通过双链RNA使目的mRNA降解，从而特异性地抑制目的蛋白表达的现象称为RNA干扰（RNAi）。对于哺乳动物细胞，序列特异的RNAi效应可通过两种方法显示出来：用转染的办法将短干扰RNAs（siRNAs）导入细胞；或者内源性地表达出21-23个碱基的转录本，然后再形成短的发夹结构（shRNA）。我们的RNAi系列产品既可适用于初学者，又可为需要深入研究RNAi的学者提供完善的试剂系统（图1，表1）。这些产品既可用于潜在的siRNA靶标，也可用于靶序列瞬时或永久性地导入细胞。

　　优化的siRNA靶序列的直接克隆

　　siSTRIKE™ U6 发夹克隆系统 （人）由一系列的载体组成。在哺乳动物细胞中，使用RNA聚合酶Ⅲ启动子，可将上述载体应用于表达发夹结构的siRNA靶序列。这些载体包含一个U6启动子，载体结构使得包含有发夹siRNA靶序列的一小段DNA自行退火，然后克隆到载体上（图2）。我们可提供多种带有抗生素选择性标记的载体，以供稳定表达发夹结构siRNA靶序列之用。

优　点

　　用于RNAi 研究的双链RNA的体外转录

　　T7 RiboMAX™ 快速RNAi系统是一可在短时间内合成毫克级双链RNA的体外转录系统，产生的双链RNA无蛋白及其它物质的污染。该系统可用于高效合成21-23bp的短干扰RNA（siRNA），用于哺乳动物细胞的RNAi研究。已证实，体外合成的siRNAs与化学合成的siRNAs在诱导哺乳动物细胞的RNAi方面具有同样的效果（图3）。此外，T7 RiboMAX™ 快速RNAi系统还可用于合成200bp或更长的双链RNA，这些双链RNA可被用于非哺乳动物系统的研究。

优　点：

　　有效地对siRNA靶序列进行初筛、克隆

　　SiLentGene™ -2 U6 克隆发夹系统（人）可快速、简便地筛选多个siRNA的靶序列，并将其克隆，应用于长期实验。该系统将含有U6启动子的一小段DNA进行扩增，上游引物与U6启动子区域5’端特异性互补，下游引物与该启动子的3’段互补（图4）。该下游引物包含有发夹siRNA的靶序列。扩增后的产物可直接转染哺乳动物细胞，也可以克隆到相应的载体上，进行长期RNAi研究之用。

优　点：

　　采用报告基因技术筛选最优的siRNA靶序列

　　psiCHECK-1与psiCHECK-2 载体提供了一个快速的筛选最优的RNAi 效应的定量方法。这种方法基于检测靶基因与报告基因的融合体的表达变化（图5）。将感兴趣的基因克隆到载体的多克隆区域。由针对目的基因的双链RNAs（合成的siRNAs或体内表达的短发夹RNA（shRNAs）启动RNAi过程，导致海肾荧光素酶mRNA被切割、继而降解。检测海肾荧光素酶活性的降解程度就可以方便地了解RNAi 的效果。psiCHECK-1载体与Promega公司EnduRen™ 活细胞底物（Cat.# E6481）共同使用，用于检测活细胞中的RNAi效应。psiCHECK-2载体用于终点法的细胞裂解物检测，包含萤火虫荧光素酶基因，使海肾荧光素酶的表达水平归一化，令该系统更可靠、重现性更好。

优　点：

　　经过优化的siRNA双链转染试剂

　　CodeBreaker™ siRNA 转染试剂为专利配方，经过优化，用于有效地转染短干扰RNA（siRNA）。该试剂有助于siRNA转染进入哺乳动物细胞，同时保持细胞死亡率处于低水平。在RNAi研究中常用的三种细胞系中，观察到了高于80%的抑制率（图6）。使用时将CodeBreaker™ 试剂与siRNA、培养基混合，直接加入细胞培养体系中。

优　点：