Treg 来源的双调蛋白对狼疮性肾炎的保护作用：机制新探与治疗新希望

为探究 AREG 在狼疮性肾炎（LN）中的细胞特异性作用，研究人员用基因敲除小鼠模型研究，发现 Treg 来源的 AREG 可保护肾脏，为 LN 治疗提供新方向。

　　狼疮性肾炎（Lupus Nephritis，LN）是系统性红斑狼疮（Systemic Lupus Erythematosus，SLE）最严重的并发症之一，就像隐藏在患者身体里的 “定时炸弹”，严重威胁着患者的健康。SLE 作为一种常见的自身免疫性疾病，会累及多个器官系统，而 LN 的出现更是让患者的病情雪上加霜，它导致的高发病率和死亡率，尤其是在年轻患者群体中，令人担忧。目前，尽管 LN 的患病率较高，但它的发病原因和机制却如同迷雾一般，让医学界难以完全看透。现有的治疗方法不仅缺乏针对性，还会带来各种副作用，常常无法有效缓解疾病，致使许多患者年纪轻轻就发展到了终末期肾病，生活质量严重下降。因此，寻找全新的、更有效的治疗方法迫在眉睫。

在这样的背景下，来自德国汉堡大学医学中心（University Medical Center Hamburg-Eppendorf）等机构的研究人员开启了探索之旅。他们将目光聚焦于双调蛋白（Amphiregulin，AREG），一种与表皮生长因子受体（Epidermal Growth Factor Receptor，EGFR）结合的多功能细胞因子。此前研究已发现 AREG 在 SLE 发病机制中扮演着重要角色，且在 SLE 患者外周血白细胞中显著上调，但其在 LN 中的具体作用，尤其是不同细胞来源的 AREG 的功能差异，仍不明确。为此，研究人员开展了深入研究，相关成果发表在《Scientific Reports》上。

研究人员主要运用了基因敲除小鼠模型、细胞分选、流式细胞术、免疫组化等关键技术方法。通过构建特定基因敲除小鼠，如 Foxp3^cre×AREG^fl/fl小鼠（用于敲除 Tregs 中的 AREG）和 LysM^cre×AREG^fl/fl小鼠（用于敲除髓系细胞中的 AREG），来研究不同细胞来源的 AREG 缺失对 LN 的影响。利用细胞分选技术获取特定细胞群体，借助流式细胞术分析细胞表型和细胞因子分泌情况，通过免疫组化观察肾脏组织的病理变化。

研究结果如下：

1. Tregs 来源的 AREG 对肾脏结局的影响：研究人员利用基因敲除小鼠模型，发现缺乏 Tregs 来源 AREG 的小鼠在 12 个月和 15 个月时，LN 病情明显恶化，异常肾小球数量和肾小球面积显著增加，15 个月时肾间质损伤也更为严重。这表明 Tregs 来源的 AREG 在减轻肾脏组织学损伤方面具有持久的保护作用，且这种保护作用依赖于 LN 的慢性炎症环境。
2. Tregs 来源的 AREG 对肾纤维化的影响：研究发现，Tregs 来源 AREG 的缺失会导致肾纤维化显著增加，且这种增加在 12 个月和 15 个月时均持续存在。而年龄匹配的未患病小鼠中，Tregs 缺乏 AREG 并不会导致纤维化增加，这进一步说明 Tregs 来源的 AREG 在改善 LN 肾纤维化方面具有重要作用。
3. Tregs 来源的 AREG 对细胞免疫反应的影响：研究人员假设 Tregs 来源 AREG 缺失导致的肾纤维化增加可能与免疫反应增强有关，但实验结果却显示，缺乏 Tregs 来源 AREG 的小鼠，其肾脏和脾脏中的效应 T 细胞（Teff）的促炎细胞因子表达并未增加，甚至在 12 个月时肾脏 Teff 的 IFNγ 分泌略有降低，且巨噬细胞的 M1/M2 极化也未受明显影响。这表明 Tregs 来源的 AREG 对 CD4⁺ Teff 或巨噬细胞的激活和细胞因子分泌没有显著影响，其对 LN 的保护作用可能通过其他机制实现。
4. Tregs 来源的 AREG 对体液免疫反应的影响：研究人员对 SLE 特征性的体液免疫反应进行检测，发现缺乏 Tregs 来源 AREG 的小鼠在 12 个月时，血清总 IgG 水平、抗双链 DNA（dsDNA）抗体和抗 U1 - 核糖核蛋白（snRNP）抗体水平均未受明显影响，肾小球 C3 和 IgG 沉积也无变化。这表明 Tregs 来源的 AREG 不太可能通过免疫调节介导其在 LN 中的保护作用。
5. 巨噬细胞（M/M）来源的 AREG 对 LN 的影响：为探究 M/M 来源的 AREG 在 LN 中的作用，研究人员构建了 LysM^cre×AREG^fl/fl小鼠。结果显示，与对照组相比，缺乏 M/M 来源 AREG 的小鼠在 12 个月时，肾脏损伤和纤维化没有明显差异，Teff 细胞因子分泌也无显著变化。不过，研究发现缺乏 M/M 来源 AREG 的小鼠肾巨噬细胞向 M2 极化略有增加。这表明在 LN 中，AREG 的组织保护作用主要由 Tregs 来源的 AREG 介导，而 M/M 来源的 AREG 对 LN 的纤维化和整体肾脏结局没有明显影响。
6. Tregs 来源的 AREG 对肾脏细胞凋亡和修复的影响：LN 会增加肾脏固有细胞的凋亡，研究人员发现，缺乏 Tregs 来源 AREG 的小鼠，其肾小球和肾间质中凋亡细胞数量明显增加，且肾小管上皮细胞增殖标记物 Ki67 的表达显著降低，这表明 Tregs 来源的 AREG 可保护肾脏细胞免受凋亡，并促进肾小管修复。
7. 重组 AREG 对细胞修复和血管生成的影响：通过体外划痕实验和管形成实验，研究人员发现重组 AREG 可显著改善小鼠系膜细胞、肾小管细胞和人肾小球内皮细胞的伤口愈合能力，并促进人肾小球内皮细胞的血管生成，这表明 AREG 对组织修复和血管生成具有直接影响。

综合研究结果和讨论部分，这项研究意义重大。它首次明确了在 LN 中，Tregs 来源的 AREG 而非 M/M 来源的 AREG 发挥着关键的肾脏保护作用。Tregs 来源的 AREG 通过保护肾脏细胞免受凋亡、促进肾脏组织再生和血管修复，有效预防了有害的纤维化，且不影响 SLE 特征性的免疫反应。这一发现不仅进一步揭示了 LN 的发病机制，还为 LN 的治疗提供了新的潜在靶点和方向，为开发更有效的治疗方法带来了希望。未来，基于 Tregs 和 AREG/EGFR 轴的治疗策略有望成为改善 LN 患者预后的新途径，为众多 LN 患者带来新的曙光。