PCR技术现在已成为现代分子生物学实验工作的基础技术和有效工具，在医学、农业、检验检疫等领域中使用十分广泛。其核心设备－PCR仪经过不断改进，已经越来越完善和智能化，分类也更加细化，但厂家一般自行命名型号，技术指标的参数也不统一，给用户的选择带来了困惑和麻烦。下面将列出选购时的一些常用指标，希望有助于大家了解 PCR仪的选购技巧。

1. PCR仪的温度控制特性
　　对普通PCR仪来说，温度控制指标主要是指温度的准确性和均匀性以及升降温速度，对梯度PCR仪来说，除了温度的准确性和均匀性、升降温速度以外，还必须考虑仪器在梯度模式和标准模式下是否具有同样的温度特性。

　　温度的准确性是指样品孔温度与设定温度的一致性，它直接关系到实验的成败。可以设想一下，假定设定的变性温度为94°C，如果样品孔的实际温度只有93°C或更低，那么模板的变性就可能不充分；如果样品孔的实际温度达到95°C或更高，那么聚合酶的活性可能在实验进行的过程中就已经灭活了。这样都极有可能无法得到满意的实验结果。Eppendorf PCR 仪的温控准确度为±0.2°C，在同类产品中处于领先地位。

　　温度的均匀性是指样品孔间的温度差异，在梯度模式下则是指不同梯度管排间的温度均匀性，它关系到在不同样品孔进行反应结果的一致性。很多使用过早期PCR产品的研究者都习惯于将样品管置于仪器中间的样品孔而不用外围的样品孔。这是因为早期产品的温度均匀性不好，特别是最外周的样品孔情况更差，这样不但可能影响实验结果，而且降低了仪器的使用效率。Eppendorf PCR 仪的温度均匀性参数为£±0.5，完全可以满足使用者的需求。

　　在Eppendorf公司的技术资料上可以看到，梯度PCR仪采用了TCT（三组回路）技术，这样不同于很多其他品牌的两组回路技术，在进行梯度PCR反应时，增加了一个加热和冷却的控制区域，保证了梯度温度控制的精确性并使不同梯度管排间的温度均匀性更好。

　　升降温速度也是考核PCR仪的一个重要指标。更快的升降温速度，不但可以缩短反应进行的时间，而且缩短了可能的非特异性结合、反应的时间，能提高PCR反应的特异性。

Eppendorf Mastercycler梯度PCR仪

Eppendorf公司SteadySlope技 术示意图	MJ公司等梯度技术示意图

　　Eppendorf公司的PCR仪现在可以分为两个大类：Mastercycler系列和Mastercycler ep系列。前者的升降温速度分别为3°C/秒和2°C /秒。后一个系列具有更快的速度，其中银质模块的升降温速度可达到6°C/秒和4.5°C /秒，是目前同类产品中升降温速度最快的；铝质模块的升降温速度也可以达到4°C/秒和3°C /秒。使用者可以根据实验需要和经济情况灵活选择。

　　另外，作为第一个拥有梯度PCR技术专利的公司，Eppendorf公司拥有专利的SteadySlope技术，即以同样的温度变化速率到达所有设定的梯度温度，所以在梯度模式下具有恒定的温度特性。这一技术保证了在梯度模式和普通模式之间可以进行可靠的信息传递，不会因为温度特性不同而导致产量和特异性的变化。Biometra等公司购买了Eppendorf公司的专利，也采用同样的梯度技术。而另一些同类产品如MJ公司的梯度PCR仪由于专利问题，无法使用SteadySlope技术，他们的方法则是在梯度模式下采用不同的降温速率，每个梯度温度之间的温度曲线不同。这样从梯度模式向普通模式进行转换时可能会出现问题。ABI公司则从未开发出梯度PCR仪产品。