Novagen蛋白纯化及检测产品促销活动(7折起)!(10.1-12.31)
对于进行蛋白表达、纯化的研究者来说,如何设计适合的纯化路径,简便、高效的获得目的蛋白,是一个在表达开始就需要考虑的问题。随着亲和纯化方法的发展,越来越多的研究者选择了利用融合表达的各种标签达到纯化蛋白的目的。Novagen一直专注于提供更好的蛋白表达和纯化的体系。包括:融合标签的亲和纯化树脂、特定标签的检测、标签的切除和各种配套试剂。针对各种不同特性的标签,均有适合的纯化树脂:
融合标签 |
N端或C端 |
大小(氨基酸个数) |
应用 |
His•Tag® |
N端或C端均可 |
6,8,10 |
Western blot金属离子螯合层析
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GST•Tag™ |
N端 |
220 |
Western blot
亲和纯化
定量检测
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T7•Tag® |
N端 |
11 |
Western blot
免疫沉淀
亲和纯化
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S•Tag™ |
N端 |
15 |
Western blot
亲和纯化
定量检测
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蛋白亲和纯化用树脂
His.Tag纯化树脂
His.Tag融合标签,由于其氨基酸个数少,可以在天然、变性条件下纯化目的蛋白,成为应用十分广泛的融合标签。Novagen提供多种His.Bind树脂,包括:IDA/NTA树脂;不同包装散装树脂/预装柱/纯化试剂盒;离子化/未离子化树脂;适用于重力流/中低压的不同纯化树脂等,适应不同研究者的纯化需要。
His.Tag树脂选择指南
产品 |
类型 |
载量 |
特点 |
应用 |
Ni-NTA His.Bind Resin |
带Ni的NTA琼脂糖 |
5-10 mg/ml |
最小的Ni2+浸出与20mM b-ME相容
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小到中量
重力流柱
推荐用于真核抽提物
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Ni-NTA His.BindSuperflow |
带Ni的NTA超流速琼脂糖 |
5-10 mg/ml |
最小的Ni2+浸出与20mM b-ME相容高流速和压力
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小量到生产级
FPLC或重力流柱
推荐用于真核抽提物
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His.Bind Resin |
无Ni的IDA琼脂糖 |
8 mg/ml |
可重复使用多次与His.Bind缓冲试剂盒兼容
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小到中量
重力流柱或批次模式
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His.Bind Resin, Ni-charged |
带Ni的IDA琼脂糖 |
8 mg/ml |
可重复使用多次与His.Bind缓冲试剂盒兼容
|
小到中量
重力流柱或批次模式
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His.Bind Cloumn |
带Ni的IDA琼脂糖
1.25预装柱 |
10 mg/次 |
预装柱与His.Bind uick缓冲试剂盒兼容
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方便的纯化
重力流柱
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His.Bind Fractogel (S) |
无Ni
IDA触须
甲酰化 |
>10 mg/ml |
20-40mM颗粒大小高流速和压力
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小量到生产级
FPLC或重力流柱
高分辨率分离
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His.Bind Fractogel (M) |
无Ni
IDA触须
甲酰化 |
>10 mg/ml |
40-90mM颗粒大小高流速和压力
