微量meRIP-seq,大幅降低样本要求量

最低只需500 ng总RNA,即可绘制RNA转录后甲基化修饰图谱

SLAM-seq RNA代谢测序,Ribo-seq翻译组测序

深入RNA修饰功能研究!

 meRIP-seq

同时检测mRNA、lncRNA及环状RNA的甲基化修饰谱,是表观转录组学研究的关键技术。

基本分析内容 高级分析内容
  1. Peak Calling 分析   7.2 reads 在基因元件的分布   RNA-seq表达差异与m6A修饰差异关联分析
  5、Peak 可视化   7.3 Peak 关联基因的特征    RNA可变剪切与m6A修饰差异关联分析
  6、Peak 统计分析   8、差异peak 分析   翻译组RIBO-seq翻译差异与m6A修饰差异关联分析
  7、m6A 的基本特征   9、差异peak关联基因GO,KEGG分析   
  7.1 peak 在基因元件的分布   10、 motif分析  
 SLAM-seq

揭示RNA半衰期与稳定性的变化,适用于转录后调控水平的研究

分析内容
  背景T>C SNP校正   mRNA或longRNA转录本水平Total reads计数与表达量化
  mRNA或longRNA*异表达分析   mRNA或longRNA稳定性分析
  靶基因GO、KEGG富集分析   mRNA或longRNA半衰期计算
  mRNA或longRNA转录本水平T>C counts计数与表达量化   longRNA包括mRNA和lncRNA,客户可选择mRNA分析或longRNA全套分析。
 Ribo-seq

从基因组水平检测蛋白质的翻译状况,了解蛋白质翻译速度情况

Ribo-seq组基本分析 对照longRNA-seq分析
  1、全基因组翻译活性分析   7、ORF(开放阅读框)位置预测   1、数据质控
  2、基因翻译效率计算   8、新蛋白/新短肽鉴定   2、基因比对与统计
  3、差异翻译效率基因分析   9、lncRNA的编码能力预测   3、mRNA差异表达分析
  4、差异翻译效率基因分析GO分析   10、密码子使用频率及差异分析   4、lncRNA差异表达分析
  5、差异翻译效率基因KEGG分析   11、lncRNA/circRNA编码能力预测   5、差异基因GO分析
  6、起始密码子预测(包括非ATG起始)     6、差异基因KEGG分析
      7、circRNA差异表达分析

表观生物实测数据

RNA修饰研究路径图

案例

Cell Stem Cell: m6A阅读器YTHDF2下调可抑制白血病
meRIP联合SLAM-seq、Ribo-seq,深入RNA修饰调控机制
本研究发现m6A阅读蛋白YTHDF2在AML患者身上广泛过表达,在小鼠和人类AML发生和发展过程中起着关键的作用。

 


研究者敲除白血病前期细胞的YTHDF2,再进行meRIP-seq,发现敲除组中表达水平
显著上调的mRNA具有丰富的m6A修饰。

利用SLAM-seq检测mRNA的半衰期,证实m6A修饰使这些基因的 半衰期延长了。


利用RIBO-seq检测两个组的蛋白翻译效率

原文:Paris J, Morgan M, Campos J, et al. Targeting the RNA m6A Reader YTHDF2 Selectively Compromises Cancer Stem Cells in AcuteMyeloid Leuke-mia. Cell Stem Cell. 2019 Jul 3;25(1):137-148.e6.

meRIP-seq联合SLAM-seq、Ribo-seq,进一步研究基因功能与机制! 即日起至12月31日,三项技术组合优惠价,只需8折!

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