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为调查意大利北部托斯卡纳地区野生食肉动物粪便中多房棘球绦虫(Em)及其他带绦虫情况,研究人员开展调查,发现 Em 新踪迹,或意味着其在欧洲南扩。
在北半球的广阔天地间,一场关乎人类健康与生态平衡的 “暗战” 正在悄然上演,主角便是多房棘球绦虫(
Echinococcus multilocularis,简称 Em)。这是一种令人头疼的人畜共患寄生虫,在野生犬科动物和小型哺乳动物之间传播,每年都导致大量人类感染泡型包虫病(alveolar echinococcosis,AE),给全球公共卫生带来沉重负担。
在欧洲,随着赤狐数量的增加和活动范围的扩大,Em 的传播风险也在不断上升。在意大利,过去 Em 主要集中在北部阿尔卑斯山区,但近年来其分布情况似乎有所变化。为了弄清楚 Em 在意大利的传播态势,比萨大学等多个机构的研究人员,对意大利北部亚平宁山脉附近的阿普安阿尔卑斯地区公园(Apuan Alps Regional Park,AARP)和蒙特皮萨诺山区(Monte Pisano,MP)展开了研究,相关成果发表在《Scientific Reports》杂志上。
研究人员为了开展此项研究,采用了多种技术方法。在样本采集方面,他们在 2020 年至 2023 年期间,对 AARP 和 MP 地区进行定期采样,收集野生食肉动物的粪便样本,并记录样本的 GPS 位置、新鲜度等信息,仅选取新鲜度高的样本用于后续分析。在检测分析上,运用标准的浮选筛分法收获带绦虫卵,对单个虫卵进行 DNA 提取,利用巢式聚合酶链式反应(PCR)扩增线粒体部分基因片段,之后进行测序分析;同时,对粪便样本进行另一种分子筛查,即通过实时荧光定量 PCR(qPCR)检测 Em 的特定基因片段。
研究结果如下:
- 浮选、筛分和 PCR 检测结果:研究人员共收集了 130 份粪便样本(9 份鼬科动物、61 份狐狸和 60 份狼)。经过浮选、筛分和巢式 PCR 检测,在部分样本中发现了多种带绦虫卵。在 AARP 地区,从狼、狐狸和鼬科动物粪便中检测到 Em、泡状带绦虫(Taenia hydatigena)、克氏带绦虫(Taenia krabbei)、多棘带绦虫(Taenia polyacantha)等多种带绦虫;在 MP 地区,仅检测到 Em。不过,能成功进行 PCR 扩增和测序的虫卵比例并不高12。
- Em 虫卵的分子鉴定和测序:研究人员基于 cox1 基因对 Em 虫卵进行特征分析,发现了 4 种 cox1 单倍型。其中一种常见的遗传变异体在多个欧洲国家以及北美都有发现,另外三种则是新的单倍型3。
- qPCR 检测 Em DNA 结果:研究人员收集了 168 份粪便样本(11 份鼬科动物、77 份狐狸和 80 份狼)进行 qPCR 检测,但所有样本均未得到阳性结果4。
研究结论与讨论部分指出,此次在阿普安阿尔卑斯地区和蒙特皮萨诺山区发现 Em,是其在意大利亚平宁山脉的首次记录,意味着 Em 在欧洲的分布范围可能正在向南扩展,这一发现对公共卫生具有重要意义。然而,由于 qPCR 检测结果均为阴性,目前还无法确定这些发现是由于寄生虫的暂时存在,还是该地区已经形成了稳定的传播焦点。同时,宿主种类、气候和土地利用变化等因素都可能对 Em 的分布产生影响,需要进一步研究。此外,研究中还发现狼和狐狸体内的带绦虫种类多样,其分布可能与宿主的饮食有关。
总的来说,这项研究为我们了解 Em 在欧洲的传播提供了重要线索,但仍有许多未知等待探索。未来,研究人员需要加强对 Em 的监测,深入研究其传播机制,以便制定更有效的防控策略,保护人类和动物的健康。