《Cell Death and Differentiation》染色体 3p 缺失与 8q 增益驱动脉络膜黑色素瘤血管生成拟态机制及联合治疗新策略

为探究脉络膜黑色素瘤（UM）中血管生成拟态（VM）形成机制及治疗策略，研究人员开展研究，发现关键因素并提出联合治疗方案，为 UM 治疗提供新思路。

　　

脉络膜黑色素瘤研究新突破：揭示 VM 形成机制与联合治疗方案

在人体的眼睛中，脉络膜黑色素瘤（Uveal melanoma，UM）这个 “潜伏的杀手” 正威胁着人们的健康。UM 是成年人中最常见的原发性眼内恶性肿瘤，虽然它在全球的发病率存在地区差异，在北欧、西欧和大洋洲发病率相对较高，而在南美、亚洲和非洲较低，但一旦发病，后果严重。大约 50% 的 UM 患者会出现转移，即便原发性肿瘤得到成功治疗，仍有 40% 的患者会因转移性疾病死亡，且其转移几乎都发生在肝脏，这种独特的转移模式让它成为研究肿瘤转移机制和治疗方法的特殊模型。

在肿瘤的发展过程中，血管生成起着至关重要的作用。对于 UM 来说，由于眼部组织的特殊性，其转移依赖的是血管生成而非淋巴管生成。其中，血管生成拟态（Vasculogenic Mimicry，VM）现象更是让 UM 的治疗雪上加霜。VM 是指高侵袭性的肿瘤细胞能够独立形成类似血管的网络，为肿瘤提供血液供应，不仅促进肿瘤生长，还增加了肿瘤转移的风险。这一现象最早在 UM 细胞中被发现，然而，其在 UM 中的形成机制却一直是个未解之谜，而且针对 UM 患者的有效治疗方案也十分有限。

为了攻克这些难题，相关研究人员展开了深入研究。他们发现，染色体 3p 缺失和 8q 增益在 UM 患者中较为常见，且与患者的不良预后密切相关。基于此，研究人员猜测这些染色体异常可能在 VM 形成中发挥重要作用。于是，一场旨在揭示 UM 中 VM 形成机制以及探索有效治疗策略的研究拉开了帷幕。

研究人员通过一系列实验，取得了令人瞩目的成果。相关研究结论发表在《Cell Death and Differentiation》期刊上。这些成果为 UM 的治疗带来了新的希望，为后续的临床研究和治疗方案的制定提供了重要的理论依据。

在研究过程中，研究人员运用了多种技术方法。他们利用 cBioPortal 数据库对 79 例 UM 患者进行分析，研究染色体 3p 缺失和 8q 增益对患者生存和疾病进展的影响；通过 CytoScan 750K 实验检测 MUM 2B 和 MUM 2C 细胞系的染色体异常情况；运用 Western blotting 实验检测细胞中蛋白质的表达水平；采用 RNA 干扰技术（RNAi）沉默相关基因，观察对 VM 形成的影响；还进行了免疫沉淀（IP）实验研究蛋白质之间的相互作用；构建裸鼠异种移植模型评估药物治疗效果。

下面让我们详细了解一下研究的具体结果：

• 染色体 3 缺失和 8 增益对 UM 患者预后的关键作用：研究人员借助 cBioPortal 数据库对 79 例 UM 患者展开分析，发现存在染色体 3 缺失和 8 增益的患者生存率显著降低，疾病进展更为迅速。进一步研究发现，这些患者中 VHL 基因（位于染色体 3p25.3）表达降低，PTK2（FAK，位于染色体 8q24.3）表达增加，同时 HIF-1α 和 EPAS1（HIF-2α）水平升高，导致经典内皮标记物和 VM 标记物 VE - 钙黏蛋白表达增加。此外，这些患者还表现出缺氧相关基因、EMT 和 VM 标记物的表达变化，以及 FAK 活性标记基因的过表达。这表明染色体 3 缺失和 8 增益会导致 VM 的产生，严重影响患者预后。

