订购有礼 | 酵母杂交实验不知从何下手怎么办? |
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蛋白质是生命活动的主要承担者,是生物相关学科研究中重要的内容。蛋白质互作网络参与生物信号传递、基因表达调节、能量和物质代谢及细胞周期调控等生命过程的各个环节。酵母杂交作为研究蛋白质互作的经典方法,是众多研究学者的科研利器。
但是酵母杂交实验流程相对繁琐复杂,刚刚开展的时候容易遇到各种各样的问题,如果不知道该如何应对,可以选择Takara明星系统产品,一站式解决实验难题,为您的酵母双杂交实验保驾护航!
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·Matchmaker Gold Yeast Two-Hybrid System(Code No. 630489)
Matchmaker Gold产品线中一款经典且深受欢迎的系统类产品。可以用于蛋白质互作验证以及大规模的蛋白质文库相互作用筛选。
系统中包含全新的Y2H Gold酵母菌株、Y187菌株、高效转化系统以及高水平表达的载体。3个启动子(G1、M1、G2)调控4个报告基因(AUR1-C、 ADE2、HIS3和 MEL1),尤其是报告基因中新型的、稳定的抗生素AbA(Code No. 630466&630499)抗性基因,更是可以有效杀死非抗性克隆,大大降低了背景克隆生长,降低假阳性概率。
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·Make Your Own Mate & Plate Library System(Code No. 630490)
可以根据自己的实验对象进行蛋白质cDNA文库的自制,并用于后续文库筛选。该系统利用SMART cDNA合成技术,仅需使用任意组织100 ng总RNA,即可构建足够用于数百次酵母双杂交筛选实验所需要的cDNA文库。文库通过酵母高效同源重组的机制在Y187酵母菌株中直接构建完成,无需传统文库构建过程中的一些繁冗的操作 (比如文库克隆、扩增和大肠杆菌收集等),操作更简单,兼具个性化、灵活性以及高性价比。搭配Matchmaker Gold Yeast Two-Hybrid System(Code No. 630489)使用,“Mate”+“Plate”两步即可完成文库筛选!
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·Matchmaker Gold Yeast One-Hybrid Library Screening System(Code No. 630491)
简便高效的蛋白质-DNA相互作用检验系统。在Matchmaker Gold酵母单杂交系统中,目标/bait DNA序列重复串联后克隆到pAbAi报告载体上,用同源重组的方法将携带bait的pAbAi载体整合到Y1HGold酵母基因组中,用于后续文库的筛选,筛选过程直接、快速、简单!
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Takara多年来一直致力于酵母杂交解决方案研究,拥有从建库到筛选再到验证的完整解决方案和完善的实验流程。精挑细选的产品,具备巧妙的设计和卓越的品质,助力广大科研学者酵母杂交实验的成功!
多款酵母杂交产品低至4折促销!除了可以折扣购买,参与秋季促销满额赠礼,还有额外订购好礼。截止2024年11月30日,订购以下任一产品,即可参与好礼五选一!欢迎各位老师咨询Takara当地代理商进行订购! |
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● 好礼五选一 |
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*说明:礼品图片版权归各品牌厂商所有。图片仅供参考,请以实物为准。如因电商下架或库存不足,个别礼品将更换为同等价位的其他礼品。 |
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Aureobasidin A(Code No. 630499) |
可以有效杀死非抗性克隆,X-alpha-Gal(Code No. 630463)可直接响应阳性双杂交互作的酵母克隆表达α-半乳糖苷酶,在含有X-alpha-Gal的培养基上呈蓝色,从多途径降低背景克隆的生长,有效提高实验效率。 |
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Yeastmaker™ Yeast Transformation System 2(Code No. 630439)&Yeastmaker™ Carrier DNA(Code No. 630440) |
转化系统采用聚乙二醇(PEG)/醋酸锂方法高效制备并转化酵母感受态菌株。“YPD Plus”复苏培养基,使更多的克隆子得以存活,为转化过程提供了更加高效、可靠的方法。此外,优化的Yeastmaker Carrier DNA(鲑鱼精子DNA)更能有助于转化实验中质粒DNA的吸收。 |
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Easy Yeast Plasmid Isolation Kit(Code No. 630467) |
