circKIAA1429 加速肝癌进展的潜在机制：新发现与抗癌新希望

为探究 circKIAA1429 在肝癌（HCC）进展中的机制，研究发现其通过 SETD1A 影响 GLIS2 和 NAP1L3 表达，加速 HCC 进程，为治疗提供新靶点。

　　肝癌，这个隐匿在人体内的 “杀手”，一直以来都严重威胁着人类的健康。据 Global Cancer Incidence, Mortality and Prevalence (GLOBOCAN) 2022 数据显示，肝癌在全球范围内是第六大常见癌症，同时也是癌症相关死亡的第三大常见原因 。它作为原发性肝癌中最常见的成人亚型，死亡率高、预后差且极易复发。由于发病初期症状不明显，多数患者确诊时已处于晚期，错过了最佳治疗时机。即便现有手术、化疗等治疗手段，但高复发和转移率使得肝癌患者的治疗效果依旧不理想。因此，深入了解肝癌的发病机制，寻找新的治疗靶点迫在眉睫。

来自桐乡市第一人民医院普外科的研究人员 Yiting Yuan、Junwei Huang 等人开展了一项关于 circKIAA1429（hsa_circ_0084922）在肝癌（Hepatocellular Carcinoma，HCC）进展中潜在机制的研究。该研究成果发表在《Infectious Agents and Cancer》杂志上，为肝癌的治疗带来了新的曙光。

在本次研究中，研究人员运用了多种关键技术方法。细胞实验方面，通过培养人永生化肝细胞系（MIHA）和人肝癌细胞系（Huh-7、HCC36、HCCLM3、MHCC97-L）进行相关实验；采用细胞转染技术，将针对 circKIAA1429、SETD1A 或 GLIS2 的小干扰 RNA（siRNA）以及过表达 NAP1L3 的质粒转染到细胞中；利用 CCK-8 法检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡，Transwell 实验检测细胞迁移和侵袭能力 。此外，还运用了 Actinomycin D 和 RNase R 处理来评估 RNA 稳定性，通过 RNA 免疫沉淀（RIP）、RNA pull-down 实验验证分子间结合，染色质免疫沉淀（ChIP）分析检测蛋白与 DNA 的结合，以及构建裸鼠异种移植瘤模型进行体内实验 。

研究结果如下：

• circKIAA1429 在肝癌细胞中的表达：与 MIHA 细胞相比，circKIAA1429 在肝癌细胞系中表达显著升高，且在 Huh-7 和 HCCLM3 细胞中相对更高。同时，circKIAA1429 的表达比线性 KIAA1429 更稳定。通过 RT-qPCR 检测多种细胞中 circKIAA1429 的表达，以及用 Actinomycin D 和 RNase R 处理后检测其稳定性得出此结论。
• 敲低 circKIAA1429 对肝癌细胞的影响：敲低 circKIAA1429 后，显著抑制了 Huh-7 和 HCCLM3 细胞的增殖、迁移和侵袭能力，同时促进了细胞凋亡。这一结果是通过在细胞中转染针对 circKIAA1429 的 siRNA，再分别用 CCK-8 法、流式细胞术和 Transwell 实验检测得出的。
• circKIAA1429 与 SETD1A 的相互作用及对 GLIS2 的影响：通过 RPISeq 数据库预测 circKIAA1429 与 SETD1A 的结合概率，并经 RIP 和 RNA pull-down 实验验证二者存在结合。ChIP 分析显示，SETD1A 和 H3K4me³在 GLIS2 启动子上富集，敲低 circKIAA1429 后富集增强。而且，GLIS2 在肝癌细胞中表达降低，敲低 circKIAA1429 后其表达升高，沉默 SETD1A 后又下降。由此表明，circKIAA1429 直接与 SETD1A 相互作用，抑制 H3K4me³在 GLIS2 启动子上的富集，导致 GLIS2 表达减少。
• circKIAA1429 与 SETD1A 的相互作用及对 NAP1L3 的影响：同样，SETD1A 和 H3K27me³在 NAP1L3 启动子上富集，敲低 circKIAA1429 后富集增强。NAP1L3 在肝癌细胞中表达升高，敲低 circKIAA1429 后下降，沉默 SETD1A 后又升高。说明 circKIAA1429 直接与 SETD1A 相互作用，抑制 H3K27me³在 NAP1L3 启动子上的富集，使 NAP1L3 表达增加。
• GLIS2 和 NAP1L3 对 circKIAA1429 敲低效果的影响：低表达 GLIS2 或过表达 NAP1L3 会减轻敲低 circKIAA1429 对肝癌细胞的抗癌作用。在 Huh-7 细胞中分别沉默 GLIS2 表达或过表达 NAP1L3，并与敲低 circKIAA1429 进行联合实验，用 CCK-8 法、流式细胞术和 Transwell 实验检测细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力得出此结论。
• circKIAA1429 对体内肿瘤发生的影响：在裸鼠异种移植瘤模型中，敲低 circKIAA1429 导致肿瘤体积和重量减小，Ki-67 阳性率降低，TUNEL 阳性率升高，E-cadherin 阳性率增加，N-cadherin 阳性率降低。同时，肿瘤组织中 circKIAA1429 和 NAP1L3 表达下降，GLIS2 表达升高。表明低表达 circKIAA1429 通过 GLIS2/NAP1L3 降低了肝癌细胞的体内致瘤性。

研究结论指出，circKIAA1429 直接与 SETD1A 相互作用，抑制 SETD1A 和 H3K4me³/H3K27me³在 GLIS2/NAP1L3 启动子上的富集，进而降低 GLIS2 表达、增加 NAP1L3 表达，最终加速了肝癌的进展。

这项研究具有重要意义，它揭示了 circKIAA1429 在肝癌发展中的新机制，为肝癌的治疗提供了潜在的新靶点。不过，研究也存在一定局限性，如仅探索了 circKIAA1429 的下游机制，未检测其上游机制，且仅在两种细胞系中研究了单一机制，在其他细胞中的情况尚不明确，circKIAA1429 是否通过 ceRNA 机制或 RNA 结合蛋白影响 NAP1L3 或 GLIS2 的表达也有待进一步研究 。未来，研究人员将继续深入探索这些未知领域，为肝癌的治疗提供更坚实的理论基础和更有效的治疗策略。