当CRISPR遇上分子诊断, cas9、cas12、cas13、cas14蛋白

CRISPR-Cas诊断平台
CRISPR-Cas diagnostic platform

CRISPR-Cas系统广泛而成功的应用于基因编辑已有近20年，最近几年研究者发现其可用于分子诊断，可在不依赖于实验室和仪器的条件下，实现对多种病原体进行快速准确的检测。 CRISPR-Cas系统分子检测一般包括以下几个步骤：

Cas9: 靶向切割DNA
Cas9: Targets and cuts DNA

CRISPR Chip技术

       CRISPR Chip技术是将dCas9蛋白与石墨烯电子晶体管结合，dCas9识别目标DNA并将其连接到晶体管上，从而改变晶体管的导电性以产生信号。CRISPR Chip技术具有高灵敏度，可以在15分钟内检测低至1.7 fM的目标DNA。这种便携式、无扩增的方法被用于诊断杜氏肌萎缩症临床样本的外显子突变。

FLASH-NGS技术

       FLASH-NGS平台结合了Cas9和下一代测序(NGS)技术，用于精确识别病原体 。FLASH-NGS成功应用在耐药病原微生物检测中，主要检测金黄色葡萄球菌及恶性疟原虫耐药基因，并且在其他依赖多重PCR的领域同样具有应用价值。

Cas12：靶向切割DNA和附属切割ssDNA
Targets DNA with collateral cleavage of ssDNA

       在基于Cas12的检测系统中，目标DNA在等温条件下通过重组酶聚合酶扩增(RPA)或环介导等温扩增(LAMP)进行扩增，当Cas12检测并切割特定的目标DNA序列时，它也会特异性地切割连接荧光分子的ssDNA，产生荧光信号。该检测系统已经应用于HPV和SARS-CoV-2等病原体的特异性检测。

Cas13：靶向切割ssRNA和附属切割任意ssRNA
Targets ssRNA with collateral cleavage of ssRNA

       在基于Cas13的检测系统中，目标RNA在等温条件下通过重组酶聚合酶扩增(RPA)进行扩增，当Cas13检测并切割特定的目标RNA序列时，它也会特异性地切割连接荧光分子的ssRNA，产生荧光信号。该检测系统已经应用于寨卡病毒和登革病毒的特异性检测。

Cas14：靶向切割ssDNA和附属切割ssDNA
Targets ssDNA with collateral cleavage of ssDNA

       在基于Cas14的检测系统中，目标ssDNA经过扩增后，当Cas14检测并切割特定的目标ssDNA序列时，同时会特异性地切割连接荧光分子的ssDNA，产生荧光信号。该检测系统显示出更强的特异性，可以高保真检测DNA SNP，如控制人类眼睛颜色的变体HERC2。

美格生物与CRISPR-Cas蛋白
Magigen biotech and CRISPR-cas proteins

       美格生物作为分子原料酶开发与生产的原料供应商，拥有种类齐全、性能优越、纯蛋白体系的CRISPR-Cas蛋白产品，其中包括Cas9、Cas12、Cas13，欢迎广大客户咨询挑选， 与了解产品更多信息请预览 https://www.magigen.net/product/8/，或联系人韩女士，18027152056（微信同号）。