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为探究 NF1 在黑色素瘤中的作用，研究人员发现 NF1 与 PD-L1 相互作用，其缺失会促进免疫逃逸，为相关癌症治疗提供依据。
黑色素瘤，作为一种恶性程度较高的皮肤肿瘤，严重威胁着人类健康。在过去几十年间，尽管医学领域在癌症研究方面取得了显著进展，但黑色素瘤的治疗仍面临诸多挑战。其中，对肿瘤细胞免疫逃逸机制的不完全理解，使得难以制定更为有效的治疗策略。NF1（神经纤维瘤病 1 型基因）和 PD-L1（程序性死亡配体 1）在肿瘤发生发展过程中的作用逐渐受到关注，然而，它们之间的关联以及对黑色素瘤免疫逃逸的影响尚不明确。为了深入剖析这些问题，来自麦吉尔大学（McGill University）等多个机构的研究人员开展了一项深入研究，相关成果发表在《Cell Reports》杂志上。
研究人员采用了多种关键技术方法来开展此项研究。在细胞实验方面，运用免疫共沉淀技术，确定蛋白质之间的相互作用；通过构建稳定敲低 NF1 的细胞系，研究 NF1 缺失对细胞的影响；利用荧光激活细胞分选（FACS）技术，精确分析细胞表面蛋白的表达水平。在动物实验方面，虽存在一定局限性，但在细胞实验基础上进行了大量探索。此外，还对多个公共数据集进行 Meta 分析，以探究 NF1 突变与患者对免疫治疗反应之间的关系。
研究结果如下：
- NF1 和 PD-L1 在黑色素瘤细胞中相互作用：通过对已报道的 NF1 相互作用蛋白进行通路分析，发现其与 T 细胞调节相关。进一步实验证实，NF1 和 PD-L1 在黑色素瘤细胞系中能够相互免疫共沉淀。研究还发现，NF1 的 GRD（GAP 相关结构域）直接与 PD-L1 的细胞内胞质尾（CT）结合，且这种结合不依赖于 NF1 的 RAS-GAP 活性。同时，免疫荧光成像和邻近连接分析（PLA）表明，NF1 和 PD-L1 在完整细胞中存在共定位现象。
- NF1 缺失导致细胞外 PD-L1 增加：研究人员稳定感染多种黑色素瘤细胞系，使其 NF1 基因敲低（KD）。结果显示，NF1 KD 导致细胞膜结合的 PD-L1 和分泌到细胞外的 PD-L1 水平均增加。进一步研究发现，过表达与 PD-L1 相互作用的 NF1 GRD 能够恢复 PD-L1 细胞表面水平，且这种调节不依赖于 NF1 的 RAS-GAP 活性。此外，NF1 缺失导致的细胞外 PD-L1 增加可能与外泌体分泌和内体循环有关，但具体机制仍有待进一步明确。
- NF1 缺失促进对 T 细胞杀伤的抗性，可被抗 PD-1/PD-L1 免疫检查点阻断剂消除：研究人员利用工程化的 T 细胞与黑色素瘤细胞进行共培养实验。结果表明，NF1 KD 的黑色素瘤细胞对 T 细胞杀伤具有抗性，而重新引入 NF1 GRD 可增加其对 T 细胞杀伤的敏感性。此外，抗 PD-1/PD-L1 阻断剂能够恢复 NF1 KD 黑色素瘤细胞对 T 细胞杀伤的敏感性，使其达到与对照细胞相同的水平。
- NF1 突变与黑色素瘤患者对抗 PD-1 治疗的反应改善相关：通过对多个黑色素瘤外显子测序研究的 Meta 分析，发现 NF1 功能缺失（LoF）突变的黑色素瘤患者对抗 PD-1 免疫检查点抑制剂（ICIs）的反应率显著高于携带 BRAF 或 NRAS 热点突变的患者。这一结果表明，NF1 对 PD-L1 的调节可能是导致这种差异的重要原因之一。
研究结论和讨论部分指出，该研究发现了 NF1 调节免疫检查点蛋白 PD-L1 的新机制。NF1 通过直接结合 PD-L1，负向调节其细胞表面表达和分泌。NF1 缺失会导致黑色素瘤细胞表面和分泌的 PD-L1 增加，进而介导 PD-1 结合，使肿瘤细胞对 T 细胞杀伤产生抗性，而抗 PD-1/PD-L1 阻断剂能够逆转这一过程。这一机制为解释 NF1 突变的黑色素瘤患者对抗 PD-1 ICIs 反应率较高提供了理论依据，同时也为在其他 NF1 突变癌症中探索抗 PD-1 治疗的临床应用提供了重要的理论支持。然而，该研究也存在一定的局限性，如缺乏小鼠体内实验数据，且未充分研究 NF1 缺失对黑色素瘤与免疫系统相互作用的影响。未来研究可进一步利用人源化小鼠模型，深入探究 NF1 缺失对肿瘤微环境（TME）的影响，以及 NF1 调节 PD-L1 在这一过程中的具体作用，为黑色素瘤及其他相关癌症的治疗提供更全面的理论基础和治疗策略。
