蛋白检测分析系列

蛋白定量、蛋白Marker及融合标签检测分析

1、蛋白定量

Non-Interfering Protein AssayTM 试剂盒 （货号：488250）
操作简便；克服蛋白溶液中干扰物的影响
Non-Interfering Protein AssayTM 试剂盒使用简单，克服蛋白溶液中可能含有的去污剂、螯合剂、还原剂、胺、糖、尿素等的影响。通过采用通用蛋白沉淀试剂（UPPATM）将蛋白沉淀和固定于离心管中，以除去干扰物。蛋白浓度测定基于肽链骨架与铜的特异性结合。随蛋白浓度增加，未结合的铜离子浓度降低，光密度与溶液中蛋白浓度负相关。试剂盒包括：UPPA试剂ⅠⅡ，铜溶液Ⅰ，显色试剂A和B，以及BSA标准蛋白。每个试剂盒足够用于500个蛋白浓度测定。

CB-Protein AssayTM 试剂盒 （货号：219468）
改进的考马斯亮蓝染色法，快速简便地估测蛋白浓度
CB-Protein AssayTM 试剂盒用于简单快捷的测定蛋白浓度，采用改进的Bradford考马斯亮蓝染料结合检测。5分钟可获得结果。与还原剂兼容，但不适用于含去污剂的蛋白溶液。每个试剂盒包含CB-Protein染料和白蛋白标准溶液。每个试剂盒足够用于500个蛋白浓度测定。

BCA Protein Assay试剂盒（货号：71285-3）
基于双缩脲反应的蛋白检测试剂盒，可用于定量浓度在20-2000ug/ml的蛋白样本，可在数分钟内得到检测结果，即使在某些化合物及去污剂存在的情况下也可以获得准确的检测结果，但螯合剂、强酸、强碱、还原剂有可能会干扰实验结果。试剂盒中提供500ml的BCA溶液，15ml的硫酸铜溶液及3*1ml的牛血清白蛋白标准品(2mg/ml)。每个试剂盒足够用于500个蛋白浓度测定。

2、蛋白Marker

Novagen markers与市场上大多数传统marker的区别：
· 方便、容易记忆的条带分子量；
· 精确的分子量，没有二级结构或翻译后修饰，电泳行为一致；
· 质量精确
Novagen marker之所以具有这样的特点，是因为markers由精心设计的重组蛋白组成，经细菌表达纯化。其分子量简单易记，电泳分布均匀。每个条带有精确的分子大小和含量。
Novagen蛋白可用于高精确度确定未知样品蛋白分子量。其电泳行为一致，优于从组织中纯化的marker。
带S·Tag的重组蛋白，与S-protein Conjugate结合检验，这种WB克服了使用化学修饰marker的缺点，不会由于不规则的电泳行为导致 错误的分子量估计。

Perfect Protein Marker适用于日常SDS－PAGE定性、定量分析。
Trail Mix Protein Markers在Perfect Protein Marker基础上，增加了三个预染蛋白（100、16、15kDa），使电泳过程中蛋白的迁移情况直观可见。
Perfect Protein Western Markers精确的分子量标准，条带含S·Tag/His·Tag，可用于Western Blot检测。
Perfect Protein Western Blot Kits 专为配合Perfect Protein Western Marker进行WB使用。所有Perfect Protein Western Marker条带都含S·Tag，只需加入S-protein AP 或 S-protein HRP Conjugate，在与样品检测相同条件下进行。S-protein Conjugate特异性识别Marker各条带的S·Tag，不会干扰用户的样品检测。
Trail Mix Western Markers & Blot Kits在Perfect Protein Western Markers基础上，增加了三个预染条带（100、16、15），利于电泳过程中直接观察。并增加了分子量225kDa的条带，改善了判断大蛋白分子量的准确性。

各种Marker的条带大小、数目及范围

产品名称、规格、货号

3、常见融合标签的检测/分析

目的蛋白的种类和量可以通过Western blotting测定，利用蛋白特定抗体或 pET载体上的融合标签（如His、GST）的特异性单抗进行表达蛋白的检测和分析。
在紧连样品的槽中加入Western Blot Markers (货号 69959-3) 或 Trail Mix™ Western Markers (71047-3, 71048-3)以便估计蛋白的大小。两个 蛋白marker都带有S?Tag和His?Tag序列因此它们可以用S-蛋白配基或His·Tag单克隆抗体进行检测。

His·Taga单克隆抗体和Western试剂
灵敏特异地检测His· Tag融合蛋白
His· Taga单克隆抗体为小鼠单克隆抗体（IgG1），抗许多Novagen表达载体或许多其它商品化载体编码的His· Tag序列。该抗体识别五个连续的组氨酸残基，而不受邻近氨基酸组成的影响。高亲和力（Kd=5′10-8-1′10-9M）使得可在抗体浓度为0.1mg/ml时灵敏特异地检测His· Tag融合蛋白。 His· Tag单克隆抗体结合N-末端、C-末端和内部His· Tag序列。
100mg包装提供的纯化抗体足够配制1000ml工作液。

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