研究发现,外泌体参与调控重要的细胞生理活动,如免疫应答、凋亡、血管生成、炎症反应等,其有望用于开发疾病治疗的潜在靶点、早期诊断标记物、靶向药物载体等,已成为近年来生命科学及医学领域的重要研究热点。
外泌体研究策略
注: miRNA、piRNA、lncRNA、mRNA等功能验证方案及涉及产品请咨询锐博生物技术人员
1、外泌体抽提【自主专利+客户文章1600+篇】
外泌体功能研究的关键前提是提取出高质量的外泌体,传统提取方法利用超速离心或密度梯度离心对外泌体进行富集,这些方法耗时耗力,提取效果或产量却并不理想。
锐博生物拥有自主专利的新型外泌体提取试剂盒,仅需通过简单混匀和常规离心,即可从样本中获取大量结构完整的外泌体,为您提供更便捷、高效、高纯度的提取方法。
【一种分离外泌体的方法及其试剂盒 专利申请号:CA201510469340.3】
产品特点:
- 操作简单,1小时快速抽提
- 广泛兼容多种样品:培养上清、血清/血浆、尿液、脑脊液、唾液、乳汁、肺泡灌洗液等
- 样本少(血清2~4ml,培养上清20ml),提取量高
- 富集效果精准可靠
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HeLa 细胞上清经Ribo™Exosome Isolation Reagent 抽提,用携带荧光基团的CD63 和CD81 抗体分别与抽提前样本及抽提产物进行免疫反应,使用流式细胞仪检测荧光强度。结果表明,抽提前两个标志物抗体荧光强度均处于背景阈值范围内,抽提后荧光强度明显提升,呈现阳性结果,表明exosomes 被富集出来。 |
代表性客户文章:
[1] Sun L, Zhu W, Zhao P, et al. Long noncoding RNA UCA1 from hypoxia-conditioned hMSC-derived exosomes: a novel molecular target for cardioprotection through miR-873-5p/XIAP axis[J]. Cell death & disease, 2020, 11(8): 1-16.
[2] Zhang K, Dong C, Chen M, et al. Extracellular vesicle-mediated delivery of miR-101 inhibits lung metastasis in osteosarcoma[J]. Theranostics, 2020, 10(1): 411.
[3] Bai M, Li J, Yang H, et al. MiR-135b delivered by gastric tumor exosomes inhibits FOXO1 expression in endothelial cells and promotes angiogenesis[J]. Molecular Therapy, 2019.
[4] Xu W, Wu Y, Hu Z, et al. Exosomes from Microglia Attenuate Photoreceptor Injury and Neovascularization in an Animal Model of Retinopathy of Prematurity[J]. Molecular Therapy-Nucleic Acids, 2019, 16: 778-790.
[5] Nie X, Fan J, Li H, et al. miR-217 promotes cardiac hypertrophy and dysfunction by targeting PTEN[J]. Molecular Therapy-Nucleic Acids, 2018, 12: 254-266.
产品订购:
产品编号 |
产品名称 |
目录价 |
立即订购 |
C10130-1 |
Exosome Isolation Reagent (for cell culture media ), 15mL |
¥1,800.00 |
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C10130-2 |
Exosome Isolation Reagent (for cell culture media ), 60mL |
¥5,900.00 |
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C10120-1 |
Exosome Isolation Reagent (for other body fluids ) , 15mL |
¥1,800.00 |
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C10120-2 |
Exosome Isolation Reagent (for other body fluids ), 60mL |
¥5,900.00 |
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C10110-2 |
Exosome Isolation Reagent (for plasma or serum ), 10mL |
¥2,990.00 |
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2、外泌体鉴定服务
a.粒径检测
Zetasizer 仪器根据Stokes-Einstein 原理,使用动态光散射检测由于颗粒布朗运动而产生散射光的波动随时间的变化。检测器将散射光信号转化为电流信号,再通过数字相关器的运算处理,得到颗粒在溶液中扩散的速度信息,即扩散系数。
H460细胞上清经Ribo Exosomes Isolation Reagent抽提,Zetasizer Nano ZS 纳米粒度仪检测粒径分布。
(注:实际检测结果受不同样本来源、样本的纯度等因素的影响,图片仅供参考)
b. 表面标记物检测
Exosomes 常见的特异性标记蛋白为CD63 和CD81,使用荧光的直标抗体结合流式细胞仪能够统计出经分离的Exosomes 的阳性百分比,从而判断Exosomes 的纯度。
H460细胞上清经Ribo Exosomes Isolation Reagent抽提,流式鉴定Exosomes表面标志物CD63和CD81。
(注:实际检测结果受不同样本来源、样本的纯度等因素的影响,图片仅供参考)
代表性客户文章:
[1] Wang W, Li D B, Li R Y, et al. Diagnosis of hyperacute and acute ischaemic stroke: the potential utility of exosomal MicroRNA-21-5p and MicroRNA-30a-5p[J]. Cerebrovascular Diseases, 2018, 45(5-6): 204-212.
