揭秘 CHD1L 与 PLK1 的 “神秘纽带”：为卵巢癌治疗带来新曙光

为解决卵巢癌（OC）治疗难题，山东省妇幼保健院的研究人员开展 CHD1L 对 OC 细胞影响的研究。结果发现干扰 CHD1L 可抑制 OC 细胞恶性进展、增强顺铂敏感性。该研究为 OC 治疗提供新思路，推荐科研读者阅读。

　　

在女性健康的领域中，卵巢癌（OC）就像一个隐匿的 “杀手”，它的发病率在女性生殖系统恶性肿瘤里排第三，可死亡率却在妇科恶性肿瘤中独占鳌头。2020 年，全球有 313,959 例新发病例，中国就有 55,342 例，占比 17.62% ，它导致的死亡人数达到 207,252 人，占女性癌症相关死亡的 4.7%。因为卵巢癌发病隐匿，多数患者确诊时已处于晚期，而且晚期肿瘤很容易对化疗药物产生耐药性，比如顺铂。所以，找到克服化疗耐药的方法，对提高卵巢癌患者的生存率至关重要。

在探索卵巢癌的奥秘过程中，有一种基因引起了科学家们的注意，它就是 Chromodomain helicase/ATPase DNA-binding protein 1-like gene（CHD1L）。这是个新发现的癌基因，在很多实体肿瘤的进展中都扮演着重要角色，比如肝癌、乳腺癌等。在卵巢癌方面，虽然已经知道 CHD1L 和卵巢癌转移有关，而且在卵巢癌组织中表达增加，但它对卵巢癌细胞的增殖、凋亡、细胞周期有什么影响，能不能增强化疗敏感性，这些问题还是未知数。同时，通过一些数据库预测发现，CHD1L 可能和 polo-like Kinase 1（PLK1）结合，PLK1 也和肿瘤的发生发展密切相关，可它们之间到底有怎样的 “故事” 呢？为了弄清楚这些问题，山东省妇幼保健院的研究人员展开了深入研究，并在《Journal of Ovarian Research》期刊上发表了题为 “Interference with CHD1L inhibits the malignant progression and enhances cisplatin sensitivity of ovarian cancer cells by binding PLK1” 的论文。研究发现，干扰 CHD1L 可以抑制卵巢癌细胞的恶性进展，还能增强它们对顺铂的敏感性，这一成果为卵巢癌的治疗带来了新的希望。

为了开展这项研究，研究人员用到了几种关键技术方法。他们借助生物信息学分析，利用数据库对比了卵巢癌组织和正常卵巢组织中 CHD1L 和 PLK1 的表达情况，并预测它们之间的结合可能性。实验中还使用了细胞实验技术，包括细胞培养、转染，通过 CCK8、EDU、TUNEL 等实验检测细胞增殖、凋亡情况，用流式细胞术分析细胞周期，还有划痕实验和 Transwell 实验评估细胞迁移和侵袭能力。另外，免疫共沉淀实验验证了 CHD1L 和 PLK1 的结合，构建裸鼠移植瘤模型探究 CHD1L 在体内的抗肿瘤作用，免疫组化分析则用于检测肿瘤组织中的相关蛋白表达。

