单细胞测序界世界杯正酣，看Takara的ICELL8如何突出重围
——大显神通篇
前言：
2018年俄罗斯世界杯赛事已过半，有的顺利晋级，有的黯然离场，只有过硬的实力才能保证笑到最后！
大家好！我叫ICELL8，来自Takara，工作是单细胞“职业猎手”，相信看过单细胞测序界世界杯开战，看Takara的ICELL8如何突出重围——奋发有为篇 的小伙伴一定对我印象深刻，我真诚的感谢各位小伙伴的支持。
上篇提到，我通过“灵巧的手（MSND）”、“锐利的眼（Imaging Station）”和“聪明的头脑（CellSelect）”捕获“活的单细胞”，这使得我俨然成为了单细胞测序界的“小能手”。但是，“奋发有为”如我，积极修炼单细胞应用“心法”，最终是要从 “小能手”晋级到 “大师”的。
「修炼心法，稳扎稳打」
为了处于业界“不败之地”，我在5-100 μm范围的细胞内挑选“活的单细胞”用于“心法”修炼。
先修炼——3’末端mRNA差异表达分析“心法”（点击了解）
有了Takara SMART-Seq单细胞RNA文库构建技术加持，对各种细胞都能获得优异的mRNA 3’端差异表达分析结果。如对iPS细胞向心肌细胞分化的四个时间点进行分析，结果准确显示不同分化阶段存在基因表达差异。
图1 iPS向心肌细胞分化示意图
图2 tSNE基因表达差异解析结果
为了获得单细胞水平T细胞受体（TCR）mRNA 全长V（D）J可变区，除了SMART（Switching Mechanism at 5’End of RNA Template）技术的加持，类似于5’RACE的方法也来“助攻”，有利于低丰度TCR变体检出，及α和β链的同时分析。当然，5’末端的差异表达分析也不在话下！
图3 弦图展示两种细胞TCRβ克隆型分配情况
除了勤奋，还得靠“天资”。一位“长者”曾说过，看我ICELL8就是天生的“单细胞分析奇才”。因此，在“心法”加持下，打通了我的“任督二脉”，习得了单细胞测序江湖各家苦求而不得的“秘术”——单细胞全长转录组分析，终成 "大师"。
那么我习得的单细胞全长转录组分析“秘术”到底有多厉害呢？
厉害点1：引入SMART-Seq技术，保证更高灵敏度和更准确的RNA测序数据
图4 SMART-Seq技术允许即使较低测序深度，也能获得大量的转录本和基因
图5 RNA-Seq文库体现出更高的覆盖度均一性，说明分析结果无3’或5’偏好性，
对研究剪切异构体等深度分析尤为重要
图6 更为完整的信息， 数据更丰富，支持如BCAT1可变转录本鉴定（Alternative transcripts）,
9268–9672 nt, 9–11 exons
划个重点：要练就练“秘术”，要选就选“大师”。还不赶紧把ICELL8接回实验室？
文末再送一波福利
即日起至2018年8月31日来信咨询ICELL8的小伙伴，将获得Takara精美实用的酒精喷壶一个，先到先得哦
来信咨询：guoz@takarabiomed.com.cn
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