《Nature Medicine》新诊断胶质母细胞瘤新辅助三联免疫检查点阻断疗法：开启脑癌治疗新希望

为解决胶质母细胞瘤（GBM）治疗难题，Melanoma Institute Australia 的研究人员开展新辅助三联免疫检查点阻断疗法研究，发现该疗法可激活免疫反应，有望改善患者预后，为 GBM 治疗提供新思路。

　　

胶质母细胞瘤（Glioblastoma，GBM）是一种极其凶险的原发性成人脑肿瘤，堪称大脑健康的 “头号杀手”。目前，标准治疗方案（手术、化疗和放疗）后，GBM 极易复发，患者的生存状况不容乐观。免疫检查点抑制剂（ICIs）在多种癌症治疗中成效显著，可一旦用于 GBM 患者，却往往 “折戟沉沙”，疗效甚微。这主要归咎于 GBM 肿瘤中肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）稀少、免疫抑制性肿瘤微环境以及较低的肿瘤突变负荷，再加上大分子难以进入脑实质，使得 ICIs 难以在 GBM 治疗中发挥作用。
为了打破这一困境，Melanoma Institute Australia 等机构的研究人员勇挑重担，开展了一项极具开创性的研究，试图探索新辅助联合免疫疗法对 GBM 的治疗效果。研究人员大胆假设，在疾病原位给予新辅助联合免疫疗法，或许能激发比术后或复发后治疗更强的免疫反应。
研究人员迎来了一位 56 岁的男性患者，他被确诊为 IDH 野生型、MGMT 启动子未甲基化的左颞叶 GBM。针对这一病例，研究人员采用了新辅助三联免疫疗法（抗程序性死亡蛋白 1（PD-1）、抗细胞毒性 T 淋巴细胞蛋白 4（CTLA-4）和抗淋巴细胞激活基因 3（LAG3）） ，12 天后进行了最大安全切除手术，随后还进行了辅助放疗、辅助免疫治疗和个性化肽疫苗接种。
此项研究成果意义非凡，它为 GBM 的治疗开辟了新方向。以往 GBM 的治疗手段有限，患者预后极差，而该研究表明新辅助联合免疫疗法或许能成为 GBM 治疗的新希望，有望改善患者的生存状况，提高患者的生活质量。并且，研究人员计划开展一项名为 GIANT（试验注册号：NCT06816927）的临床试验，进一步验证这一疗法的有效性，这无疑为 GBM 患者带来了曙光。
在技术方法上，研究人员主要运用了以下几种关键技术：首先是基因检测技术，通过全基因组测序（WGS）分析患者肿瘤组织的基因变异情况，如 EGFR、MDM4 等基因的扩增、PTEN 基因的缺失等；其次是流式细胞术，用于分析肿瘤组织和外周血中免疫细胞的变化，包括 T 细胞亚群的比例、免疫细胞的激活状态等；还有组织成像技术，借助 PhenoCycler-Fusion 进行组织成像和分析，观察免疫细胞在肿瘤组织中的分布和相互作用。
下面来看具体的研究结果：

• 新辅助 ICI 重塑 GBM 免疫景观：研究人员通过染色和免疫荧光等方法对治疗前后的肿瘤标本进行分析。结果惊喜地发现，治疗后肿瘤中 CD3⁺T 细胞（包括 CD3⁺CD4⁺T 细胞和 CD3⁺CD8⁺细胞毒性 T 细胞）数量显著增加，并且 CD4⁺和 CD8⁺T 细胞与肿瘤细胞的共定位也有所增加。同时，巨噬细胞和小胶质细胞与肿瘤细胞的共定位减少。这一系列变化表明免疫细胞在肿瘤组织中的浸润和激活明显增强。

• T 细胞受体（TCR） repertoire 和免疫细胞变化：对治疗前后肿瘤和血液标本的分析显示，新辅助 ICIs 治疗后，肿瘤中 TCRβ 和 TCRγ 的克隆数、Shannon 多样性指数和 Shannon 均匀性指数均显著增加，这意味着 TCR 的多样性得到提升。并且，治疗后肿瘤中 63.65% 的 TCRβ 克隆是独特的，28.21% 的 TCRβ 克隆也在循环中被检测到，而且治疗前后及外周血单核细胞样本中共享的 TCRβ 克隆是扩增最明显的，这表明存在早期克隆扩增现象。

• 外周免疫标志物的动态变化：对治疗前后外周血单个核细胞（PBMC）样本的分析发现，新辅助 ICI 治疗后，PBMC 中 TCRβ 和 TCRγ 的数量、多样性和均匀性增加。同时，外周血中增殖的效应和记忆（CD45⁺RA^?RO⁺）CD8⁺、CD4⁺T_EM和 CD4⁺T_reg细胞亚群的比例显著升高，这些细胞的激活标记 OX40、MHC II 类分子和细胞毒性标记 GzmB 也被诱导表达，PD-1 被 nivolumab 占据，进一步证明了免疫激活。

• 血清蛋白的变化：通过 Olink 邻近延伸分析测定血清中免疫肿瘤相关蛋白水平，发现 6% 的蛋白在治疗后有超过两倍的变化，这些蛋白与 T 细胞激活、细胞因子和白细胞介素（IL）信号传导相关，如 LAG3、PDCD1、IL5、IL6、IL10、IL12、CXCL9 和 CXCL10 以及 IFNγ 等，说明免疫治疗引发了相关信号通路的改变。
  在研究结论和讨论部分，研究人员发现单剂量的新辅助 nivolumab、ipilimumab 和 relatlimab 联合治疗，相较于基线肿瘤，显著增加了新诊断的 MGMT 启动子未甲基化 GBM 患者治疗后肿瘤中 TILs 的多样性、丰度和激活程度。尽管目前无法确定这些变化是否能为患者带来临床益处，但该病例表明，新辅助联合 ICI 疗法能够促进肿瘤特异性 T 细胞的浸润、激活和扩增。并且，17 个月后患者无明确复发迹象，这超越了该类型 GBM 接受放化疗的中位预后。不过，研究也存在一定的局限性，例如临床结果和生物标本仅来自一名患者，样本量有限，可能影响研究结果的普遍性。但总体而言，该研究为 GBM 的治疗提供了新的思路和方向，值得进一步深入研究和探索。