Amersham色谱园第15期

新产品介绍—— MabSelect Family
新的单抗纯化凝胶大力推进单克隆抗体的研究与开发

通用电气医疗集团(GE Healthcare) 为满足工业用户对单克隆抗体纯化(MAbs) 日益增长的需求而于2004 年底推出了两种新的单抗纯化产品——MabSelect Xtra™和MabSelect SuRe™，这两种产品与2002 年推出的MabSelect 形成了完整的MabSelect家族，这三种层析介质可以使工业规模单克隆抗体生产用户在最短时间和最低成本条件下生产纯度最高的单抗产品。

单克隆抗体正在彻底改变着许多疾病的治疗效果，并且已经成为现代医学的重要基础。单克隆抗体是具有特殊专一性的抗体，能够识别和结合到专一的抗原上，是免疫系统的重要组成部分。迄今，单克隆抗体已被大规模用于体内外诊断和治疗。

MabSelect的蛋白A配体经基因工程改造，C端含一个半胱氨酸，形成一个定向的硫键(见图11)，同时增加了对IgG 的有效结合。蛋白A和凝胶交联时采用了全新的工艺流程，增加了介质的稳定性和胶内孔的表面积，因此增

加了流速和动态载量：在线形流速为500 cm/hr 和柱床高度为20 cm 的条件下，每毫升MabSelect 的动态载量可以达到30多毫克IgG, 超过原来A蛋白介质数倍，在纯化特性方面也明显优于早期蛋白A 偶联的介质。

MabSelect Xtra (eXtra capacity) 是一种新的基于重组蛋白－A的层析介质，它捕获抗体效率高且经济实惠。其改造后的动态结合能力比市面上其它的基于蛋白A 的层析介质要高出30%。尤其是在纯化高表达液中的抗体时，这种更高的结合能力直接转化为更低的生产成本。

MabSelect SuRe (Superior Resistance) 是一种以新型碱稳定蛋白A衍生配体为基础的层析介质, 被改造成在高浓度的碱在位清洗(CIP) 条件下, 比常规基于蛋白A 的层析介质有更高的稳定性。MabSelect SuRe 用氢氧化钠在位清洗能有效降低清洗成本，并保证每批产品都能合格。这种介质非常适用于常规生产或临床生产与工艺开发。

MabSelect 家族应用选择：

	MabSelect	MabSelect SuRe	MabSelect Xtra
动态结合载量	约30 mg hIgG/ml 胶¹	约30 mg hIgG/ml 胶¹	约41 mg hIgG/ml 胶²
推荐流速³	100-500 cm/hr	100-500 cm/hr	100-300 cm/hr
推荐在位清洗试剂	50-100 mM NaOH + 1.0 M NaCl 6 M GuCl, 4-8 M Urea	0.1-0.5 M NaOH	50-100 mM NaOH + 1.0 M NaC l6 M GuCl, 4-8 M Urea
蛋白A 配体	重组蛋白A	碱耐受的蛋白A 突变体	重组蛋白A
凝胶颗粒大小⁴	d_50v 约85 µm	d_50v约85 µm	d_50v 约75 µm

1、测定条件：在线性流速500 cm/hr,柱高20 cm，10% 穿透；
2、测定条件：在线性流速250 cm/hr,柱高10 cm，10% 穿透条(滞留时间2.4 mins);
3、操作条件：BPG300 层析柱，柱高20 cm，操作压力小于2 bar，25℃；
4、d_50v 指凝胶直径平均分布。

Butyl-S Sepharose 6 Fast Flow ——适合纯化CHO 细胞
表达的重组蛋白的新疏水层析(HIC) 介质

Butyl-S Sepharose™ 6 Fast Flow 是GE Healthcare 新推出的疏水层析(HIC) 介质。它是GE Healthcare 生产的众多疏水介质(HIC) 中疏水性最弱的。在分离过程的最初阶段去除大量杂质可提供特殊的选择性。它是一种BioProcess™ 介质，满足大规模生物制药业对成本-效率的要求，备有全免的管理支持文件(Regulatory Support File)。过往，在与生物制药厂的合作中，Butyl-S Sepharose 6 Fast Flow 曾被用于纯化CHO细胞表
达的重组蛋白。它的特点是：

● 用于从CHO细胞中重组的肝炎B病毒(Hepatitis B
　virus)表面抗原的纯化；有效去除培养基内的牛血清蛋
　白¹
● 用于从转基因植物细胞中纯化重组蛋白；有效去除植
　物色素
● 可在比较低的盐浓度下，选择性结合并洗脱较强的疏
　水分子，如单克隆抗体
● 相对强的疏水介质，令目标蛋白的变性风险更低
● 非特异吸附低作
● 批间的重复性好