综述：C4d 免疫组化助力大疱性类天疱疮诊断：突破传统局限的新曙光

为解决大疱性类天疱疮（BP）诊断难题，研究人员对比 C4d 免疫组化（IHC）与直接免疫荧光（DIF），发现 C4d IHC 是有价值的诊断工具。

　　在皮肤疾病的神秘世界里，大疱性类天疱疮（Bullous pemphigoid，BP）是一种常见的自身免疫性表皮下大疱病，主要 “攻击” 老年人的皮肤和黏膜。它常常以多个紧张性水疱的形式出现，还伴有混合性浅表炎症，一开始可能只是瘙痒的荨麻疹样斑块，随后逐渐发展成水疱、大疱，甚至出现结痂糜烂。准确诊断 BP 对于患者的治疗和康复至关重要，但目前的诊断方法却存在不少问题。

传统诊断 BP 的金标准是直接免疫荧光（Direct Immunofluorescence，DIF）技术，它通过检测皮损周围皮肤中免疫球蛋白 G（IgG）和 / 或 C3 在真皮 - 表皮交界处的线性沉积来诊断疾病。虽然 DIF 的敏感性高达 82 - 90.5%，特异性为 98%，但它对样本要求苛刻，需要新鲜的皮肤样本，最好是冷冻样本或保存在 Michel’s 培养基中的样本。然而，实际临床工作中，病理学家常常收到的是已经用福尔马林固定的样本，这要么是因为转诊医生没有怀疑 BP（临床表现不典型），要么是因为冷冻样本或合适培养基保存的样本在处理和运输上存在困难。此外，DIF 检测还需要专业的实验室设备和经验丰富的病理学家，检测费用高昂，这使得并非所有患者都能享受到这项检测。

为了突破这些困境，来自巴西的研究人员，包括 Larissa D.’Epiro de Souza Campos 等人，开展了一项关于 BP 诊断的研究。他们的研究成果发表在《Surgical and Experimental Pathology》杂志上。

研究人员采用了两种关键技术方法。一是收集样本，他们从 2018 年 1 月至 2023 年 5 月期间积累的 44 例患者病例中，选取了 17 例同时具备石蜡包埋活检样本和 DIF 报告的病例进行研究，这些病例在临床怀疑和 / 或组织学评估时都将 BP 列为鉴别诊断之一。二是进行检测，对这些样本进行苏木精 - 伊红（Hematoxylin and Eosin，HE）染色和 DIF 染色，进行组织病理学分析；同时，对石蜡固定的样本进行 C4d 免疫组化（Immunohistochemistry，IHC）检测，以观察 C4d 的表达情况。

研究结果如下：

1. 患者基本情况：17 例患者的平均年龄为 58 ± 16.1 岁，其中男性 8 例（47%），女性 9 例（53%）。皮损部位分布在下肢（6 例；35.3%）、躯干（6 例；35.3%）、上肢（4 例；23.5%）和未明确的肢体部位（1 例；5.9%）。
2. 疾病诊断情况：经组织病理学分析，7 例被诊断为 BP，10 例被诊断为其他大疱性疾病或类似大疱性疾病的皮炎，包括药疹（4 例）、接触性皮炎（1 例）、疱疹样皮炎（3 例）和非特异性大疱性疾病（2 例）。
3. DIF 检测结果：在 DIF 分析中，4 例 BP 患者的 IgG 和 C3 呈阳性，1 例仅 C3 阳性，2 例 IgG 和 C3 均为阴性。而其他大疱性疾病或类似大疱性疾病的患者，IgG 和 C3 均为阴性。
4. C4d IHC 检测结果：C4d IHC 检测中，7 例呈阳性，其中 6 例被诊断为 BP，1 例为未明确的表皮下大疱病；10 例阴性结果中，9 例为其他大疱性疾病或类似大疱性疾病，1 例为 BP。进一步分析发现，在 7 例通过 C4d IHC 诊断为 BP 的病例中，4 例在 DIF 检测中 IgG 和 / 或 C3 呈阳性，2 例仅在 IHC 中呈阳性，1 例仅在 DIF 检测中 IgG 和 C3 呈阳性。在其余 10 例被诊断为其他疾病的病例中，除 1 例仅在 IHC 中呈阳性外，其余样本在 DIF 检测中 IgG 和 C3 以及在 IHC 检测中 C4d 均为阴性。

研究结论和讨论部分指出，虽然之前的研究对于 C4d IHC 在 BP 诊断中的价值存在不同观点，但总体来看，C4d IHC 是一种有价值的诊断工具。尤其是在临床怀疑和组织学强烈提示 BP，但 DIF 检测结果为阴性的情况下，C4d IHC 能够发挥重要作用。它避免了 DIF 需要冷冻样本的缺点，可在石蜡固定的组织样本上进行检测，并且能与组织学检查同时进行，为临床诊断提供了更多便利。不过，该研究也存在一些局限性，如缺乏 BP 患者血清抗原数据、可能存在技术解读困难、样本量有限且 DIF 和 IHC 分析样本有差异等。

尽管如此，这项研究仍然为 BP 的诊断开辟了新的思路，C4d IHC 有望成为传统 DIF 检测的有力补充，为更多患者带来准确诊断的希望，推动 BP 诊断领域的进一步发展。