快速荧光免疫分析法检测粪便样本中弯曲杆菌抗原：精准诊断的新突破

研究人员评估 Sofia 弯曲杆菌荧光免疫分析法（SCFIA）检测粪便样本中弯曲杆菌抗原性能，结果与 PCR 高度相关，有助于早期诊断。

　　弯曲杆菌，这个在生活中 “隐藏极深” 的微生物，却在全球范围内掀起不小的 “风浪”。它可是引发细菌性腹泻传染病的 “主力军”，在高、低收入国家的发病率都在不断攀升。而且，它还不满足于只在肠道 “捣乱”，能突破胃肠道屏障，引发菌血症，严重时可导致关节、骨骼、软组织感染，甚至出现血管感染、心内膜炎等棘手病症。感染后的并发症，如反应性关节炎、格林 - 巴利综合征等，也给患者带来极大痛苦。

目前，针对弯曲杆菌感染的诊断方法各有 “短板”。粪便培养不仅耗时久，至少需要 48 小时，而且敏感性欠佳，只有 60 - 76%。分子方法如实时聚合酶链反应（qPCR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）虽然能快速出结果，敏感性和特异性也不错，但技术要求高，还常常仅针对空肠弯曲杆菌（C. jejuni）和结肠弯曲杆菌（C. coli）进行验证。免疫层析试验操作简单，可敏感性又较低。因此，寻找一种快速、准确的检测方法迫在眉睫。

法国国家弯曲杆菌和幽门螺杆菌参考中心（NRCCH）的研究人员 Lucie Bénéjat、Astrid Ducournau 等人开展了一项研究，评估 Sofia 弯曲杆菌荧光免疫分析法（SCFIA）对粪便样本中弯曲杆菌抗原的检测性能，相关成果发表在《Gut Pathogens》上。

研究人员采用了多种技术方法。一方面，使用 SCFIA 检测粪便样本中 C. jejuni、C. coli、C. upsaliensis 和 C. lari 的抗原，依据专有算法计算标本超过临界值（S/CO）的值来判断结果。另一方面，将样本进行培养，在特定条件下孵育后用基质辅助激光解吸电离 - 飞行时间质谱（MALDI - TOF）鉴定细菌；同时，采用 BD MAX 肠道细菌检测板进行分子检测，以 BD MAX PCR 检测弯曲杆菌阳性作为金标准。研究样本包括前瞻性评估的 205 份新鲜粪便标本和回顾性分析的 94 份冷冻标本。

研究结果如下：

• 准确性：在 205 份前瞻性评估标本中，SCFIA 与金标准的阳性符合率为 96.88%，阴性符合率为 98.84%；回顾性评估中，阳性符合率为 97.87%。总体来看，SCFIA 与金标准的阳性符合率达 97.62%1。
• 线性和对其他弯曲杆菌物种的反应性：SCFIA 对 C. coli、C. jejuni、C. lari、C. upsaliensis、C. ornithocola 和 C. armoricus 表现出良好反应性，但对 C. fetus 无反应，即便在未稀释的高浓度样本中也检测不到。S/CO 值与各弯曲杆菌物种每毫升细菌拷贝数的估计值呈强相关，相关系数 R2 在 0.991 - 0.999 之间。通过线性回归分析，不同弯曲杆菌物种达到阳性检测结果（S/CO>1）所需的最低浓度在 1.47×10? - 17×10? CFU/mL 之间（C. fetus 除外）234。
• 对系统发育相关物种的反应性：对系统发育相关物种 A. butzleri、H. cinaedi 和 H. pullorum 进行检测，SCFIA 在最高浓度下也均呈阴性结果，表明该检测方法与这些物种无交叉反应5。

研究结论和讨论部分指出，SCFIA 是一种快速、准确的抗原检测方法，对重症住院患者意义重大，能助力早期靶向抗菌治疗。它可检测多种导致弯曲杆菌病的主要物种，在临床应用方面极具潜力。不过，该方法无法检测 C. fetus，这是其局限性。目前市场上尚无检测 C. fetus 的试剂盒，这一检测空白亟待填补。此外，SCFIA 与 C. ornithocola 和 C. armoricus 虽有反应，但这两种菌在肠胃炎患者粪便标本中极少被检测到，其临床意义相对有限。总体而言，SCFIA 为弯曲杆菌感染的诊断提供了新的有力工具，未来有望在临床诊断中发挥重要作用，推动弯曲杆菌病诊疗水平的提升。