HNRNPC 调控 TFAP2A 促进非小细胞肺癌进展的关键机制研究

为探究 HNRNPC 在 NSCLC 中的作用机制，研究人员开展相关研究，发现其调控 TFAP2A 促进肿瘤进展，意义重大。

　　肺癌是全球癌症相关死亡的主要原因，其中非小细胞肺癌（NSCLC）占比约 80 - 85%。对于发生转移的 NSCLC 患者，治疗效果和预后都很差。因此，深入了解 NSCLC 转移机制并找到相关分子靶点，对为晚期患者提供治疗方案至关重要。

RNA 化学修饰在生物过程中发挥着重要作用，N⁶- 甲基化（m⁶A）是真核生物 mRNA 中最丰富的内部修饰。RNA 结合蛋白（RBPs）对 RNA 的代谢起关键调节作用，而异质核核糖核蛋白 C（HNRNPC）属于 RBPs 家族，也是 m⁶A “阅读器”。已有研究表明 HNRNPC 在多种肿瘤中高表达，但它在 NSCLC 中的具体功能和分子机制尚未完全明确。同时，上皮间质转化（EMT）参与 NSCLC 转移，HNRNPC 是否通过 m⁶A 调节 EMT 进而促进 NSCLC 进展也有待研究。

基于这些问题，贵州医科大学附属医院和贵州医科大学临床医学院等机构的研究人员开展了研究。研究成果发表在《Cancer Cell International》上，为 NSCLC 的治疗提供了新的思路和潜在靶点。

研究人员为开展此项研究，用到了多种关键技术方法。通过 UALCAN、TIMER2 和 GEPIA 等数据库获取数据并进行分析；利用 RNA 免疫沉淀（RIP）-PCR、甲基化 RNA 免疫沉淀（MeRIP）等技术探究 HNRNPC 与靶基因的关系；构建细胞模型，运用定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）、蛋白质免疫印迹（Western blot）等方法检测基因和蛋白表达水平；还通过细胞增殖、迁移和侵袭实验等评估细胞生物学功能。此外，收集了 109 例肺腺癌（LUAD）组织样本（56 例癌组织和 53 例癌旁组织）进行免疫组化分析。

研究结果如下：

• HNRNPC 在 NSCLC 中的表达与预后的关系：通过分析多个数据库发现，HNRNPC 在包括 NSCLC 在内的多种肿瘤组织中 mRNA 和蛋白高表达。生存分析表明，高表达 HNRNPC 与 LUAD 患者预后不良相关，这提示 HNRNPC 在 NSCLC 的发展中可能起重要作用。
• HNRNPC 对 NSCLC 细胞功能的影响：研究人员构建 HNRNPC 敲低的 A549 和 H1299 细胞模型，实验结果显示，敲低 HNRNPC 后，NSCLC 细胞的增殖、迁移和侵袭能力均受到抑制，说明 HNRNPC 对维持 NSCLC 细胞的恶性行为具有重要作用。
• HNRNPC 的靶基因筛选与验证：经 RIP-seq 等实验筛选出 HNRNPC 的靶基因 TFAP2A（转录因子激活增强子结合蛋白 2α）。多种数据库分析表明 TFAP2A 在 NSCLC 中高表达且与预后不良相关，RIP-PCR 实验证实 HNRNPC 能直接结合 TFAP2A 转录本。免疫组化也显示 NSCLC 组织中 TFAP2A 表达显著高于癌旁组织。
• HNRNPC 对 TFAP2A 的调控机制：实验发现，敲低 HNRNPC 显著抑制 TFAP2A 的 mRNA 和蛋白表达水平，而过表达 TFAP2A 不影响 HNRNPC 表达。MeRIP-qPCR 检测发现敲低 HNRNPC 后 TFAP2A mRNA 的 m⁶A 甲基化水平显著降低，且 TFAP2A mRNA 的降解速率加快。这表明 HNRNPC 通过识别 TFAP2A mRNA 的 m⁶A 修饰并维持其稳定性来调控 TFAP2A 表达。
• TFAP2A 对 NSCLC 细胞功能的影响及与 HNRNPC 的关系：在敲低 HNRNPC 的细胞中过表达 TFAP2A，CCK-8、克隆形成、Transwell 等实验结果显示，TFAP2A 过表达能部分恢复因 HNRNPC 敲低而降低的 NSCLC 细胞增殖、迁移和侵袭能力，说明 HNRNPC 可能通过调控 TFAP2A 促进 NSCLC 进展。
• HNRNPC/TFAP2A 对 EMT 的调控：GO 和 GSEA 富集分析提示 HNRNPC 和 TFAP2A 与 EMT 相关。实验检测 EMT 标记物发现，敲低 HNRNPC 后，N - Cadherin 和 Vimentin 蛋白表达下降，E - Cadherin 蛋白表达上升，而过表达 TFAP2A 可逆转这些变化，表明 HNRNPC/TFAP2A 通过调节 EMT 相关基因表达促进 NSCLC 的 EMT 进程。
• HNRNPC/TFAP2A 调控 EMT 的潜在机制：研究发现 β - catenin 是 WNT 信号通路的关键分子，预测及分析显示 TFAP2A 可结合 β - catenin 启动子区域，二者表达呈正相关。敲低 HNRNPC 导致 β - catenin 的 mRNA 和蛋白表达下降，过表达 TFAP2A 可使其回升，说明 HNRNPC/TFAP2A 可能通过调节 β - catenin 表达促进 NSCLC 的 EMT 过程和肿瘤进展。

研究结论和讨论部分指出，该研究揭示了新的 HNRNPC/TFAP2A/CTNNB1 信号轴，其通过增强蛋白表达和促进 EMT 发展，推动肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。这一发现不仅从新的角度拓展了人们对 m⁶A 介导的肿瘤进展机制的认识，还阐明了该信号轴在 NSCLC 的 EMT 过程中的调控机制。然而，研究存在一定局限性，如仅使用了两种 NSCLC 细胞系，限制了研究结果的临床相关性，且对 HNRNPC、TFAP2A 和 CTNNB1 之间的相关性研究不够深入，缺乏体内实验验证。未来研究需进一步克服这些不足，深入探究它们在肿瘤发生和发展中的相互作用，为 NSCLC 的治疗提供更坚实的理论基础和潜在治疗靶点。