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影响疏水层析HIC 的因素2
在选择HIC 介质和优化其层析条件时要考虑的主要参数包括:

● 基架的性质、颗粒大小(如琼脂糖、合成高分子聚体
  等;平均颗粒90 µm,34 µm,15 µm 等)
● 配基的结构(如苯基、丁基、辛基等)
● 配基的密度(如高取代、低取代)
● 目标蛋白和其他样品组分的特性
● 盐的类型(常用的如硫酸氨、氯化钠)
● 盐的浓度(盐浓度越高,吸附越强;但高浓度硫酸氨
 容易引起蛋白沉淀,降低回收率)
● 温度(很重要,温度越低,吸附越弱)
● pH (在pH 5-8的中性范围内,pH 相对影响较低)

 

定货资料

产  品
包装大小
货号
Butyl-S Sepharose 6 Fast Flow 25ml 17-0978-10
Butyl-S Sepharose 6 Fast Flow 200ml 17-0978-02
Butyl-S Sepharose 6 Fast Flow 1 L 17-0978-03
Butyl-S Sepharose 6 Fast Flow 5 L 17-0978-04

文献
1. Purification of recombinant hepatitis B surface
 antigen produced by transformed Chinese hamster
 ovary (CHO) cell line grown in culture. ioseparation
 1 (1991) 397-408, Belew, M., Mei, Y., Li, B., Bergl?
 f, J., Janson, J-C.
2. 疏水作用层析手册,原理和方法18-1020-90。

 
Capto Q 高容量,高流速,低反压
离子交换层析纯化介质——生物制药下游纯化新标准


Capto™ 是一种新的阴离子交换介质平台,而Capto™ Q 是此平台推出的第一种强阴离子交换介质,是一种快速、高效的生物制药用BioProcess™ 介质。Capto™ Q 将高载量、高流速和低反压结合在一起,同时减少处理时间及增加生产率,在捕获目的蛋白的纯化过程中,可以大大提高速度及效率。Capto™ 的生产力比目前市面上最常用的Sepharose FF离子交换介质高达数倍,无疑会为生物制药下游生产制定新的标准。介质特性包括:

● 高流速下高动态结合能力,提高生产率——流速是以
 往Sepharose FF同类介质的2-3 倍;
● 动态结合载量>100 mg BSA/ml 介质,提高产量,减
 少处理时间;
● 由于反压低(流速至少700 cm/h时,压力< 3 bar),可
 选内径较小的层析柱,装填较高的柱床,减少层析柱
 成本。

目前,基因工程药物主要市场已渐渐从mg级的细胞因子类药物,转向数十至百mg级的抗体药物、各种溶栓药物、胰岛素等。国外不少基因工程药物的生产规模已达上数千至万升发酵罐。如此规模下,CHO 细胞表达量仍可达1-2 g/L;上百升发酵罐表达量可达5 g/L;酵母细胞表达量更达10 g/L。大量高表达量的上游产品给下游纯化带来巨大挑战。许多药物的生产成本已经超过市场及管理成本,成为企业主要的成本压力。企业为了增加产量若采取建新厂或扩厂的方式,是昂贵而高风险的。另一可行出路是改善生产过程或最适化(process optimization) ,以新技术提高产率、降低成本、缩短批

 

次时间,这种方式风险也远低于建新厂。Capto™新的离子交换介质平台,以高刚性,化学改性的琼脂糖为基质,为生产者们提供了急需的处理量更快、生产力更高的下游纯化介质,对于提高生产效益、促进生物制药行业的发展将具有重要意义。表1 总结了Capto™ Q 的基本特性。

Capto™ Q 的特性

基质 具有葡聚糖表面增充剂的高交联琼脂糖
离子交换类型 强阴离子,Q
荷电基团 -N+ (CH3)3
总离子交换能力 0.16-0.22 mmol Cl-/ml介质
颗粒大小* 90 mm (d50V)
流速 柱的直径达到1 m,床高达20 cm,在20℃,使用与水的粘度相似的缓冲液,压力< 3 bar
(0.3 MPa) 时,流速至少700 cm/h
动态结合能力 > 100 mg BSA/ml介质
pH 稳定性  
短期 2-14
工作期间 2-12
长期 2-12
工作温度 +4 - +30 ℃
化学稳定性 所有常用的水溶液缓冲液,1 M醋酸,1 M
NaOH,8 M尿素,6 M盐酸胍,和70%乙醇
 
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