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小量到生产级
FPLC或重力流柱
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His.Bind Quick 300 Cartridge |
带Ni的IDA纤维素
预装筒 |
0.5 mg/次 |
每端锁紧接口与His.Bind Quick缓冲试剂盒兼容
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注射器操作
真空多支管操作
快速纯化
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His.Bind Quick 900 Cartridge |
带Ni的IDA纤维素
预装筒 |
2 mg/次 |
每端锁紧接口与His.Bind Quick缓冲试剂盒兼容
|
注射器操作
真空多支管操作
快速纯化
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His.Bind Quick Cloumn |
带Ni的IDA纤维素
预装柱 |
5 mg/次 |
每端锁紧接口与His.Bind Quick缓冲试剂盒兼容
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真空多支管操作
快速纯化多个样品
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His.Bind Magnetic Agarose Beads |
带Ni的IDA磁性琼脂糖 |
5 mg/ml |
3 mM磁性琼脂糖珠 |
快速小量纯化
磁性分离
兼容高通量纯化
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更多信息,请参考>>>:
2、GST.Tag纯化树脂 (Cat#70541-3,促销价¥1917.5)
GST•Bind™ 纯化系统的原理基于谷胱甘肽巯基转移酶融合蛋白对固定化谷胱甘肽的亲和力。通过一步简单层析,蛋白可快速简便地纯化至接近完全均一。通过谷胱甘肽树脂的纯化要求GST结构域可溶并正确折迭。温和洗脱条件(10mM还原型谷胱甘肽)避免了目标蛋白的变性。GST•Bind树脂利用11原子间隔臂通过二硫键共价交联还原谷胱甘肽。谷胱甘肽的高度置换确保高结合载量。每毫升树脂可生产5-8毫克GST融合蛋白。树脂可重复使用几次而不丧失载量。
位点特异性蛋白酶
1.限制级凝血酶 (Cat# 69671-3,促销价¥793.1)
限制级凝血酶特异性切割带有识别位点(LerValProArg GlySer)的目标蛋白。产品经过对融合蛋白切割活性的功能性测试,不含任何杂蛋白酶。凝血酶与10X凝血酶切割缓冲液和对照蛋白一起提供。
单位定义:一单位定义为20°C 200ml反应体系中(20mM Tris-HCl pH8.4、150mM NaCl、2.5mM CaCl2、50mg融合蛋白和酶)16小时切割1mg融合蛋白所需要的酶量。
2.生物素化凝血酶 (Cat# 69672-3,促销价¥1669.7)
生物素化凝血酶与限制级凝血酶相似,但共价结合了生物素,可在酶切反应结束后,通过固定化链亲和素方便地去除蛋白酶。生物素化凝血酶的使用方法与未修饰凝血酶相同,与链亲和素琼脂糖的结合率大于99%。
3.限制级Xa因子(Cat# 69036-3,促销价¥687.3)
限制级Xa因子是从牛血浆分离并经过Russell蝰蛇蛇毒活化的高纯度蛋白酶。产品中没有任何杂蛋白酶,因此不会产生二级切割。Xa因子的切割识别位点是IleGluGlyArg的羧基末端,因此可以从相应的重组蛋白中去除所有载体编码的序列。
单位定义:一单位限制级Xa因子在21°C和50mM Tris-HCl(pH8.0)、100mM NaCl、5mM CaCl2缓冲液条件下,16小时切割95%以上的50mg Xa对照蛋白。
4.重组肠激酶(Cat#69066-3,促销价¥1168.8)
重组肠激酶(rEK)为牛肠激酶催化亚基的高纯度重组制品,识别的切割位点与天然酶相同(AspAspAspAspLys),活性也与天然酶相似,但rEK切割速率较快。与一些天然牛肠激酶制品不同,Novagen的rEK纯化到几乎完全均一,不会发生任何杂蛋白酶引起的二级切割。
单位定义:一单位定义为23°C和20mM Tris-HCl(pH7.4)、50mM NaCl、2.5mM CaCl2缓冲液中,16小时切割50mg融合蛋白所需要的酶量。 蛋白检测相关产品
1、His•Tag™ 单克隆抗体(Cat#70796-4,促销价¥426.1; 70796-3,¥5454.2)
