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为探究镰刀菌类真菌的演化及分类,研究人员测序 40 个菌株,发现其生活方式多样且基因组特征有差异,意义重大。
在真菌的奇妙世界里,镰刀菌类真菌(fusarioid fungi)宛如一群神秘的 “居民”。它们隶属于肉座菌科(Nectriaceae),这个家族可不简单,包含了腐生菌、内生菌,还有许多重要的病原菌,这些病原菌对商业活动有着重要影响,比如香蕉巴拿马病的 “元凶” 就是其中一员。
长久以来,镰刀菌类真菌的分类和演化一直是个令人头疼的谜题。在肉座菌科中,众多具有镰刀菌样无性形态的属,它们的生活方式五花八门,包括植物、人类和动物的病原菌或共生体、腐生菌、地衣寄生菌、内生菌以及嗜真菌类群。过去的研究大多聚焦于狭义的镰刀菌属(Fusarium sensu stricto),因为这个属包含了许多经济意义重大的物种。然而,其他镰刀菌类属的研究却相对不足,导致对它们的生态、演化等方面了解甚少。为了填补这些知识空白,来自多个研究机构的科研人员踏上了探索之旅,他们的研究成果发表在《Mycological Progress》上。
为了深入了解镰刀菌类真菌的奥秘,研究人员从荷兰 Westerdijk 真菌生物多样性研究所(CBS)的菌种保藏中心选取了代表 23 个镰刀菌类属的 40 个菌株进行全基因组测序。这些菌株宛如一把把 “钥匙”,帮助研究人员打开真菌奥秘的大门。
研究人员运用了多种先进的技术方法。在基因组测序与组装方面,他们采用改良的 CTAB 法提取基因组 DNA,经 BGI 提供的配对末端测序(PE - 150)后,用 Trimmomatic v. 0.39 软件进行序列修剪,再利用 velvet v. 1.2.10 软件和三个不同的 hash/k - mer 值进行基因组组装,通过 BUSCO v. 4.1.2 软件评估基因组质量。在系统发育分析中,结合新组装的 40 个基因组和从 GenBank 及 JGI 下载的 236 个肉座菌科基因组,以 Sarocladium implicatum 为外群,选取 263 个非片段化基因进行分析,使用 MAFFT v. 7.490 软件进行序列比对,trimAl v. 1.4.rev15 软件修剪,最终用 RAxML v. 8.2.12 软件构建系统发育树。在基因组注释环节,运用 MAKER v. 3.01.03 软件进行注释,利用真菌 antiSMASH 在线工具研究代谢物生物合成基因簇,用 standalone tool run_dbcan v. 3.0.5 软件进行碳水化合物活性酶(CAZymes)注释,通过 SignalP6 v. 6.0 g 软件搜索信号蛋白(SP)包括小分泌蛋白(SSP)。
研究结果令人眼前一亮。在系统发育方面,构建的系统发育树与之前的多基因系统发育分析结果相似,将狭义的镰刀菌属与其他属区分开来,并且许多物种复合体得到了很好的支持。在基因组特性上,不同属的基因组大小、生物合成基因簇、CAZymes 以及分泌蛋白等存在显著差异。例如,Rectifusarium 属的生物合成基因簇数量最少,而 Calonectria 属和 Albonectria 与 Setofusarium 组成的类群则较为丰富;CAZymes 的数量在不同生活方式的属中也有所不同,从腐生属到植物致病 / 共生属呈上升趋势;分泌组(secretome)同样因生活方式而异,早期分化的谱系和腐生属的分泌组较小,而镰刀菌属的分泌组较大。在不同属的独特特征方面,大多数属都有独特的基因组特征组合。像镰刀菌属具有相对较少的生物合成基因簇,但分泌组较大,CAZymes 和小分泌蛋白丰富;而其姐妹属 Cyanonectria 则各方面都相对较少。此外,研究人员还重建了祖先生活方式,发现所有分类群的最后共同祖先生活方式并不明确,可能是植物病原体、植物共生体或嗜真菌体。早期分化的类群可能从嗜真菌祖先演化而来,而一些属的祖先生活方式也存在多种可能性,如 Bisifusarium 和 Rectifusarium 属的祖先可能是植物共生体、植物病原体或腐生菌。
在讨论部分,研究人员发现,本研究的系统发育结果与之前的研究相符,进一步证实了镰刀菌属与其他属的分化。关于生活方式,虽然存在不确定性,但推测镰刀菌类真菌的根源可能是腐生菌。许多镰刀菌属物种被认为是腐生菌,但基因组内容表明它们更可能是植物病原体。此外,内生生活方式似乎是从植物寄生演化而来,且在不同属中多次独立演化。基因组内容与生活方式相关,一些属的基因组特征暗示了隐藏的生活方式,如 Bisifusarium 属可能存在未被发现的致病生活方式。
这项研究意义非凡。它通过对镰刀菌类真菌广泛的基因组测序和分析,为其分类和演化提供了坚实的基因组学基础。有助于我们更深入地理解镰刀菌类真菌的生物学特性、生活方式的演化以及它们与宿主之间的相互作用。这不仅对真菌学领域的基础研究有着重要推动作用,也为农业、医学等相关领域应对镰刀菌类真菌引起的问题提供了理论依据,比如可以帮助农业工作者更好地预防和控制植物病害,为人类健康和农业生产保驾护航。
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