(接上一页)的T淋巴细胞也被认为BCC经历细胞凋亡(19)。细胞毒性T淋巴细胞与瘤性急层细胞间的竞争又可能决定疾病最终结果。

 

图6 退化基层细胞癌中细胞凋亡的检测 
    在自发性退化基层细胞癌病人的切片中,DeadEnd™比色细胞凋亡探测系统标记病灶周围基底层细胞层的细胞(A)。病灶外基层细胞未见标记(B)。临近病灶的淋巴细胞也被强标记(C)。基层细胞层相对于其他组织更易出现强背景。

 

图7 双重标记显示超细胞慢性阶段多发行硬化病灶中特殊的脱髓鞘区域的凋亡细胞核。  
    利用DeadEndT™比色法细胞凋亡检测系统(镍加强,黑色)使核碎片可见,而髓磷脂部分与少突神经胶质细胞被脱髓鞘少突神经胶质细胞糖蛋白(MOG)抗体标记显红色。凋亡细胞是MOG阴性, 因此, 不是少突神经胶质细胞。冷冻切片被苏木精负染成蓝色。

 

多发性硬化
    目前,一种在多发性硬化(Multiple Sclerosis, MS)脱髓鞘斑中潜在消除少突神经胶质细胞与髓鞘质的机制正成为研究热点。这种疾病中,脱髓鞘区域的细胞凋亡似乎扮演重要角色。浸润细胞与小胶质细胞在MS经历凋亡。但是少突神经胶质细胞的细胞死亡通路并未完全研究清楚(20-24)。为搞清MS及其他疾病中经历DNA片断化细胞类型,比色TUNEL技术可以被容易地与抗体染色相联系使用。Promega公司的DeadEnd™比色细胞凋亡探测系统用来估计超细胞慢性阶段MS病灶(图7)

 

脱髓鞘区域的细胞凋亡。DeadEndTM系统用于标记凋亡细胞核(黑色),利用抗体与脱髓鞘少突神经胶质细胞糖蛋白(MOG)双标记用来识别少突神经胶质细胞(红色)。图7中凋亡细胞为MOG阴性,因此不是少突神经胶质细胞。

小结
    我们展示了细胞及动物模型的细胞凋亡中DeadEndTM比色法细胞凋亡检测系统(TUNEL)检测DNA片段化,同时允许对细胞或组织进行形态分析。不仅如此,DeadEndTM比色法细胞凋亡检测系统还被证明在估计患病组织中细胞死亡有极为重要的作用。对某些细胞凋亡通路中特殊类型的细胞或分子,此系统亦可与作为标识物的抗体染色方法结合使用。

参考文献
1. Arends, M. J. et al. (1990) Amer. J. Path. 136,593.
2. Gavrieli, Y. et al. (1992) J. Cell. Biol. 119, 493.
3. Enari, M. et al. (1998) Nature 391,43.
4. DeadEndTM Colorimetirc Apoptosis Detection System, Technical Bulletin #TB199, Promega Corporation
5. Itoh, N. et al. (1991) Cell 66, 233.
6. Nagata, S. and Golstein, P. (1995) Science 267,1449.
7. Schulze-Osthoff, K. et al. (1994) J.Cell Biol. 127,15.
8. Frazer, A. and Evan, G. (1996) Cell 85,781.
9. CellTiter96(r) AQueous One Solution Cell Proliferation Assay, Technical Bulletin #TB245, Promega Corporation.
10. CytoTox96(r) Non-Radioactive Cytotoxicity Assay Technical Bulletin, #TB163, Promega Corporation.
11. Niravec, R. and Riss, T. (1998) Promega Note 68, 13.
12. Agarwala, S. and Kalil, R. (1998) J. Comp. Neurol. 392, 252.
13. Agarwala, S. and Kalil, R. (1998) J. Comp. Neurol. 392, 264.
14. Yoo, Y. H. et al. (1997) Arch. Dermatol. Res. 289, 389.
15. Langley, R. G. B. et al. (1996) J. Amer. Acad. Dermatol. 35, 187.
16. Crowson, A. N. et al. (1996) Human Pathol. 27,355.
17. Verhaegh, M. E. et al. (1995) Brit. J. Dermatol. 132,740.
18. Buechner, S. A. et al. (1997) J. Clin. Invest. 100,2691.
19. Gutierrez-Steil, C. et al. (1998) J. Clin. Invest. 101, 33.
20. Bonetti, B. and Raine, C. S. (1997) Ann. Neurol. 42, 74. 
21. Bonetti, B. et al. (1997) J. Immunol. 159, 5733.
22. Ladiwala, U. et al. (1998) J. Neurosci. 18, 1297.
23. Menard, A. et al. (1998) J. Neurol. Sci.154, 209.
24. Hishari, S. et al. (1997) J. Neurochem. 69, 10.

 

<上一页>    <下一页>


 普洛麦格中文通讯  目  录

专题文章

DeadEnd™比色法细胞凋亡检测系统在病理学中的应用   4

细胞凋亡和活力测定图示   8

Apo-ONE™均质Caspase-3/7检测:快速的细胞凋亡检测用于高通量筛选  10

新产品 

Dual-Glo™荧光素酶测试系统   12

Select96™感受态细胞   12
pCMVTNT™载体   13
pTNT™载体   13
Wizard®SVSV96基因组DNA纯化系统   14
用机器人纯化核酸 15
RNA分析产品促销 16
内容编辑:美国普洛麦格公司北京办事处

网页设计:生物通科技有限公司 www.ebiotrade.com