□ 更易检测
□ 比EGFP还要明亮
□ 毒性远低于EGFP
□ 配套提供检测用抗体
图1 Vitality hrGFP II的激发和发射光谱
图2 转染表达hrGFP和EGFP的HeLa细胞的生长活性比较 |
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绿色荧光蛋白(GFP)是目前分子生物学家和细胞生物学家用于目的蛋白示踪和定量的最有用的研究工具。不断开发出的新型GFP以更亮、更方便的特性,极大地推进了基因/蛋白发现及功能分析。Stratagene的升级版Vitality® hrGFP II绿色荧光蛋白以比EGFP更明亮、毒性更低,成为哺乳动物细胞相关研究的最佳选择。无论是哺乳动物细胞总的基因表达,转染效率检测,或目的蛋白定位,这种明亮的绿色荧光蛋白都能非常方便地用荧光显微镜或流式细胞计数法进行观察和检测。
更亮才更好
Vitality hrGFP II是第二代人源化Renilla reniformis 绿色荧光蛋白(hrGFP)。与EGFP相比,hrGFP II的激发和发射光谱要窄得多,因此更易被检测。已经证明,经过对原来的hrGFP进行随机突变筛选得到的Vitality hrGFP II在各种细胞中均比第一代hrGFP和EGFP更亮;而且,经改进的载体骨架也使hrGFP II载体更适合用于制备稳定细胞系。
毒性也要低
hrGFP的稳定性和毒性指标都明显比EGFP更佳,因此表达时间和细胞传代数均获得更好的效果(见图2),也更能帮助构建稳定细胞系。
方便检测GFP的工具
Stratagene提供3种Vitality hrGFP II哺乳动物表达载体,以及Vitality全长hrGFP单克隆抗体。用户可以根据需要选择相应的表达载体,或检测方法(包括荧光显微镜观察,FACS和Western blotting,免疫共沉淀,流式细胞法等。
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图3 用Vitality全长hrGFP多克隆抗体Western blot检测293T细胞裂解液中的多种hrGFP蛋白。hrGFP pAb抗体的稀释度为1:5000。
泳道1:293T细胞裂解液;2:hrGFP;3:hrGFP-Nuc;4:hrGFP-Mito;5:hrGFP II- BID融合;6:hrGFPII, 7:EGFP. |
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