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为探究淡水红藻生活史相关问题,山西大学的研究人员对广西拟弯枝藻(Virescentia guangxiensis)不同生活史阶段开展研究,发现其细胞器基因组高度保守,转录组基因表达有显著差异,为相关研究提供了数据与理论基础。
广西拟弯枝藻是淡水生态系统中默默存在却至关重要的 “小生命”,它们属于红藻门(Rhodophyta),在溪流和泉水中安静地生长,是维持生态平衡的重要一环,同时也是科学家们探索光合真核生物起源与演化的关键 “钥匙” 。然而,这些小家伙对生长环境十分挑剔,低光、低温且高溶解氧的环境才是它们的 “理想家园”。目前,还没有实验室能成功模拟出它们的生长环境。并且,由于同时收集其不同生活史阶段的藻株难度极大,此前也从未有人对同一物种不同生活史阶段的光合强度进行过比较。
为了揭开淡水红藻生活史的神秘面纱,探索它们在不同生活史阶段的奥秘,山西大学的研究人员挺身而出,开展了一项针对广西拟弯枝藻不同生活史阶段的深入研究。他们的研究成果意义非凡,不仅为淡水红藻的组织学数据库提供了可靠的数据支持,还为珍稀濒危物种的保护奠定了理论基础。
在这项研究中,研究人员运用了多种先进的技术方法。首先是样本采集与形态观察,他们从云南昆明乐居村采集了藻株,通过显微镜观察其形态特征 。接着,利用高通量测序技术对细胞器基因组进行测序、组装和注释;运用系统发育分析构建系统发育树,确定藻株的分类地位;借助转录组测序及分析,探究不同生活史阶段基因的表达情况,还通过定量实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)对转录组结果进行验证 。
研究结果如下:
- 形态特征与藻株鉴定:研究人员仔细观察了样本的形态特征,发现广西拟弯枝藻在 chantransia 阶段,藻体呈橄榄绿色,由匍匐和直立丝状体构成,分支角度不超 25°,有密集丛生的特点,营养细胞为圆柱形,分支末端有卵形或近球形的单孢子囊 。在配子体(gametophyte)阶段,藻体同样是橄榄绿色,富含凝胶状物质,分支不规则,轮生体发达,有多种分支模式,还包含多种特殊结构 。经鉴定,这些样本均属于广西拟弯枝藻。
- 基因组特征:研究人员对配子体和 chantransia 阶段的基因组进行深入研究后发现,配子体阶段叶绿体基因组长度为 184,899bp,GC 含量 28.20%,注释出 235 个基因;线粒体基因组长度 26,867bp,GC 含量 27.19%,注释出 47 个基因 。chantransia 阶段叶绿体基因组长度 184,887bp,GC 含量 28.20%,基因数量与配子体相同;线粒体基因组长度 27,014bp,GC 含量 27.24%,注释出 49 个基因 。
- 细胞器基因组共线性比较:通过对细胞器基因组结构的比较,研究人员惊喜地发现,叶绿体和线粒体基因组之间存在高度的同源性。虽然叶绿体基因组大小和基因数量在两个阶段几乎没有差异,只是部分基因位置有细微变化;线粒体基因组大小有所不同,配子体的线粒体基因组还缺少两个 tRNA-Leu (tag) 基因,但整体上,两个阶段的叶绿体和线粒体基因组呈现出完整的协变结构 。
- 基因组系统发育分析:研究人员构建的细胞器基因组系统发育树显示,来自云南昆明的配子体和 chantransia 藻株与来自山西临汾的广西拟弯枝藻相聚在一起,它们的叶绿体基因组遗传距离为 0,核苷酸变异在 48 - 51bp;线粒体基因组遗传距离为 1%,核苷酸变异 80 - 81bp 。这充分表明,这些藻株与广西拟弯枝藻亲缘关系密切。
- 转录组数据特征:转录组测序后,研究人员对数据进行一系列处理分析。结果显示,测序数据质量极高,共鉴定出 56,796 个单基因(unigenes) 。对这些单基因进行功能注释后发现,在多个数据库中均有注释的基因数量众多,且在不同功能分类中都有分布。
- 两个生活史阶段转录组比较:研究人员比较两个生活史阶段的转录组发现,基因表达模式差异显著。配子体阶段有 2390 个基因上调,8498 个基因下调。KEGG 通路分析表明,配子体阶段核糖体途径、光合作用相关途径的基因表达显著下降 。qRT-PCR 验证结果与转录组测序结果高度一致。
研究结论与讨论部分指出,本研究首次同时从同一地点采集到同一物种不同生活史阶段的样本,通过系统发育分析确定其为广西拟弯枝藻。细胞器基因组比较分析发现,叶绿体和线粒体基因组在不同生活史阶段高度保守,这有力地证明了藻类基因组在不同生活史阶段的稳定性 。转录组测序则揭示了两个生活史阶段基因表达模式的显著差异,尤其是光合作用和核糖体相关基因。在低光环境下,配子体比 chantransia 更能适应低光,而 chantransia 的光合能力更强。此外,研究还发现采集地中配子体附着在 chantransia 上生长,推测这种生存模式可能影响基因表达,但具体机制还有待进一步研究。
总的来说,这项研究为淡水红藻的研究领域打开了新的大门,让我们对淡水红藻的生活史有了更深入的理解,为后续研究提供了重要的数据和理论依据,也为珍稀濒危淡水红藻的保护提供了关键的支持。