PRMT5 高表达与结直肠癌间质中 NK 细胞耗竭的关联及免疫微环境新发现

为探究结直肠癌（CRC）微环境中自然杀伤细胞（NK 细胞）表型变化与免疫检查点关系，研究人员开展相关研究，发现 CRC 微环境呈免疫抑制状态，PRMT5 等可能是关键因素，为 CRC 治疗提供新思路。

　　在人体的免疫系统中，自然杀伤细胞（Natural Killer Cells，NK 细胞）犹如一群时刻巡逻的 “卫士”，守护着身体免受肿瘤细胞的侵害。然而，当面对狡猾的结直肠癌（Colorectal Cancer，CRC）时，这些 “卫士” 却似乎陷入了困境。据统计，2020 年中国有 56 万新增 CRC 病例，29 万人因之死亡，许多患者初诊时已出现远处转移，晚期 CRC 预后差，5 年生存率低。

研究表明，T 淋巴细胞、B 淋巴细胞、巨噬细胞、树突状细胞和 NK 细胞在 CRC 的肿瘤微环境（Tumor Microenvironment，TME）中都发挥着重要作用，其中 NK 细胞作为固有免疫系统的重要组成部分，具备细胞毒性和免疫调节的双重功能，在抗肿瘤免疫反应中至关重要。但在 CRC 的微环境中，NK 细胞却出现了数量减少和功能受损的情况，导致肿瘤细胞有了可乘之机。目前，NK 细胞在 CRC 微环境中的具体变化机制尚不明确，这也成为了攻克 CRC 的一大阻碍。

为了深入了解这一复杂的机制，来自延安大学西安大兴医院、西北大学医学院等机构的研究人员展开了一项研究，相关成果发表在《Cancer Immunology, Immunotherapy》杂志上。

研究人员为了探究 CRC 微环境中 NK 细胞表型变化与重要免疫检查点表达之间的关系，评估结直肠癌间质中 CD16^brightCD56^negative（CD16⁺CD56^- ）NK 细胞相关免疫检查点的表达水平，开展了一系列实验。研究人员从西安大兴医院病理科 2020 年 1 月至 2022 年 1 月诊断为 CRC 的患者中筛选出 194 例，收集其手术切除的原发性肿瘤样本。

研究中用到的主要关键技术方法包括：一是免疫组化（IHC）及相关分析，对石蜡包埋标本切片进行染色，检测多种抗体标记物；二是多重免疫组化（mIHC），对部分患者组织样本用多种抗体进行染色；三是单细胞测序，从新鲜血液中分离单个细胞悬液进行测序分析。

研究结果如下：

• 免疫组化检测结果：与正常间质相比，CRC 间质中 NK 细胞数量更少，CD16⁺CD56^- NK 细胞百分比显著升高，CD16⁺NK 细胞数量增多，CD56⁺NK 细胞数量减少。PRMT5、SIGIRR、CD16 在 CRC 间质中表达上调，而 IFN-γ、CD69、TIGIT 表达下降。且 PRMT5 在靠近肿瘤区域表达更高，在正常组织中表达更分散12。
• 单细胞测序分析结果：对 6 个样本（3 名患者的肿瘤和正常组织）进行单细胞测序，结果显示 T 淋巴细胞和 B 淋巴细胞比例显著下降，NK 细胞标记物水平在肠癌组织中明显低于相邻组织。同时，CD56 在 NK 细胞上的表达显著降低，而 CD16、PRMT5、SIGIRR 和 TIGIT 在 NK 细胞上的表达显著增加3。
• 随访结果：对 180 例患者进行随访，发现肿瘤微环境中 PRMT5 高表达的 CRC 患者无病生存期（DFS）更差。CD16^highPRMT5^high表达的患者 DFS 明显短于 CD16^lowPRMT5^low表达的患者45。

研究结论和讨论部分指出，CRC 的微环境处于免疫抑制状态，其特征为 TIGIT、CD16、PRMT5 和 SIGIRR 高表达，IFN-γ 和 CD69 低表达，CD16^-CD56⁺NK 细胞数量显著减少，而具有较弱杀伤能力的 CD16⁺CD56^-NK 细胞数量显著增加。PRMT5 和 TIGIT 可能与杀伤能力减弱的 CD16⁺CD56^-NK 细胞的形成密切相关。此外，高 SIGIRR 和 PRMT5 表达可能是影响 CD16⁺CD56^-NK 细胞表型转化的重要因素。

这项研究首次提出 NK 细胞表型变化会影响 CRC，为深入理解 CRC 的免疫逃逸机制提供了新的视角，揭示了 PRMT5 和 SIGIRR 在 CRC 微环境中的重要作用，为开发针对 CRC 的免疫治疗策略提供了潜在的靶点和理论依据，有望为 CRC 患者带来新的治疗希望 。