超级增强子劫持 RBBP7 通过招募 LSD1 促进乳腺癌转移和干性：潜在治疗新靶点

为探究 RBBP7 对乳腺癌（BCa）干性和转移的影响，研究发现 SE-RBBP7-LSD1 轴或为 BCa 治疗新靶点。

　　在全球范围内，乳腺癌（Breast Cancer，BCa）是严重威胁女性健康的 “头号杀手” 。它就像一个隐藏在暗处的恶魔，在女性群体中肆意肆虐，占据了所有女性恶性肿瘤的 30%，每年因它而失去生命的女性，接近女性癌症相关死亡人数的 15%。预计在 2024 年，新诊断出的乳腺癌病例和死亡人数，分别高达 313,510 和 42,790。目前，乳腺癌主要分为 Luminal A/B、HER2 阳性和三阴性乳腺癌（TNBC）这四种亚型。但由于其具有高度异质性，不同亚型的患者对治疗的反应差异很大，有的疗效显著，有的却效果不佳。

更棘手的是，内在和获得性耐药问题严重削弱了现有治疗手段的效果，手术、放疗、化疗、靶向治疗、激素治疗和免疫治疗等方法，都难以彻底消灭癌细胞，许多晚期乳腺癌患者最终还是会遭受远处转移的折磨。所以，深入了解乳腺癌背后的分子机制，寻找新的治疗靶点和预测生物标志物，成为了医学领域亟待攻克的难题。

在此背景下，陆军军医大学西南医院等机构的研究人员展开了研究，相关成果发表在《Journal of Translational Medicine》上。该研究发现了 SE-RBBP7-LSD1 轴在乳腺癌发展中的关键作用，为乳腺癌治疗提供了新的潜在靶点，有望打破现有治疗困境，为患者带来新希望。

研究人员为了开展此项研究，运用了多种关键技术方法。通过生物信息学分析，挖掘大量数据，评估 RBBP7 在乳腺癌中的临床意义。采用 CCK8、集落形成、Transwell 等实验，从多个角度探究 RBBP7 的致癌功能。利用染色质免疫沉淀 - 定量聚合酶链反应（ChIP-qPCR）和双荧光素酶报告实验，深入研究其表观遗传机制。构建肿瘤球形成实验和尾静脉注射模型，分别评估癌细胞的自我更新能力和体内转移效率。还借助患者来源的类器官（PDOs）和患者来源的异种移植（PDX）模型，验证相关药物在抑制乳腺癌方面的临床意义。同时，使用 CRISPR/Cas9 技术对特定基因区域进行编辑，为研究基因功能提供了有力工具。

研究结果具体如下：

• RBBP7 在 BCa 中过表达且与不良临床结局相关：研究人员通过分析多个数据库的数据，包括 TCGA 和 GEO 数据库，发现 RBBP7 在乳腺癌组织中表达上调。在 30 对乳腺癌和相邻正常组织样本中，也检测到 RBBP7 的 mRNA 表达增加。对 8 例患者的样本检测以及 30 例患者的免疫组织化学（IHC）分析，都进一步证实了这一点。而且，高表达 RBBP7 的患者，无复发生存期（RFS）和总生存期（OS）更短，表明它可能是一个重要的生物标志物。
• RBBP7 增强 BCa 肿瘤发生和转移能力：研究人员筛选出 RBBP7 高表达和低表达的乳腺癌细胞系，构建稳定过表达和敲低 RBBP7 的细胞模型。体外实验中，MTT、集落形成和 EdU 实验表明，RBBP7 过表达促进癌细胞增殖，敲低则抑制增殖。Transwell 和划痕实验发现，RBBP7 能增强癌细胞的迁移和侵袭能力。体内实验中，肿瘤异种移植和尾静脉注射模型显示，RBBP7 过表达促进肿瘤生长和肺转移，敲低则抑制这些过程123。
• RBBP7 是 BCa 中由超级增强子驱动的癌基因：通过查询数据库和分析 H3K27ac 峰值，研究人员发现了一个在乳腺癌细胞中特有的 RBBP7 超级增强子（RBBP7-SE）。CRISPR/Cas9 技术删除该超级增强子区域后，RBBP7 表达下降，癌细胞生长和迁移能力受到抑制。用小分子 BET 抑制剂 JQ1 处理细胞，也能降低 RBBP7 表达，说明 RBBP7-SE 对 RBBP7 表达起重要调控作用456。
• RBBP7 通过诱导干性相关特征增强 BCSCs 的干性：生物信息学分析显示，RBBP7 与细胞干性相关通路有关。体外实验中，RBBP7 过表达增加肿瘤球形成能力和乳腺癌干细胞（BCSC）频率，敲低则抑制这些能力。检测干性相关基因发现，RBBP7 能正调控 SOX2、SOX9、OCT4 和 CCND1 等基因的表达，ChIP-qPCR 和荧光素酶实验证实了 RBBP7 与这些基因启动子的结合及调控作用789。
• RBBP7 招募去甲基化酶 LSD1 通过表观遗传重塑激活干性基因：免疫沉淀实验发现，RBBP7 与 NuRD 复合物的多个成分相互作用，其中敲低 LSD1 能有效抑制乳腺癌细胞的干性和干性相关基因的表达。ChIP-qPCR 实验表明，LSD1 直接结合干性基因的启动子，RBBP7 缺失会阻止 LSD1 的招募。RBBP7 依赖 LSD1 激活干性基因，促进肿瘤生长和转移，敲低 LSD1 能抑制这些过程101112。
• LSD1 特异性抑制剂 ORY-1001 有效抑制 RBBP7 高表达的 BCa 的肿瘤干性、增殖和转移：研究人员引入 LSD1 特异性抑制剂 ORY-1001，发现它对 RBBP7 高表达的乳腺癌细胞敏感，能抑制细胞生长、肿瘤球形成和干性相关基因的表达。在患者来源的类器官和异种移植模型中，ORY-1001 对 RBBP7 高表达的肿瘤抑制效果更明显，还能抑制乳腺癌的肺转移131415。

研究结论和讨论部分指出，RBBP7 在乳腺癌中高表达，与不良预后相关，通过超级增强子维持高表达水平，招募 LSD1 激活干性相关基因，促进肿瘤干性和转移。LSD1 特异性抑制剂 ORY-1001 对 RBBP7 高表达的乳腺癌有显著抑制作用，为乳腺癌治疗提供了新的潜在靶点和治疗策略。然而，该研究也存在一些局限性，如 RBBP7 的预后意义需在更多多中心队列中验证，RBBP7-SE 的结构和活性有待进一步研究，其与免疫逃避的关系也尚不明确，且目前缺乏针对 RBBP7 的特异性抑制剂。但总体而言，该研究为乳腺癌的治疗开辟了新的方向，有望推动乳腺癌治疗领域的进一步发展，未来研究可针对这些局限性展开，为攻克乳腺癌带来更多希望。