riboEDIT™ CRISPR-Cas9是锐博自主开发的采用天然复合物系统的即用型（Ready-to-Use）基因编辑体系，gRNA采用crRNA和tracrRNA，提供全RNA体系（crRNA+tracrRNA+Cas9 mRNA）和RNP体系（crRNA+tracrRNA+Cas9 Protein），充分借助化学合成技术优势和质谱检测以确保质量稳定，通过化学转染、显微注射或电穿孔/电转进行编辑，是大规模文库筛选的理想选择。该体系不需要自行构建gRNA载体或Cas9载体，无需病毒实验室，无需前期测序鉴定，无DNA组分，不整合病毒或质粒基因，轻松实现单靶点或多靶点编辑，简化基因编辑实验步骤，数倍缩短实验时间。锐博还提供编辑效率保证套装和配套必需试剂，为基因编辑提供方便、省时、高效的解决方案。
riboEDIT™ CRISPR-Cas9 mRNA与RNP体系具有高效的基因编辑效率
锐博生物专利: 用于DNA编辑的系统及其应用，中国专利申请号：108977442A， PCT申请号：CN2018/088105 提供CRISPR-Cas9标准套装与编辑效率保证套装 锐博生物提供方便高效的基因编辑套装产品：效率保证套装和标准套装。效率保证套装针对人源基因，利用设计软件挑选评分高的5条crRNA进行合成，基于Cas9 mRNA的体系而配置必备试剂，包括tracrRNA、Cas9 mRNA、mRNA转染试剂、阳性对照crRNA 套装、T7E1酶及配套缓冲液等，提供即用型的基因编辑工具。其中效率保证套装可以确保MHCC97H细胞的T7E1酶切效率至少1条达到30%以上并提供相应的售后服务，标准套装不提供任何编辑效率的保证。 riboEDIT™ CRISPR-Cas9套装产品
*效率保证装：按说明书操作条件下，对MHCC97H细胞的T7E1酶切效率可实现至少1条达到30%以上，若5条均低于30%，客户须提供MHCC97H转染效率与检测方法步骤，经技术分析确认,免费重新优化设计，挑选合成5条crRNA并提供实验技术指导。标准套装不提供编辑效率有效性保证和免费重合服务，更多信息请见说明书。
*Positive Control crRNA Validation Set for Human包括针对人源的阳性对照crRNA 5nmol、正向引物5nmol和反向引物5nmol 设计合成crRNA riboEDIT™ Designed crRNA采用锐博生物优化的生物信息学设计，客户无需具备crRNA/sgRNA设计经验，crRNA包含20个与目标DNA序列互补配对的核苷酸（原间隔序列）和与tracrRNA互补配对的重复序列,涵盖人类和小鼠基因，每个基因设计合成3-6段单独的sgRNA，其他物种crRNA设计需另行评估 通用型tracrRNA：与crRNA形成gRNA riboEDIT tracrRNA采用化学合成通用型tracrRNA，经PAGE纯化，能够抗核酸酶，能与锐博生物的crRNA结合形成crRNA/tracrRNA复合物，共同指导Cas9蛋白切割双链DNA。需要注意的是，riboEDIT tracrRNA与riboEDIT crRNA是专利配套体系，两者必须配套使用（不兼容其他体系的crRNA）。 crRNA阳性对照套装：检测编辑体系正确性 crRNA阳性对照套装用于检测基因剪切体系的正确性，该套装包括阳性对照crRNA、正向引 CRISPR crRNA Library文库 锐博生物提供适用于大规模筛选的化学CRISPR crRNA文库，文库采用优化的设计算法提高特异性，相比单条crRNA更具经济性和通量性，以冻存管形式提供单孔细胞表型分析与高内涵高通量筛选分析，提供基因家族、特殊基因文库，crRNA定制文库为20个基因起订。若定制100个基因以上的，可按要求提供96孔PCR板封装形式。 riboEDIT CRISPR crRNA文库一览表 Cas9 mRNA：瞬时表达Cas9蛋白 riboEDIT Cas9 mRNA为体外转录生成，是属于spCas9 mRNA，具有帽子和polyA尾巴结构，编码序列为人源密码子优化的S. pyogenes Cas9，带有核定位信号（NLS），C端的一个1XFLAG标签，5’非翻译区(5’UTR)及3’非翻译区(3’UTR)，以促进mRNA的翻译和提高mRNA的稳定性，Cas9 mRNA可在细胞内瞬时表达Cas9蛋白（即spCas9蛋白），在crRNA和tracrRNA复合物指导下对目的DNA序列进行剪切，相比质粒或病毒体系，有效地降低CRISPR基因编辑的脱靶效应，适用于哺乳动物细胞基因编辑。 Cas9蛋白 riboEDIT Cas9 Protein是riboEDIT CRISPR-Cas9的RNP体系的重要组成部分，RNP体系包括了crRNA和tracrRNA和Cas9蛋白，tracrRNA可实现大规模合成，靶向DNA目的序列的crRNA可以高通量合成，Cas9蛋白为热稳定S.pyogenes来源的核酸酶（又称为spCas9）。此RNP体系不需要自行构建gRNA表达载体，无需在病毒级实验室中操作，无DNA组分，并且可实现多个crRNA指导下的多靶点编辑，大大简化前期实验步骤。该即用型的RNP体系适合化学转染（借助蛋白转染试剂）、显微注射或电转（电穿孔）进行基因编辑。500pmol的Cas9蛋白相当于83ug，一般情况下每孔转染1-2ug的Cas9蛋白，可转染超过40次以上。 T7E1 Enzyme酶：检测编辑效率 riboEDIT T7EI Enzymes是经E.coli重组表达的结构特异性酶，可识别并切割非完全配对的双链DNA、十字形结构DNA、 Holliday交叉DNA、异源双链DNA，或缓慢地切割带有切刻的双链DNA；可有效识别大于1个碱基的基因错配，广泛应用于由CRISPR-Cas9、锌指核酸酶(ZFNs)、转录激活因子样效应物核酸酶(TALENs)等工程核酸酶所介导的基因突变检测。 mRNA转染试剂 riboFECT™ mRNA Transfection Reagent是一种专门用于长链RNA分子的转染试剂，极具生物相容性，转染效率高，细胞毒性小，适合各种长链RNA分子（如mRNA，lncRNA等）的转染实验，可转染的长链RNA长度达4kb，已经成功实现了几十种细胞类型的高效转染，包括原代细胞、干细胞等难以转染的细胞类型。该转染试剂的最大特点是低毒、高效，转染时无需进行培养基更换操作，方便，快速。 EGFP mRNA：用于转染对照，检测转染效率 riboEDIT EGFP mRNA在转染试剂作用下进入目的细胞之后会表达绿色荧光EGFP蛋白，常作为检测CRISPR-Cas9体系转染效率的工具，提供的EGFP mRNA浓度为500ng/μL。 riboEDIT CRISPR-Cas9产品订购信息
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