双价疫苗 LptD + LtgC：对抗淋病奈瑟菌的新希望

为应对淋病奈瑟菌耐药问题，研究人员评估 LptD + LtgC 双价疫苗，其免疫原性强，有望成候选疫苗。

　　淋病，这个在全球范围内肆意传播的 “健康杀手”，正变得越来越难以对付。淋病奈瑟菌（Neisseria gonorrhoeae）作为引发淋病的病原体，随着抗菌药物耐药性（AMR）的不断增强，给全球健康带来了巨大威胁。曾经有效的抗生素，如今面对耐药的淋病奈瑟菌常常束手无策，尤其是多重耐药（MDR）菌株的出现，更是让传统治疗手段捉襟见肘，“超级淋病” 的名号绝非危言耸听。在这种困境下，开发一种有效的疫苗成为了对抗淋病的迫切需求。

来自伊朗德黑兰医科大学和巴斯德研究所的研究人员，为了攻克这一难题，开展了一项针对淋病奈瑟菌的双价疫苗研究。他们将目光聚焦在脂多糖转运蛋白 D（Lipopolysaccharide transport protein D，LptD）和溶菌转糖基酶 C（Lytic transglycosylase C，LtgC）这两种具有潜力的免疫原性靶点上，致力于开发一种能有效预防淋病的双价疫苗。该研究成果发表在《Journal of Translational Medicine》杂志上。

在研究中，研究人员采用了多种关键技术方法。首先是基因工程技术，从淋病奈瑟菌 ATCC 19424 中扩增 ltgC 和 lptD 基因，并将其克隆到 pET - 28a (+) 载体中，在大肠杆菌 BL21 (DE3) 中表达，再利用 Ni - NTA 亲和层析法纯化重组蛋白。其次，运用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测患者血清中抗原特异性总 IgG 水平，评估疫苗的免疫原性。此外，还制备了脂质体单磷酰脂质 A（MPLA）佐剂，将疫苗配制成不同组合，免疫 BALB/c 小鼠，通过多种检测方法评估免疫效果 。

研究结果如下：

1. 重组蛋白的表达与纯化：通过 SDS - PAGE 和 Western blotting 验证，成功表达并纯化出 LtgC（48kDa）和 LptD（85kDa）重组蛋白，且蛋白溶液中内毒素（LPS）水平极低（<0.1 EU/mL）。
2. 患者血清对疫苗候选蛋白的识别：ELISA 检测发现，淋病患者血清中针对 LptD 和 LtgC 的特异性抗体水平显著高于健康个体，表明这两种蛋白在自然感染过程中能诱导抗体产生，具有成为疫苗候选蛋白的潜力。
3. 体液免疫反应：所有疫苗配方均能诱导小鼠产生较高水平的总 IgG。其中，LptD + 脂质体 MPLA 组的特异性 IgG 水平最高；双价配方（LtgC + LptD + MPLA）在第 112 天的长期 IgG 水平最高，且在全细胞 ELISA 中产生最强的总 IgG 反应。所有疫苗方案的 IgG2a/IgG1 比值均大于 1，表明诱导的是 Th1 极化反应。
4. 血清 IgA 水平：LptD + 脂质体 MPLA 组在第 42 天的血清 IgA 水平最高，LtgC + LptD + MPLA 组也能诱导较高的 IgA 水平。在阴道灌洗液中，只有 LptD + 脂质体 MPLA 组的 IgA 水平高于对照组，其他组黏膜免疫反应较弱。
5. 血清杀菌和调理吞噬活性：所有配方均能诱导血清杀菌和调理吞噬活性，且呈浓度依赖性。LptD + 脂质体 MPLA 组和 LptD + MPLA 组的 SBA 和 OPA 滴度较高；双价配方（LtgC + LptD + MPLA）在 SBA 和 OPA 试验中表现最佳，滴度分别达到 1/256 和 1/512 。

综合研究结论和讨论部分，该研究成功开发并评估了一种针对淋病奈瑟菌的重组双价疫苗 LptD + LtgC。与单一抗原配方相比，该双价疫苗表现出更强的免疫原性，能诱导更高的抗体水平、血清杀菌活性和调理吞噬反应。使用 MPLA 作为佐剂诱导的 Th1 优势免疫反应，进一步凸显了其对淋病预防的重要性。尽管在实现足够的黏膜免疫方面仍面临挑战，但该多抗原策略的研究结果为未来淋病疫苗的研发奠定了坚实基础。未来，研究人员将重点开展体内动物保护实验，进一步验证疫苗的有效性，有望为全球抗击淋病带来新的突破，减轻淋病的全球健康负担，改善公众健康状况。