性疼痛的药物，如抗癫痫药（加巴喷丁、普瑞巴林）、抗抑郁药（阿米替林、文拉法辛）以及阿片类药物和利多卡因贴片等，效果往往不尽如人意，还伴随着各种副作用。因此，寻找更有效的治疗方法迫在眉睫。

为了攻克这一难题，宁波大学和宁波市第二医院的研究人员挺身而出。他们将目光聚焦于组蛋白去乙酰化酶 6（HDAC6）和信号转导及转录激活因子 3（STAT3），试图揭开它们在神经性疼痛中的神秘面纱，探索新的治疗策略。相关研究成果发表在《Journal of Neuroinflammation》杂志上。

研究人员开展此项研究时，用到了多种关键技术方法。首先是建立 spared nerve injury（SNI）小鼠模型模拟神经性疼痛，然后通过 Von frey 测试评估小鼠机械痛阈值。在细胞实验方面，对小鼠海马细胞（HT22）进行培养和处理，运用蛋白质免疫印迹（Western blotting）、免疫共沉淀（Co - IP）检测相关蛋白表达和相互作用，使用酶联免疫吸附测定（ELISA）测定细胞因子水平，还通过免疫荧光技术观察蛋白的细胞定位。

下面来看看具体的研究结果：

1. HDAC6 抑制剂 ACY-1215 改善神经性疼痛：研究人员给 SNI 手术小鼠连续 14 天腹腔注射 HDAC6 抑制剂 ACY-1215（20mg/kg/ 天），发现从第 7 天开始，小鼠的疼痛得到缓解，到第 13 天效果相对稳定。这表明 ACY-1215 能有效改善 SNI 诱导的疼痛。

2. ACY-1215 对 STAT3 修饰的影响：在雄性小鼠的 L4 - L6 腰椎脊髓中，SNI 手术使 p-STAT3 水平升高，Ac-STAT3 水平未变。而 ACY-1215 处理后，p-STAT3 表达降低，Ac-STAT3 增加，且不改变总 STAT3（t-STAT3）水平。这说明 ACY-1215 可调节脊髓 STAT3 的翻译后修饰，抑制其磷酸化，提高乙酰化水平。

3. HDAC6 和 p-STAT3 的细胞定位：通过对脊髓进行双免疫染色发现，HDAC6 和 p-STAT3 主要在脊髓背角神经元中表达，在星形胶质细胞和小胶质细胞中也有少量表达。并且，它们与非肽能和肽能伤害感受神经元标记物共定位，这表明它们参与了疼痛相关的神经通路。

4. 神经病理性疼痛对 STAT3 核转位的影响：研究发现，SNI 手术使细胞核内 p-STAT3 水平升高，而胞质 p-STAT3 和 Ac-STAT3 水平未显著变化。这意味着神经病理性疼痛会促进 p-STAT3 向细胞核转位，且乙酰化的 STAT3 可能会阻止其进入细胞核。

5. HDAC6 与 STAT3 的相互作用：利用 Co-IP 技术，研究人员发现 SNI 手术增强了 HDAC6 与 STAT3 的相互作用，而 ACY-1215 则逆转了这种增强作用。这说明 ACY-1215 可调节 HDAC6 与 STAT3 的相互作用。

6. 神经元 STAT3 过表达的影响：给小鼠鞘内注射 AAV-hsynSTAT3，使其神经元 STAT3 过表达，结果小鼠出现疼痛超敏反应，同时 TNF-α 和 IL-1β 合成增加。而 ACY-1215 能缓解这些症状，这表明神经元 STAT3 过表达会引发疼痛和炎症反应，ACY-1215 可抑制这种反应。

7. ACY-1215 对趋化因子的影响：通过比较不同组小鼠脊髓组织中 27 种细胞因子和趋化因子的水平，研究人员发现 ACY-1215 可逆转 SNI 诱导的趋化因子 CCL7 和 CXCL13 的升高，其中 CCL7 的变化最为显著。这表明 CCL7 可能是 HDAC6/STAT3 信号轴的关键下游效应因子。

8. HDAC6 和 STAT3 敲低的影响：在 HT22 细胞中敲低 HDAC6，CCL7 和 p-STAT3 水平下降，Ac-STAT3 水平上升；敲低 STAT3，CCL7 产生减少，但不影响 HDAC6 表达。这进一步证实了 HDAC6 是 STAT3 激活的上游刺激因子，HDAC6/STAT3 轴在 CCL7 合成中起关键作用。

9. ACY-1215 对脊髓相关因子产生的影响：研究人员通过免疫印迹和 ELISA 检测发现，ACY-1215 可抑制 SNI 手术后脊髓中 CCL7、TNF-α 和 IL-1β 的产生，再次证明其对 STAT3 激活和下游 CCL7 产生的抑制作用。

研究结论和讨论部分指出，本研究表明 HDAC6 抑制剂 ACY-1215 可通过调节 STAT3 的翻译后修饰，减少其促炎信号，抑制 CCL7 产生，从而缓解神经性疼痛。这揭示了 HDAC6/STAT3/CCL7 信号轴在神经性疼痛中的重要作用，为治疗神经性疼痛提供了新的潜在靶点。不过，该研究也存在一定局限性，如仅在 SNI 模型中进行研究，未来需要在更多疼痛模型中验证这些发现。同时，还需进一步探索 HDAC6 的其他抗伤害感受途径，以及长期抑制 HDAC6 对神经系统的影响。但无论如何，这项研究为神经性疼痛的治疗带来了新的希望，为后续研究奠定了坚实基础。