壳聚糖 /β- 甘油磷酸 / 胶原蛋白水凝胶联合间充质干细胞：慢性跟腱损伤治疗新希望

为解决慢性跟腱损伤治疗效果不佳问题，长江大学附属荆州医院研究人员开展壳聚糖 /β- 甘油磷酸 / 胶原蛋白（C/GP/Co）水凝胶联合骨髓间充质干细胞（MSCs）治疗慢性跟腱损伤研究，发现该水凝胶可通过 Akt/GSK-3β 通路促进跟腱愈合，为治疗提供新方向。

　　在运动的世界里，跟腱就像人体的 “弹簧”，连接着小腿肌肉和脚跟，帮助人们完成跑跳等各种动作。然而，一旦这个 “弹簧” 受伤，尤其是慢性跟腱损伤，对患者来说可太痛苦了。常见的急性跟腱损伤若没得到妥善处理，很容易发展成慢性损伤，疼痛、肿胀和功能受限成了患者生活的常态，极大地降低了生活质量。

目前，慢性跟腱损伤的治疗手段不少，保守治疗、手术治疗以及再生治疗等都在应用，但效果却不尽如人意。医生和科研人员都在努力寻找更有效的治疗方法，这时候，长江大学附属荆州医院的研究人员站了出来，开展了一项极具意义的研究，为攻克慢性跟腱损伤难题带来了新希望。他们聚焦于壳聚糖 /β- 甘油磷酸 / 胶原蛋白（C/GP/Co）水凝胶联合骨髓间充质干细胞（MSCs）对慢性跟腱损伤的治疗效果，相关成果意义非凡。

研究人员为了完成这项研究，采用了多种关键技术方法。他们先从 4 周龄的雄性 Sprague-Dawley（SD）大鼠中分离和培养骨髓间充质干细胞。实验动物模型方面，建立慢性跟腱损伤大鼠模型后，将大鼠分为生理盐水（模型）组、C/GP/Co 水凝胶组、C/GP/Co/MSCs 水凝胶组和正常对照组进行研究。同时，运用了蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测信号通路和凋亡相关蛋白表达，通过组织染色技术（如苏木精 - 伊红（H&E）染色、Masson 三色染色、免疫组化染色和免疫荧光染色）观察组织形态学变化，还进行了生物力学测试评估跟腱的力学性能 。

下面来看看具体的研究结果：

• 水凝胶的性质：C/GP/Co 水凝胶在室温下呈液态，37°C 时可凝胶化，pH 值为 7.30，凝胶化时间约 8 分钟，这一特性便于与 MSCs 混合进行体内注射。
• 相关蛋白表达：Western blot 分析显示，模型组中 p-AKT 和 p-GSK_3β水平低于对照组，表明肌腱愈合受损。C/GP/Co 水凝胶组的 p-AKT 和 p-GSK_3β水平高于模型组，而 C/GP/Co/MSCs 水凝胶组的这两种蛋白水平最高，说明 MSCs 增强了水凝胶的治疗效果。同时，C/GP/Co/MSCs 水凝胶组抗凋亡蛋白 Bcl-2 表达增加，促凋亡蛋白 Bax 表达减少，提示该水凝胶可减轻跟腱组织凋亡。
• 组织学分析：H&E 染色和 Masson 三色染色结果显示，模型组和 C/GP/Co 水凝胶组的胶原排列紊乱，而 C/GP/Co/MSCs 水凝胶组和对照组的肌腱纤维排列整齐，类似正常肌腱结构，且 C/GP/Co/MSCs 水凝胶组的胶原纤维组织和密度更好。
• 免疫组化分析：免疫组化染色显示，C/GP/Co/MSCs 水凝胶组中肌腱病标志物 Caspase-3 的染色强度低于模型组，同时该组的 I 型胶原（Col 1）表达增加，III 型胶原（Col 3）表达减少，表明水凝胶促进了肌腱的修复。
• 免疫荧光分析：免疫荧光染色表明，模型组炎症标志物 CD163 和 CD206 表达显著增加，而 C/GP/Co/MSCs 水凝胶组这两种标志物的表达进一步降低，显示出该水凝胶的抗炎作用。
• 生物力学测试：生物力学测试发现，模型组跟腱的最大拉伸强度最低，C/GP/Co/MSCs 水凝胶组的拉伸强度显著高于 C/GP/Co 水凝胶组，接近正常对照组水平，说明该水凝胶增强了跟腱的力学性能。

综合研究结果和讨论部分，这项研究意义重大。C/GP/Co/MSCs 水凝胶通过激活 Akt/GSK-3β 通路，有效抑制了慢性跟腱组织中的炎症和细胞凋亡，促进了肌腱的修复和再生。C/GP/Co 复合支架为 MSCs 提供了良好的微环境，促进其黏附、增殖和分化，同时增加了胶原沉积，提高了跟腱的生物力学性能。这一研究成果表明，C/GP/Co/MSCs 水凝胶在慢性跟腱损伤治疗方面具有巨大的潜力，为临床治疗提供了新的思路和方法。不过，研究也存在一些局限性，比如对 Akt/GSK-3β 信号通路的研究还停留在相关性层面，样本量较小且研究周期较短。未来还需要进一步深入研究，以明确该通路的具体机制，验证长期治疗效果，推动这一治疗方法从实验室走向临床应用，真正造福广大慢性跟腱损伤患者。