C-NKG
活动时间：2023年2月17日——3月5日
活动对象：全国科研终端客户
活动内容：扫码报名申请免费获得C-NKG小鼠
注：最终解释权归赛业生物所有。
简介
C-NKG小鼠是赛业生物在NOD-Scid背景品系上敲除Il2rg基因自主研发的一种重度免疫缺陷小鼠。C-NKG小鼠缺乏成熟的T、B、NK免疫细胞，补体活性降低，巨噬细胞对人源细胞吞噬作用弱，可高效地移植人造血干细胞（HSC）、外周血单核细胞（PBMC），患者来源的异种移植物（PDX）或成体干细胞和组织，是目前公认的免疫缺陷程度高且可用于肿瘤、免疫、自身免疫性疾病、免疫治疗疫苗、GvHD/移植、安全性评估等研究的优秀模型。
- 产品编号：C001316
- 品系名称：NOD-Prkdcscid Il2rgem1/Cyagen
- 基因型：纯合子
- 背景：NOD-Scid
品系特点
- 缺乏成熟的T、B和NK细胞。
- 补体活性降低。
- 巨噬细胞和树突状细胞功能异常。
- 随着年龄的增长，T和B细胞泄漏的发生率极低。
- 淋巴瘤的发生率极低，可用于长期和短期实验。
- 不发展糖尿病。
研究应用
- 与NOD-Scid小鼠相比，C-NKG小鼠的人体细胞和组织移植存活率显著提高，同时能够植入更高比例的正常或癌变人类细胞和组织。
- 可高效地移植人造血干细胞（HSC）、外周血单核细胞（PBMC），患者来源的异种移植物（PDX）或成体干细胞和组织。
- 可用于肿瘤、免疫、自身免疫性疾病、免疫治疗疫苗、GvHD /移植、安全性评估等研究。
模型验证
图1. Prkdcscid突变是由Prkdc基因84号外显子中的TAT→TAA产生的，
基因测序结果表明，C-NKG小鼠携带有Prkdcscid突变。
图2. 对C-NKG小鼠Il2rg基因进行PCR检测，结果表明C-NKG小鼠Il2rg基因成功敲除。
野生型条带大小：1430bp；敲除部分片段条带大小：388bp。
图3. C-NKG小鼠外周血中的B、T、NK细胞严重缺失，为重度免疫缺陷鼠。
取BALB/c、C-NKG小鼠的外周血，对其T、B和NK细胞的组成进行代表性流式细胞免疫表型分析及统计对比。结果表明，与BALB/c小鼠相比，C-NKG小鼠外周血中的B细胞（CD3-CD19+）、T细胞（CD3+CD19-）、辅助性T细胞（CD3+CD4+CD8-）、细胞毒性T细胞（CD3+CD4-CD8+）、NK细胞（CD335+CD3-）几乎完全缺失。
图4. C-NKG小鼠脾脏组织中的B、T、NK细胞严重缺失，为重度免疫缺陷鼠。
取BALB/c、C-NKG小鼠的脾脏组织，对其T、B和NK细胞的组成进行代表性流式细胞免疫表型分析及统计对比。结果表明，与BALB/c小鼠相比，C-NKG小鼠脾脏组织中的B细胞（CD3-CD19+）、T细胞（CD3+CD19-）、辅助性T细胞（CD3+CD4+CD8-）、细胞毒性T细胞（CD3+CD4-CD8+）、NK细胞（CD335+CD3-）几乎完全缺失。
图5. huPBMC-C-NKG小鼠生存曲线。
huPBMC-C-NKG小鼠随着移植物抗宿主病（GvHD）的出现而逐渐发生死亡。
图6. 人源PBMC移植C-NKG小鼠后外周血中人源CD45+细胞的含量变化。
PBMC移植后C-NKG小鼠外周血中人源白细胞的含量逐渐增加，3w后CD45+的平均比例在50%左右。
图7. 人源PBMC移植C-NKG小鼠后外周血中人源CD3+细胞的含量变化。
huPBMC-C-NKG小鼠重建以T细胞为主。
图8. C-NKG小鼠注射CD34细胞后检测到高水平的hCD45细胞，其中主要以人源B细胞重建为主，人源T细胞随着重建时间增长而增加，同时可见少量人源NK细胞。
图9. 人肝癌细胞Huh7皮下异种移植肿瘤生长曲线
图10. 人胃癌细胞HGC-27皮下异种移植肿瘤生长曲线
图11. 人结直肠癌细胞SW620皮下异种移植肿瘤生长曲线
将细胞以皮下注射的形式接种到C-NKG、NOD/Scid小鼠体内，并在不同的时间点测量成瘤体积。细胞接种量为5x106/只，数据以Mean±SEM形式呈现。结果显示，人肝癌细胞Huh7、人胃癌细胞HGC-27和人结直肠癌细胞SW620在C-NKG小鼠上均能有效地建立肿瘤模型。