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无论是预制凝胶还是凝胶电泳后染色,GelRed都是最佳选择
现在GelRed更加出色:
• 提供10,000×水溶液,更加安全
• 室温储存,更加方便
• 新的凝胶电泳后染色试验步骤,不需要缓冲溶液,更加灵敏方便
图1.比较GelRed和溴化乙锭(EB)在1%琼脂糖预制凝胶(TBE缓冲溶液)中的染色效果。使用Invitrogen生产的1kb Plus DNA Ladder样品两倍梯度稀释上样,各泳道上样量从左到右依次为200ng,100ng,50ng和25ng。使用300nm激发的凝胶成像系统和EB滤光片成像并使用Polaroid 667黑白打印 |
GelGreen和SYBR Green I相比有同样的灵敏度,却有更高的稳定性
SYBR® Safe 简直无法比拟 GelGreen
图 2. 比 较 GelGreen™ 和 SYBR® safe 在 1 % 琼 脂 糖 凝 胶(TBE 溶液)中电泳后染色的效果。使用 Invitrogen 生产的 1kb Plus DNALadder 样品两倍梯度稀释上样,各泳道上样量从左到右依次为200ng,100ng,50ng 和 25ng。使用 254nm 激发的凝胶成像系统和SYBR 滤光片成像并使用 Polaroid 667 黑白打印。 |
特 点:
超高的灵敏度
GelRed和GelGreen是目前市场中最灵敏的凝胶染色试剂
极好的稳定性
可以使用微波炉加热,可以在室温下保存
更高的安全性
艾姆斯氏试验结果表明,该染料的诱变性远小于溴化乙锭(EB)
广泛的适用性
适用于预制凝胶和凝胶电泳后染色
简单的染色步骤
不需要脱色步骤
对DNA和RNA的迁移影响极小
对核酸迁移的影响小于SYBRä Green I
与标准凝胶成像系统以及可见光激发的凝胶观察装置完美兼容
使用312nm激发的UV凝胶成像系统时,GelRed可以完美的替代EB;使用254nm激发的UV凝胶成像系统或可见光激发的凝胶观察装置时,GelGreen足以替代任意一种SYBRä染料(见图4中的光谱图)
图3:分别用1X SYBR Green 1、SYBR Safe、GelRed 和 Gelgreen 在 PBS 缓冲液中对Hela 细胞染色5分钟和30分钟。成像结果表明Gelred和GelGreen染色剂几乎没有穿透细胞膜进入细胞内,而SYBR Green 1、SYBR Safe 则完全进入细胞内,并与核酸结合(绿色发光 部分)。这充分证明GelRed和GelGreen具有极好的安全性。更详细的安全检测报告可以到 www.biotium.com 官方网站下载。 |
图 4. 比较 GelGreen、GelRed、SYBR®Green I 和 EB 的诱变性。使用+1 移沙门氏菌指标结合 S9 的分数存在的 TA98。 “↓”表明在此浓度的 EB 没有检测到。 “ò”表示 SYBR Green I 在此浓度的表现细胞毒性。欲了解更多信息,您可以从 Biotium 网站下载 GelRed 和 GelGreen 的安全报告。 |
GelRed 和 GelGreen 是设计以取代剧毒的溴化乙锭(EtBr)的新一代的核酸凝胶荧光染料。 Biotium科学家研发的 GelRed 和 GelGreen 集低毒性、高灵敏性和出色的稳定性等优点于一体,效果优于EtBr 及其他 EtBr 替代品。
几十年来,EtBr因其低廉的价格,一般的灵敏度,一直被用作核酸凝胶染色的主要染料。然而,EtBr 是一个高度诱变的物质。该染料的使用安全隐患、净化及废物处置的相关费用等,最终导致其代价高昂。正因如此,近年来市场上出现一些替代品,如 SYBR® 染料等。尽管这些替代染料减少了致突变性,但却丧失了染料其他方面的性能。例如,SYBR® Safe 的灵敏性很低,SYBR® Green 及SYBR® Gold 的稳定性远远低于 EtBr。 SYBR® 染料能够快速进入细胞,结合线粒体及核 DNA,使得染料在一定浓度更下是有毒的。事实上,在紫外线或其他诱变剂诱导下,SYBR® Green I 强烈的突变性已被广泛认知(Ohta, et al. Mutat. Res. 492,91(2001))。为了保证 GelRed 和 GelGreen 的安全性,Biotium的科学家采用一种新型非常简单的概念:阻止染料进入活细胞减少遗传毒性。我们相信,不给 DNA 结合染料渗透活细胞中结合基因组 DNA 的机会,便可以保证染料没有或大幅度减少其诱变性作用。因此,我们设计的 GelRed 和 GelGreen 染料的化学结构保证其无法渗透细胞膜。Ames 试验证实即使浓度远远高于实验者操作凝胶染色的工作浓度,GelRed和 GelGreen 也无诱变性。此外,环境的安全性试验表明,GelRed 和 GelGreen 是完全无害的,对水生生物无毒。因此,废弃的 GelRed 和 GelGreen 可以直接倒下水道,或按照普通垃圾处理。有关其详细信息,请登陆 Biotium 网站上下载 GelRed/GelGreen 的安全报告。
无论是作为预制凝胶染色或电泳后染色,GelRed和 GelGreen 染料都是高度敏感的。312/302 nm 的紫外光透射下,GelRed 灵敏度远远超过 EtBr, 与SYBR® Gold 灵敏度相当,后凝胶染色法 GelRed 效果更明亮。与 SYBR® Gold 不同的是,GelRed 也可以被作高度敏感的预制凝胶染色。 GelGreen 是用于 488 nm 激光凝胶扫描仪或者可见蓝光激发的Dark Reader 的研究人员的使用要求。 GelGreen光谱类似于 SYBR® Safe,但比后者更为敏感。
GelRed 和 GelGreen 另一个主要优势是其显着的稳定性。你可以用操作 EtBr 同样的方式操作两种染料。这意味着,染料在水中是非常稳定的,可以在室温下长期储存,也可以在微波中加热进行预制凝胶。这两种染料也非常耐光,暴露在室内灯光下也比较稳定。
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