His•Tag® 单克隆抗体是小鼠来源的单抗(IgG1),与许多Novagen的表达载体或其它商品化的表达载体上的组氨酸标签序列发生专一反应。该抗体识别连续5个组氨酸残基,与相邻氨基酸序列无关。这个反应的亲和力非常高 (Kd = 5 x 10-8 to 1 x 10-9 M),采用抗体浓度为 0.1-0.2 μg/ml,即可非常特异而灵敏地检测His•Tag融合蛋白。His•Tag单抗可以与N-端,C-端和序列内部的 His•Tag序列反应。这种抗体也可以用来检测 Perfect Protein™ 和 Trail Mix™ Western Markers条带,使Western blots反应的内参能被非常方便地显示出来。为了使Western blotting的背景更干净,推荐使用溶于碱溶液的酪蛋白(货号70955-3)作为阻断剂。分别提供3μg 小包装及100 μg大包装,后者提供的高纯度抗体足够用于配制1000 ml工作液。
2.GST•Tag™ 单克隆抗体(Cat#71097-3,¥2382.7)
GST•Tag™单克隆抗体为小鼠单克隆抗体 (IgG1),对26KDa的GST结构域(Schistosoma Japonicum)具高亲和性。为高纯度抗体,可用于检测由pET-41、pET-42或其它GST编码载体表达的GST•Tag融合蛋白。50 mg包装提供的纯化抗体足够用于50次Western blot (10cm×10cm)。
3.Perfect Protein™分子量标准(Cat#69079-3, 69149-3,促销价¥1022.7)
Perfect ProteinTM分子量标准为新颖的具有方便间隔和确定大小的一套蛋白。大小精确、间隔均匀。用于SDS-PAGE凝胶电泳,Perfect Protein分子量标准为大小精确的重组蛋白,可高度准确地确定未知样品大小。与许多常规分子量标准(如卵白蛋白,牛血清白蛋白等)不同,Perfect Protein分子量标准不含引起不规则迁移、异质性模糊条带或大小估计不准的寡糖。Perfect Protein分子量标准每个条带的已知质量也可用于估计样品蛋白浓度。该分子量标准优化用于考马斯亮蓝染色,但也可使用其它凝胶染色方法(如银染,荧光染料等)。
Perfect Protein分子量标准中每个蛋白都带有S.TagTM多肽,使得该分子量标准可用作任何Western杂交的高度准确内部标准,只要简单地在二抗或链亲和素孵育过程中加入S-蛋白AP结合物或S-蛋白HRP结合物。对于Western杂交,我们推荐使用Perfect Protein Western分子量标准,它配置了方便的浓度并可在标准杂交过程中最优化地转移最小和最大条带。
Perfect Protein分子量标准(15-150kDa)包括的蛋白大小为15,25,35,50,75,100和150 kDa。每小瓶含有400mg蛋白(每条带为50mg,除了用作2X参照的50 kDa条带为100mg)。
Perfect Protein分子量标准(10-225kDa)包括上述蛋白大小和两个额外蛋白,10 kDa和225 kDa,用于要求更广大小范围的应用。每小瓶含有500mg蛋白(每条带为50mg,除了用作2X参照的50 kDa条带为100mg)。
4.Trail Mix™蛋白分子量标准(Cat#70980-3,促销价¥1074.8)
Trail Mix™蛋白分子量标准为补充了一组三个预染指示蛋白的Novagen Perfect Protein分子量标准,可在电泳过程中直接看到蛋白迁移。与其它整个梯子预染的分子量标准不同,Trail Mix只用三个参考条带(100、16和15kDa)确认蛋白迁移、分离和指示凝胶方向。预染经常导致条带加宽或影响迁移,并降低迁移率和分子量确定的精确性。Perfect Protein分子量标准的泳动或条带清晰不受Trail Mix预染条带的影响。分子量标准为大小精确的重组蛋白,可高度准确地确定未知样品大小。与许多常规分子量标准(如卵白蛋白,牛血清白蛋白等)不同,Perfect Protein分子量标准不含引起不规则迁移、异质性模糊条带或大小估计不准的寡糖。Perfect Protein分子量标准每个条带的已知质量也可用于估计样品蛋白浓度。
使用考马斯亮蓝染色时,出现10条带,10 kDa-225 kDa。50 kDa条带含量高于其它条带,是除了预染三条带以外的另一个标志。每个蛋白都含有His.Tag序列,可以使用His.Tag抗体进行Western blot检测。
更多产品信息,欢迎登陆www.merckbio.com查询。
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Novagen-the Gold Standard in Protein Expression
联系默克:800-820-8872,Email: bioteam@merck-china.com |