mRNA疫苗研究解决方案
“疫苗”无疑是新冠疫情时期的热词之一。第三代疫苗技术中的mRNA疫苗正在迎接属于它的时代。
将体外转录的mRNA注射到动物体内的研究早在90年代已有报道。注射到小鼠骨骼肌中的mRNA成功表达出蛋白质。随后持续不断地研究投入，为mRNA药理学带来了更多优化技术支撑。如今我们已经可以在体外合成更稳定、翻译效率更高的mRNA，具备了行之有效的递送技术。mRNA在疫苗研究以及其他治疗领域的应用将得到更加深入的探索与研究。
Takara mRNA疫苗研究解决方案为mRNA疫苗研究提供多种实验工具，应对体外合成、转染与表达检测等不同研究阶段需求。
Takara mRNA疫苗研究解决方案
mRNA体外合成
生产mRNA主要通过体外合成方式进行，体系中RNA聚合酶以DNA为模板体外转录得到mRNA。Takara提供多种mRNA合成工具酶及相关试剂。
| 货号 |
产品名称 |
规格 |
| 2540A |
T7 RNA Polymerase |
5,000 U |
| 2520A |
SP6 RNA Polymerase |
3,000 U |
| 2181 |
Poly(A) Polymerase |
20 U |
| 2270A |
Recombinant DNase I (RNase-free) |
1,000 U |
| 2313A |
Recombinant RNase Inhibitor |
5,000 U |
※通过“Takara Bio中国官网”查看解决方案完整内容，了解限制性内切酶、核糖核苷酸等产品信息
mRNA转染
进行动物实验前，将mRNA转染细胞是初步验证所合成的mRNA是否有效的方法之一。Takara Xfect RNA转染试剂可以高效转染多种类型RNA至哺乳动物细胞，是包含转染所需全部试剂的完整系统。
| 货号 |
产品名称 |
规格 |
| 631450 |
Xfect RNA Transfection Reagent |
1.2 ml |
Xfect是可生物降解的纳米颗粒高分子聚合物转染试剂，可提供更低的细胞毒性和高转染效率，适用于广泛的细胞类型，保证高转染效率的同时保持了更高的细胞活性。
实验例
图1. HeLa细胞与间充质干细胞（MSCs）转染GFP mRNA。HeLa细胞（2.0×105）和间充质干细胞（6.0×104）使用1 μg GFP mRNA和5 μl Xfect RNA转染试剂进行处理。20小时后，通过落射荧光显微镜进行观察。HeLa细胞图像20倍放大，间充质干细胞图像40倍放大。
Western Blot蛋白表达检测
Western Blot分析仍然是目前实验室常用的检测分析方法之一，广泛应用于对目标蛋白质的检测与分析。转染细胞后的mRNA会获得怎样的表达情况，通过Western Blot检测可以获得一目了然的结果。
Takara提供丰富的Western Blot实验相关试剂，搭配详细的实验操作指南，提高Western Blot实验效率。
化学发光检出用HPR底物
| 货号 |
产品名称 |
规格 |
| T7101A |
Western BLoT Chemiluminescence HRP Substrate |
250 ml |
| T7102A |
Western BLoT Quant HRP Substrate |
100 ml |
抗原-抗体反应促进
| 货号 |
产品名称 |
规格 |
| T7111A |
Western BLoT Immuno Booster |
250 ml each |
| T7115A |
Western BLoT Immuno Booster PF |
250 ml |
HPR标识二抗替代
| 货号 |
产品名称 |
规格 |
| T7122A |
Western BLoT Rapid Detect v2.0 |
50 Rxns |
封闭与洗脱
| 货号 |
产品名称 |
规格 |
| T7131A |
Western BLoT Blocking Buffer（Fish Gelatin） |
1 L |
| T7132A |
Western BLoT Blocking Buffer（Protein Free） |
500 ml |
| T7135A |
Western BLoT Stripping Buffer |
500 ml |
电泳缓冲液方便装与蛋白质Marker
| 货号 |
产品名称 |
规格 |
| T9101 |
Tris-Glycine-SDS Buffer (TG-SDS) Powder, pH8.3 |
10 pouches（for 10 L） |
| T9102 |
Tris-Glycine Buffer (TG) Powder, pH8.3 |
10 pouches（for 10 L） |
| 3453A |
CLEARLY Protein Ladder (Unstained) |
500 μl |
| 3454A |
CLEARLY Stained Protein Ladder |
500 μl |
| T9320A |
TaKaRa CBB Protein Safe Stain |
1 L |
《Western Blot实验操作指南》，欢迎下载阅读。
病毒RNA检测
动物实验是检验疫苗效果的重要一环。这其中少不了对不同实验组别动物体内病毒载量的检测。除了经典的组织病理学、免疫组化方法外，快速、灵敏的荧光定量PCR方法同样不可少。Takara提供高质量的病毒核酸检测相关产品，加速研究进程。
探针法一步RT-PCR试剂与病毒核酸提取
| 货号 |
产品名称 |
规格 |
| RR064A |
One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time) |
100 Rxns |
| RR600A |
One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix |
200 Rxns |
| 9766 |
TaKaRa MiniBEST Viral RNA/DNA Extraction Kit Ver.5.0 |
50 Rxns |
【文献案例】
- Huang, Qingrui, et al. “A Single-Dose mRNA Vaccine Provides a Long-Term Protection for HACE2 Transgenic Mice from SARS-CoV-2.” Nature Communications, vol. 12, no. 1, 2021, pp. 776–776.
- Zhang, Na Na, et al. “A Thermostable mRNA Vaccine Against COVID-19.” Cell, vol. 182, no. 5, 2020, pp. 1271–1283.
疫苗的研发是一场与病毒的赛跑。mRNA疫苗也随着不断开展的相关研究稳步向前，Takara疫苗研究方案为广大疫苗研究团队提供更多选择。点击下方专题，了解更多基因工程疫苗研究解决方案。
《重组腺病毒疫苗研究解决方案》
《重组蛋白疫苗研究解决方案》
Takara对于各种形式的商务合作持开放态度，诚挚欢迎您就业务合作与我们取得联系，请发邮件至Bulkorder@takarabiomed.com.cn
参考文献
- Wolff, Jon A., et al. “Direct Gene Transfer into Mouse Muscle in Vivo.” Science, vol. 247, no. 4949, 1990, pp. 1465–1468.
- Pardi, Norbert, et al. “mRNA Vaccines — a New Era in Vaccinology.” Nature Reviews Drug Discovery, vol. 17, no. 4, 2018, pp. 261–279.
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