新型 lncRNA FLJ：前列腺癌去势抵抗的关键调控因子及潜在治疗靶点

为探究去势抵抗性前列腺癌（CRPC）机制，研究人员研究 lncRNA FLJ，发现其促癌作用，为治疗提供新靶点。

　　前列腺癌（Prostate cancer，PCa）是男性健康的一大杀手，在全球范围内，它是男性中第二常见的癌症，也是癌症相关死亡的第五大原因。目前，针对 PCa 的内分泌治疗，即雄激素剥夺疗法（androgen deprivation therapy，ADT），在早期有一定疗效。然而，大多数患者在 1 - 2 年内会对 ADT 产生耐药性，疾病进展为去势抵抗性前列腺癌（castration-resistant prostate cancer，CRPC），这成为 PCa 患者死亡的主要原因。

在 CRPC 的发生发展过程中，雄激素受体（androgen receptor，AR）的持续激活起着关键作用。虽然恩杂鲁胺（enzalutamide，ENZA）是治疗 CRPC 的一线药物，但患者常常会出现耐药，导致肿瘤复发和转移。此外，非编码 RNA，尤其是长链非编码 RNA（long non-coding RNAs，lncRNAs），在癌症调控中具有重要作用，但在 PCa 中的潜在应用尚未被充分挖掘，其是否参与 CRPC 中 AR 信号通路的持续激活及耐药进展，具体机制也不清楚。同时，自噬在癌症靶向治疗耐药中也扮演着重要角色，但由于其作用的复杂性，针对自噬开发新的治疗策略面临挑战。

为了解决这些问题，重庆医科大学的研究人员开展了一项关于 lncRNA 与 CRPC 关系的研究。该研究成果发表在《Journal of Translational Medicine》上，为 CRPC 的治疗带来了新的希望。

研究人员在研究过程中，运用了多种关键技术方法。首先，收集了重庆医科大学附属第一医院泌尿外科患者的病理组织样本，包括前列腺癌组织及匹配的相邻组织，还有良性前列腺增生和前列腺癌的石蜡组织切片，为研究提供了丰富的样本资源。然后，采用 RNA 测序技术筛选与 CRPC 相关的 lncRNAs，再利用定量聚合酶链反应（qRT-PCR）和 RNA 荧光原位杂交（RNA-FISH）进行验证。此外，通过免疫组化（IHC）、双荧光素酶报告基因实验、染色质免疫沉淀（ChIP）实验等深入探究相关机制。

研究结果如下：

1. FLJ 在 CRPC 中高表达且与预后相关：通过 RNA-Seq 筛选，研究人员发现 lncRNA FLJ 在 CRPC 中显著上调。分析公共数据库及临床样本后发现，FLJ 在 PCa 组织中高表达，且与更高的病理分期和 Gleason 评分相关，这表明 FLJ 可能是 PCa 进展和预后的潜在生物标志物。
2. AR 调控 FLJ 表达：研究表明，FLJ 与 AR 表达呈正相关。AR 作为转录因子，可直接结合到 FLJ 启动子区域的 ARE1 位点，促进 FLJ 转录。添加 AR 激活剂或抑制剂，以及进行 AR 过表达和敲低实验，都验证了 AR 对 FLJ 表达的调控作用。
3. FLJ 促进 CRPC 细胞增殖并抑制体外模拟去势敏感性：敲低 FLJ 后，CRPC 细胞增殖受到抑制，在体外模拟去势环境下，细胞增殖抑制更明显，同时细胞对 ENZA 的敏感性恢复，IC₅₀值显著降低。
4. FLJ 通过雄激素诱导的自噬促进 CRPC 细胞增殖：研究发现，FLJ 可调节 CRPC 细胞的自噬水平。沉默 FLJ 抑制了自噬标记蛋白 LC3B 从 I 型向 II 型的转化，抑制了自噬相关蛋白的表达。此外，FLJ 沉默抑制了细胞对微量雄激素诱导的反应，通过雄激素诱导的自噬恢复了 CRPC 细胞对模拟去势环境和 ENZA 的敏感性。
5. FLJ 通过 AR 介导的途径促进雄激素诱导的自噬：研究证实，FLJ 对雄激素诱导的自噬调节依赖于 AR。沉默 FLJ 抑制了 AR 蛋白表达和 LC3B I 向 II 的转化，添加 AR 激活剂或抑制剂以及转染 AR 过表达质粒的实验，都表明 FLJ 通过 AR 介导的途径促进雄激素诱导的自噬。
6. FLJ 调节 AR 的定位和稳定性：FLJ 主要定位于细胞质，沉默 FLJ 促进 AR 核转运，抑制其在细胞质中的表达，并加速 AR 蛋白降解，说明 FLJ 通过调节 AR 的定位和稳定性发挥作用。
7. FLJ 对体内肿瘤生长和 ENZA 治疗效果的影响：体内实验显示，敲低 FLJ 抑制了肿瘤生长，增强了 ENZA 的治疗效果。免疫组化结果表明，FLJ 沉默抑制了肿瘤中 AR、LC3B 和 Ki67 的表达，且 ENZA 治疗进一步降低了这些分子的表达水平。

研究结论和讨论部分指出，本研究发现了一种新型的 AR 相互作用 lncRNA - FLJ，它通过 AR 介导的微量雄激素诱导的自噬促进 CRPC 细胞增殖，抑制细胞对模拟去势和抗雄激素药物的敏感性。FLJ 在 PCa 细胞系和患者组织中显著上调，与更高的病理分期和 Gleason 评分相关，是 PCa 进展的潜在生物标志物。同时，靶向 FLJ 可能为 CRPC 患者提供一种新的潜在治疗方法。随着对 lncRNA 研究的不断深入，lncRNA 靶向疗法有望成为癌症治疗领域的重要突破方向，为攻克癌症带来新的曙光。