[2] Chen J, Yu Y, Li S, et al. Micro RNA‐30a ameliorates hepatic fibrosis by inhibiting Beclin1‐mediated autophagy[J]. Journal of cellular and molecular medicine, 2017, 21(12): 3679-3692.
委托科研服务:
服务编号 |
服务名称 |
目录价 |
立即订购 |
Varies |
外泌体粒径分析 |
在线询价 |
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Varies |
外泌体表面蛋白标记检测 |
在线询价 |
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3、
外泌体RNA测序服务【完成>1500例外泌体RNA建库,成功率>95%】
a. 外泌体Small RNA测序
测序内容 |
推荐测序模式 |
建库方式 |
Small RNA(exosomes) |
HiSeq 2500, SE50, 10M clean reads |
RNA末端接头法 |
技术特色:
- 3个数据库深度挖掘及分析疾病相关miRNA biomarker;
- 4个最新数据库预测靶基因,结果更准确;
- 可提供piRNA 差异分析(限定物种,人、大鼠、小鼠);
- 采用3 个外泌体或囊泡数据库,注释信息更完善,深入挖掘研究结果的佐证;
- 提供肿瘤研究的临床数据分析,使得分析结果更加饱满。
b. 外泌体lncRNA测序
测序内容 |
推荐测序模式 |
建库方式 |
lncRNA(exosomes) |
HiSeq, PE150, 12G clean data |
锐博特有微量RNA建库法 |
技术特色:
- 采用3 个外泌体或囊泡数据库,注释信息更完善,深入挖掘研究结果的佐证;
- 多种差异表达计算方法,可根据项目情况灵活选择算法,展现更完美的数据;
- 全新的比对软件,分析速度更快,结果更准确;
- 提供肿瘤研究的临床数据分析,使得分析结果更加饱满。
代表性客户文章:
[1] Jiang F, Chen Q, Wang W, et al. Hepatocyte-Derived extracellular vesicles promote endothelial inflammation and atherogenesis via microRNA-1[J]. Journal of Hepatology, 2020, 72(1): 156-166.
[2] Shang A, Gu C, Wang W, et al. Exosomal circPACRGL promotes progression of colorectal cancer via the miR-142-3p/miR-506-3p-TGF-β1 axis[J]. Molecular cancer, 2020, 19(1): 1-15.
[3] Huang W, Yan Y, Liu Y, et al. Exosomes with low miR-34c-3p expression promote invasion and migration of non-small cell lung cancer by upregulating integrin α2β1[J]. Signal Transduction and Targeted Therapy, 2020, 5(1): 1-13.
[4] Fang S B, Zhang H Y, Wang C, et al. Small extracellular vesicles derived from human mesenchymal stromal cells prevent group 2 innate lymphoid cell-dominant allergic airway inflammation through delivery of miR-146a-5p[J]. Journal of extracellular vesicles, 2020, 9(1): 1723260.
[5] Hou Z, Qin X, Hu Y, et al. Longterm exercise-derived exosomal miR-342-5p: a novel exerkine for cardioprotection[J]. Circulation research, 2019, 124(9): 1386-1400.