下面来看看研究都有哪些重要发现。

1. CHD1L 在 OC 组织和细胞系中表达增加：研究人员利用 TNMPLOT 数据库分析发现，卵巢癌组织中的 CHD1L 表达明显比正常卵巢组织高。之后又通过 RT-qPCR 和 Western blot 检测了几种卵巢癌细胞系，结果显示这些细胞系里 CHD1L 的表达都比正常卵巢上皮细胞高，其中 CAOV-3 细胞中 CHD1L 的表达最高，所以后续实验就选择了 CAOV-3 细胞。这就像是在一群细胞里，发现了 CAOV-3 细胞中 CHD1L 这个 “活跃分子”，为后续研究指明了方向。
2. 干扰 CHD1L 抑制 OC 细胞增殖、促进凋亡并诱导周期阻滞：研究人员把干扰 CHD1L 的 siRNA 转染到 CAOV-3 细胞中，发现细胞增殖能力明显下降，CCK8 实验和 EDU 染色都证明了这一点。同时，细胞凋亡增加，TUNEL 实验和相关蛋白检测都显示，促凋亡蛋白增加，抗凋亡蛋白减少。流式细胞术检测细胞周期发现，细胞在 G0/G1 期的数量减少，G2/M 期的数量增加，相关周期蛋白表达也发生了变化。这表明干扰 CHD1L 就像给癌细胞的生长按下了 “减速键”，还打开了它们的 “死亡开关”。
3. 干扰 CHD1L 抑制 OC 细胞的迁移和侵袭：用划痕实验和 Transwell 实验检测发现，干扰 CHD1L 后，CAOV-3 细胞的迁移率和侵袭细胞数量都显著下降，而且相关蛋白 MMP2 和 MMP9 的表达也降低了。这说明干扰 CHD1L 能够削弱癌细胞 “搬家” 和 “入侵” 其他组织的能力，让它们不再那么 “嚣张”。
4. 干扰 CHD1L 促进 OC 细胞对顺铂的敏感性：研究人员用不同浓度的顺铂处理卵巢癌细胞系，发现 CAOV-3 细胞对顺铂比较敏感。接着，干扰 CHD1L 后再用顺铂处理，结果显示细胞活力下降更明显，凋亡增加。这意味着干扰 CHD1L 可以帮助卵巢癌细胞重新 “找回” 对顺铂的敏感性，提高化疗效果。
5. 干扰 CHD1L 抑制 OC 细胞中 PLK1 的表达：通过数据库预测和实验验证，研究人员发现 CHD1L 可以和 PLK1 结合，而且卵巢癌组织和细胞系中 PLK1 的表达都升高了。干扰 CHD1L 后，PLK1 的表达也受到了抑制，免疫共沉淀实验进一步证实了它们之间的结合关系。这表明 CHD1L 和 PLK1 之间存在着紧密的 “联系”，就像一对相互影响的 “伙伴”。
6. 干扰 CHD1L 通过结合 PLK1 抑制 OC 细胞的增殖、促进凋亡、诱导周期阻滞并抑制迁移和侵袭：研究人员构建了 PLK1 过表达质粒并转染到 CAOV-3 细胞中，进行一系列实验后发现，过表达 PLK1 可以逆转干扰 CHD1L 对细胞增殖、凋亡、周期、迁移和侵袭的影响。这说明 CHD1L 对卵巢癌细胞的这些作用，很大程度上是通过和 PLK1 结合来实现的。
7. 干扰 CHD1L 通过结合 PLK1 促进 OC 细胞对顺铂的敏感性：CCK8 实验和 TUNEL 实验结果显示，过表达 PLK1 可以削弱干扰 CHD1L 对顺铂敏感性的促进作用。这进一步证明了干扰 CHD1L 促进卵巢癌细胞对顺铂的敏感性，是通过和 PLK1 的相互作用来完成的。
8. CHD1L 敲低通过下调 PLK1 表达抑制裸鼠皮下 CAOV-3 肿瘤的发展：研究人员构建了裸鼠移植瘤模型，发现敲低 CHD1L 后，肿瘤体积明显减小，CHD1L 和 PLK1 的表达都下降了，而且肿瘤组织中增殖相关蛋白 Ki67 表达减少，凋亡相关蛋白 cleaved caspase3 表达增加。这表明在动物体内，CHD1L 敲低也能通过下调 PLK1 来抑制肿瘤生长。

综合这些研究结果，研究人员得出结论：干扰 CHD1L 可以通过下调 PLK1 的表达，抑制卵巢癌细胞的增殖，促进凋亡，诱导 G2/M 期阻滞，抑制迁移和侵袭，还能增强癌细胞对顺铂的敏感性。这一研究成果意义重大，它让我们对 CHD1L 在卵巢癌中的作用有了更深入的了解，为将 CHD1L 作为卵巢癌潜在治疗靶点提供了理论依据，说不定未来就能基于这个发现开发出更有效的治疗卵巢癌的方法，给众多卵巢癌患者带来新的生机和希望，让这个隐匿的 “杀手” 不再那么可怕。