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研究人员用斑马鱼模型评估鲹鱼胶原蛋白毒性,证实其无毒、无致畸性,可用于生物医学。
在生物医学的奇妙世界里,胶原蛋白就像一位默默奉献的 “幕后英雄”,广泛存在于动物王国,支撑着身体的各种生理过程和发育途径。它在食品、医药、化妆品等领域的应用越来越广泛,口服胶原蛋白补充剂能改善皮肤状况、增强骨骼健康,让人们越来越重视它的价值。然而,就像任何事物都有两面性一样,胶原蛋白也存在一些让人担忧的地方。虽然它通常被认为是安全的,但人们担心它可能会引发炎症,不同人群对它的反应也存在差异。特别是在孕期,异常的胶原蛋白表达可能与一些病理状况有关。而且,随着对海洋胶原蛋白的研究逐渐增多,人们越发意识到对其进行全面安全性评估的重要性,尤其是在发育毒性方面,这还是一片亟待探索的 “未知领域”。
为了填补这一研究空白,来自斯里兰卡大学(University of Sri Jayewardenepura)的研究人员 Nipuna Deelaka Wimalagunarathna 和 Varuni Karunika Gunathilake 开展了一项意义重大的研究。他们以斑马鱼(Danio rerio)为模型,评估从鲹鱼(Decapterus macarellus)中提取的胶原蛋白的急性毒性、发育毒性、心脏毒性和致畸毒性,研究成果发表在《Beni-Suef University Journal of Basic and Applied Sciences》杂志上。
在这项研究中,研究人员采用了多种关键技术方法。首先,他们按照严格的标准,从鲹鱼中提取酸溶性胶原蛋白(ASC),并配置了不同浓度的胶原蛋白溶液。接着,他们精心挑选健康的野生型斑马鱼进行繁殖,获取胚胎用于实验。在实验过程中,他们将斑马鱼胚胎暴露在不同浓度的胶原蛋白溶液中,同时设置正、负对照组。通过显微镜,在特定时间点对胚胎的多个发育参数进行细致观察和记录,最后运用统计学方法对实验数据进行严谨分析。
研究结果如下:
对斑马鱼胚胎存活率的影响 :在整个实验过程中,各浓度胶原蛋白处理组的斑马鱼胚胎存活率在 96hpf 时为 96.97 ± 5.25% - 82.28 ± 9.80% ,与阴性对照组相比,没有显著差异(P > 0.05 )。而且在不同时间点,各实验组与阴性对照组的存活率也没有统计学差异,这表明鲹鱼胶原蛋白对斑马鱼胚胎没有毒性。
对斑马鱼胚胎孵化率的影响 :斑马鱼胚胎在 24hpf 开始孵化,48hpf 时,62.5ppm 组孵化率最高,1000ppm 组最低,呈现出一定的剂量依赖性趋势。不过,经过统计分析,各实验组在 48hpf 的孵化率与阴性对照组相比,没有显著差异(P = 0.177 ),并且所有胚胎在 72hpf 时都已完全孵化,这进一步说明胶原蛋白对胚胎孵化没有明显影响。
对斑马鱼胚胎心率的影响 :在不同时间间隔,各浓度组胚胎心率都保持在 120 - 180 次 / 分钟的正常范围内。虽然在 48hpf 时,处理组心率相比未处理组有所增加(span data-custom-copy-text="\(P0.05\)"P < 0.05 ),但在 24、72、96hpf 时,与未处理组相比无显著差异,这也体现了提取的胶原蛋白的非毒性。
对斑马鱼胚胎发育的影响 :在 4 - 96hpf 期间,观察 62.5 - 1000ppm 的胶原蛋白对斑马鱼胚胎的影响,未发现明显的致畸效应,所有处理组胚胎发育都与阴性对照组相似,这表明胶原蛋白对斑马鱼胚胎的发育没有不良影响。
综合研究结果和讨论,该研究证实了从鲹鱼中提取的胶原蛋白在斑马鱼胚胎发育过程中无毒且无致畸性。这一结论意义重大,它为胶原蛋白作为生物相容性材料的应用提供了有力支持,特别是在与活体组织密切接触的生物医学和组织工程领域,如伤口愈合、药物递送系统和再生医学等。不过,研究人员也指出,虽然这项研究取得了重要成果,但仍需要进一步研究胶原蛋白在不同生理功能和靶向器官中的作用,探索其具体的生物活性机制和长期安全性,为其更广泛的应用奠定坚实基础。
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