委托科研服务:
服务编号 |
服务名称 |
目录价 |
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Varies |
外泌体Small RNA测序 |
在线询价 |
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Varies |
外泌体lncRNA测序 |
在线询价 |
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4、qPCR验证【自主专利产品】
miRNA qRT-PCR试剂盒
锐博生物提供拥有自主专利的茎环法和加尾法miRNA qPCR检测试剂盒。【高灵敏度小RNA定量检测方法及试剂盒,专利授权号:CA201410039162.6】
产品特点:
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Bulge-Loop™ miRNA qRT-PCR(茎环法) |
miDETECT A Track™ miRNA qRT-PCR(加尾法) |
检测方法 |
SYBR Green 染料法 |
SYBR Green 染料法 |
灵敏度 |
能检测总RNA 量≥10ng样品中的miRNA 表达量 |
准确鉴定总RNA 量≥10ng样品中的miRNA 表达量 |
PCR 步骤 |
特异性PCR 正向引物(与 miRNA 部分序列匹配) |
特异性PCR 正向引物(与 miRNA 全部序列匹配) |
特异性 |
最大能分辨仅有一个碱基差别的miRNA |
能分辨绝大部分成熟miRNA |
特点 |
特异性强,灵敏度高 特异地检测较低样本量中的目的miRNA |
通用性强,节省样本 单个样本可同时检测大量miRNA 及其他类型RNA |
反转录步骤 |
特异性RT 引物(每个 miRNA 需要单独RT) |
针对Poly(A) 化RNA 的通用型RT 引物 |
b. lncRNA qRT-PCR试剂盒
riboSCRIPT qRT-PCR Starter Kit 是锐博生物推出的基于SYBR Green I 嵌合荧光法的qRT-PCR 试剂盒,可实现lncRNA 或circRNA或mRNA 表达情况的快速、高效、准确的检测。
产品特点:
- 扩增效率高,特异性强
- 灵敏度高,易于检测
- 使用方便,操作简单
代表性客户文章:
[1] Sun Y, Wang Q, Zhang Y, et al. Multigenerational maternal obesity increases the incidence of HCC in offspring via miR-27a-3p[J]. Journal of Hepatology, 2020, 73(3): 603-615.
[2] Zhao Y, Zhao M F, Jiang S, et al. Liver governs adipose remodelling via extracellular vesicles in response to lipid overload[J]. Nature communications, 2020, 11(1): 1-17.
[3] Ma H, Chang H, Yang W, et al. A novel IFNα-induced long noncoding RNA negatively regulates immunosuppression by interrupting H3K27 acetylation in head and neck squamous cell carcinoma[J]. Molecular cancer, 2020, 19(1): 1-16.
[4] Qiao J, Zhao J, Chang S, et al. MicroRNA-153 improves the neurogenesis of neural stem cells and enhances the cognitive ability of aged mice through the notch signaling pathway[J]. Cell Death & Differentiation, 2020, 27(2): 808-825.
[5] Wu P, Cai J, Chen Q, et al. Lnc-TALC promotes O 6-methylguanine-DNA methyltransferase expression via regulating the c-Met pathway by competitively binding with miR-20b-3p[J]. Nature communications, 2019, 10(1): 2045.
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C10211-1 |
Bulge-Loop miRNA qRT-PCR Starter Kit (20T RT + 60T qPCR ) |
¥1,148.00 |
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C10211-2 |
Bulge-Loop miRNA qRT-PCR Starter Kit (100T RT + 300T qPCR ) |
¥4,148.00 |
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C10211-3 |
Bulge-Loop miRNA qRT-PCR Starter Kit (500T RT + 1500T qPCR ) |
¥16,300.00 |
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C10712-1 |
miDETECT A Track miRNA qRT-PCR Starter Kit(20T ployA+20T RT+200T qPCR ) |
¥2,108.00 |
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C10712-2 |
miDETECT A Track miRNA qRT-PCR Starter Kit(100T ployA+100T RT+1000T qPCR ) |
¥7,988.00 |
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C10712-3 |
miDETECT A Track miRNA qRT-PCR Starter Kit(500T ployA+500T RT+5000T qPCR ) |
¥31,660.00 |
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C11030-1 |
riboSCRIPT mRNA/lncRNA qRT-PCR Starter Kit (20T RT + 60T qPCR) |
¥1,248.00 |
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C11030-2 |
riboSCRIPT mRNA/lncRNA qRT-PCR Starter Kit (100T RT + 300T qPCR) |
¥4,548.00 |
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C11030-3 |
riboSCRIPT mRNA/lncRNA qRT-PCR Starter Kit (500T RT + 1500T qPCR) |
¥17,900.00 |
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