• 血管生成拟态的起源：VM 首次在 UM 细胞中被描述，研究人员对其起源进行了深入探究。他们发现 BAP1 基因（位于染色体 3p21.1）在 UM 患者中存在较高频率的突变，且与患者生存率降低相关。通过对 MUM 2B 和 MUM 2C 细胞系的研究发现，MUM 2B 细胞系具有与部分 UM 患者相似的染色体异常，即染色体 3 缺失和 8 增益，能够形成 VM，而 MUM 2C 细胞系则不具备这种能力。进一步研究表明，BAP1、pVHL 和 HIF-2α 之间存在相互作用，在 MUM 2B 细胞系中，由于 VHL/BAP1 表达缺失，导致 HIF-2α 表达增加，进而维持了 VE - 钙黏蛋白的表达，促进 VM 形成；而在 MUM 2C 细胞系中，BAP1 和 VHL 水平较高，抑制了 HIF-2α 表达，使得 VE - 钙黏蛋白表达缺失，无法形成 VM。

• VHL/PHD2 缺失促进血管生成拟态：研究人员在 MUM 2B 细胞系中沉默 VHL 基因，发现会增加 FAK 在 Y397 位点的磷酸化，进而增加 VE - 钙黏蛋白在 Y658 位点的磷酸化，促进 VM 形成。沉默 PHD2 基因也能得到类似结果。在 MUM 2C 细胞系中，沉默 VHL 基因或给予 VHL 抑制剂处理后，细胞会尝试形成 VM，且相关蛋白表达发生变化，类似于 MUM 2B 细胞系。此外，研究还发现，在缺氧条件下，两种细胞系均会增强 VM 形成，且只有沉默 HIF-2α 能够减少 VM 形成。同时，研究人员发现 GNAQ 或 GNA11 的原发性突变与 VM 形成无直接关联，而基于染色体异常或 BAP1 突变对 UM 患者进行分类更具临床意义。研究人员还在 Ewing 肉瘤细胞系中探索了相关染色体异常与 VM 的关系，发现 SKNMC 细胞系具有相关染色体异常且能形成 VM，而 TC-71 细胞系高表达 HIF-2α 且形成更多 VM。

• VE - 钙黏蛋白 / ENG 以 FAK 依赖的方式形成复合物：研究人员通过免疫沉淀实验发现，在能够形成 VM 的 MUM 2B 细胞系中，VE - 钙黏蛋白与 endoglin（ENG）以及 TGFB1 受体结合。抑制 FAK 后，VE - 钙黏蛋白与 ENG 的结合被阻断，且 ENG 与 VE - 钙黏蛋白的结合部分依赖于 FAK 对 VE - 钙黏蛋白的磷酸化。沉默 ENG 基因后，MUM 2B 细胞系的 VM 形成显著减少。这表明 VE - 钙黏蛋白 / ENG 复合物在 VM 形成中起重要作用，且其形成依赖于 FAK。

• Belzutifan 联合 FAKi 治疗转移性 UM 患者的潜力：鉴于 Belzutifan 在治疗 VHL 相关 ccRCCs 中的效果，以及 UM 患者中染色体异常与相关基因的关系，研究人员进行了 Belzutifan 联合 FAK 抑制剂（FAKi）的实验。结果显示，两种抑制剂联合使用能够降低 FAK Y397 和 VE - 钙黏蛋白 Y658 的表达，抑制 VM 形成。在裸鼠异种移植实验中，Belzutifan 联合 PF-271 能够减少 MUM 2B 细胞系的肿瘤生长和 VM 区域，而 VHL 抑制剂则会增加 MUM 2C 细胞系的肿瘤生长和 VM 区域。这表明 Belzutifan 联合 FAKi 有望成为治疗转移性 UM 患者的有效方案。

在研究结论和讨论部分，研究人员指出，VHL 在 UM 患者的 VM 形成中起着关键作用。具有染色体 3p 缺失（涉及 VHL 和 BAP1）和 8q 增益（PTK2，即 FAK）的 UM 患者预后最差，建议对这些患者进行个体化研究和监测，并考虑给予 Belzutifan 联合 FAKi 的预防性治疗。此外，研究结果还为其他与 VHL 综合征相关肿瘤的研究提供了参考，尽管目前在 Ewing 肉瘤等肿瘤中的研究还需更多患者数据支持，但该研究为后续相关研究奠定了基础，强调了对 VHL 和 BAP1 基因缺失与 FAK 扩增进行功能研究的重要性。

这项研究成果为脉络膜黑色素瘤的治疗开辟了新的方向，为临床医生制定更有效的治疗方案提供了有力的理论支持，有望改善 UM 患者的预后，让更多患者受益。未来，期待基于这些研究成果开展更多的临床研究，将新的治疗方案早日应用于临床实践。