采用特殊的细胞裂解酶高效破碎酵母细胞壁,并用SDS/碱裂解法获得酵母原生质体。搭配Yeast Plasmid SPIN 纯化柱纯化质粒DNA,可用于转化大肠杆菌进行扩繁,或作为模板用于PCR分析。 |
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此外,Takara还提供适用于酵母双杂交系统、文库构建系统等的培养基及各类辅助试剂,满足多种实验需求。 |
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Takara秋日礼惠狂欢,更多好物欢迎各位老师查看订购 |
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■ 产品实验案例近期热点速览 |
文献一
《 XYLEM NAC DOMAIN 1 (EjXND1) relieves cold-induced lignification by negatively regulating the EjHB1-EjPRX12 module in loquat fruit.》
Journal:Journal of Advanced Research
IF:11.4
Pub Date : 2024-09-02
木质素是次生细胞壁的主要成分之一,在植物生长和抗逆过程中起到重要作用,但同时也会积聚在果肉中,对水果品质产生负面影响。枇杷对温度较为敏感,常因冷害表现出木质化。目前低温贮存、程序降温等手段已被应用于防止果实冷害。
文章旨在阐明枇杷低温木质化的调控机制。通过转录组分析筛选出目的基因,并通过基因瞬时过表达的方法分别在烟草、枇杷、地钱中进行基因功能分析。通过酵母双杂交系统(Takara 630489 Matchmaker Gold Yeast Two-Hybrid System)相互作用等方法完成了调控机制研究,确定木质部NAC结构域转录因子EjXND1为枇杷木质化的抑制因子,可以与木质素合成转录因子EjHB1特异性互作,弱化EjHB1的启动子。同时,在EjXND1的启动子中鉴定出两个高度甲基化的区域。这些区域表现出甲基化水平和表达量的负相关。此外,研究表明该区域的高度甲基化可以削弱转录因子与其启动子的结合力。EjXND1在改良的低温调节 (mLTC) 处理中发挥作用,通过靶向EjHB1减轻红肉枇杷果实中冷诱导的木质化,并受启动子中DNA甲基化水平的动态调节。 |
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文献二
《Deep mutational scanning quantifies DNA binding and predicts clinical outcomes of PAX6 variants.》
Journal:Mol Syst Biol.
IF:13.068
Pub Date : 2024-07-02
转录因子PAX6是控制眼部和大脑的重要基因。其无义突变和错义突变会导致眼部发育缺陷,例如无虹膜症、虹膜缺损、小眼球综合征等。为了更好地了解PAX6和DNA不同结合方式如何导致表型变化,研究将PAX6结合结构域通过饱和诱变和借助PAX6-GAL4融合抗生素耐性基因进行酵母单杂交筛选(Takara 630491 Matchmaker Gold Yeast One-Hybrid Library Screening System)相结合的方法,鉴定了超过2700个可以结合双DNA序列原件的氨基酸单点突变体。
许多变体引起序列特异性分子功能增益效应,例如某一位置的突变体,可以增加与LE9增强子的结合,同时减少与SELEX衍生结合位点的结合,在没有抗生素筛选的情况下,仍保留DNA结合的突变体可能会由于酵母转录组受到干扰的原因,导致酵母的生长遭到抑制。这一结果有助于根据临床评价标准对已知突变位点的患者进行评估和分类。实验结果表明:977个变异可能是致病的,1306个变异可能是无表型影响的,并且可以将Y1H确立为解释转录因子变异效应的常规检测方法。 |
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文献三
《Enhancing rice panicle branching and grain yield through tissue-specific brassinosteroid inhibition》
Journal:Science.
IF:44.701
Pub Date : 2024-03-08
油菜素甾醇是农业生产上广泛使用的一种植物生长调节剂,可以显著控制水稻的株高、叶夹角、籽粒大小等关键育种性状。研究发现基因BRD3(编码一种蛋白质,能够降解植物激素油菜素甾醇)可以特异地在二次枝梗分生组织激活表达,并使得该部位油菜素甾醇含量减少,并激活信号通路核心抑制子GSK2。随后通过使用酵母双杂交系统(Takara 630489 Matchmaker Gold Yeast Two-Hybrid System)验证到GSK2-OsMADS1的相互作用,发现GSK2可以介导转录因子OsMADS1磷酸化的发生,并促使OsMADS1更加稳定,使其直接结合RCN2(拟南芥TFL1的同源基因,调控水稻分生过程)并促进基因表达,延后二次枝梗分生组织向小花分生组织的转变,使得水稻具有更多的时间来进行分枝,从而促进二级分枝,增加穗粒数。 |
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