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筛选，然后克隆siRNA靶序列
    双链RNA干扰（RNAi）已经成为在许多真核生物中选择性沉默基因表达的强有力的遗传学工具。在哺乳动物系统中将21-23碱基的转录本转化细胞，或者通过内源机制表达出21-23碱基的转录本，可观察到序列特异的RNAi效应。

    siLentGene^TM-2 U6 发夹克隆系统以特定的siRNA为基础，这一siRNA被表达成折返的茎-环结构并由相同的U6启动子转录。包含有U6启动子，发夹siRNA靶序列及终止序列的短DNA盒式结构可通过一次PCR扩增反应而得到。提供的DNA盒包有含U6启动子是用与U6启动子区域5’端互补的U6上游引物扩增的。该上游引物与和启动子3’端互补的下游引物一同用于PCR下游引物中也包含有发夹siRNA的靶序列。扩增的PCR产物可直接转入哺乳动物细胞中以快速筛选最佳靶序列或克隆到所提供的含有合适的抗生素选择标记的载体中用于长期实验。

系统优势
● 高效鉴定最佳靶序列：在克隆前，可以利用这个以盒式结构为基础的系统对多个siRNA靶序列进行筛选。
● 选择所需载体：可根据需要选择载体。
● 省时：载体B这些经过消化、脱磷酸化，免去了费时的载体制备过程。
● 简化的操作方法：只需一步扩增，而其它方法需要2-3步。
● 只需提供下游引物：除了psiLentGene^TM 载体，本系统还包括Hight Fidelity PCR Master Mix, U6盒DNA, 上游引物，T4 DNA连接酶及2X快速连接缓冲液。
● 更易鉴定所需克隆：使用蓝/白筛选结合EcoR V消化以快速鉴定阳性重组。