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QIAGEN Fast Cycling PCR Kit 提供高特异性、超快速的PCR扩增,适用于任何PCR 仪。新型的专利申请中的PCR buffer 显著缩短了聚合酶、引物和模板复合物形成的时间, 因此每一次 PCR 循环退火时间都大大缩短,节约多至75%的时间, 35个循环从原来的1个多小时减少到 20 分钟(Table 1),如使用快速PCR仪, 整个PCR实验可在30分钟内完成(Figure 1)。QIAGEN Fast Cycling PCR Kit大大节省了实验时间,提高了通量, 节省了购置昂贵仪器的成本。
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Table1.不同长度的片段所需要的PCR Cycling 时间
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Figure 1. 523bp的片段使用HotStar plus DNA Polymerase 在标准的PCR仪(S)和快速PCR仪F)上扩增。A总PCR时间,包含循环时间和升降温时间,使用 QIAGEN Fast Cycling PCR Kit 后PCR时间显著缩短 B电泳结果显示快速PCR和普通PCR试剂盒具有同样的高特异性扩增 |
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高特异性,高灵敏度 |
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QIAGEN Fast Cycling PCR Kit 以预混液形式提供,包含HotStar plus DNA Polymerase,具有无可匹敌的热启动PCR表现力, 阻止了低温下引物二聚体和非特异性产物的扩增 (Figure 2),可方便地在室温下进行反应体系构建。配合独特的 QIAGEN Fast Cycling PCR Buffer ,最大限度地 减少了非特异性扩增和背景拖尾的现象。 |
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Figure 2. QIAGEN Fast Cycling PCR Kit 表现出高特异性、高度可靠的扩增。 |
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独特的Fast Cycling PCR Buffer - 最少的优化 |
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新型的正在申请专利的PCR buffer 中含有独特的Q-Bond分子,可增强Taq酶与引物的亲和力,加快酶、引物和模板复合体形成,因此将引物退火时间缩短到5s (Figure 3)。独特的缓冲液配方和优化的DNA聚合酶浓度也缩短了变性和延伸的时间。 经优化的Fast Cycling PCR Buffer 不仅节约了时间,而且最大限度地减少了对温度和Mg2+ 浓度的优化。
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Figure 3. A新型的正在申请专利的PCR buffer 中含有独特的Q-Bond分子,可增强Taq 酶与引物的亲和力,加快酶、引物和模板复合体形成, 因此缩短了引物退火的时间
B 无Q-Bond分子时,引物和聚合酶是先后陆续地与模板结合,延长了退火的时间 |
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CoralLoad Fast Cycling Dye – 实验更方便 |
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试剂盒中还提供新型CoralLoad Fast Cycling Dye,包含两种指示染料—橙色和红色, PCR 产物可以直接进行电泳, 无需添加上样缓冲液。(Figure
4)
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Figure 4. A包含胶指示染料B PCR产物直接上样 |
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Q-solution 轻松扩增“困难”模板 |
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试剂盒中还提供独特的Q-solution,有效扩增难扩增的模板,如二级结构复杂的模板和高GC含量的模板,并且不同于其他PCR添加剂如DMSO,Q-solution无毒、纯度高且浓度已经优化好,让您更省心。 |
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订购信息:
其他规格,敬请咨询QIAGEN技术支持。
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QuantiFast™ SYBR® Green Kits |
用于SYBR Green 法快速real-time PCR (两步法)和 RT-PCR (一步法)
超快速real-time PCR - 节省多至60%的时间 |
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独特的快速PCR buffer中包含正在申请专利的Q-Bond分子,显著缩短了变性、退火和延伸所需要的时间(Figure 1,2)。Buffer 中还包含HotStarTaq®Plus DNA Polymerase, 95°C激活只需5分钟。一步法RT-PCR 中提供的经优化的 QuantiFast RT Mix 仅用10分钟即可合成cDNA。
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Figure 1.A QuantiFast Buffer 中的Q-Bond分子增强了DNA聚合酶和引物的亲和力,缩短了引物退火时间,同时独特的缓冲液配方也缩短了变性和延伸的时间。
B 无Q-Bond分子时,引物和聚合酶是先后陆续地与模板结合,延长了退火的时间 |
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Figure 2.与QIAGEN标准的real-time PCR 试剂盒QuantiTect系列比较,QuantiFast SYBR Green Kits 节约多至60%的时间 A 两步法real-time PCR B 一步法real-time PCR在几种普通PCR仪上的结果L:LightCycler® 2.0;A1: ABI PRISM® 7900;A2: Applied Biosystems® 7500; A3: ABI PRISM 7000. |
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高特异性,高灵敏度
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QuantiFast SYBR Green Kits 以预混液形式提供,快速PCR buffer 中的KCl 和 NH4Cl 平衡体系促进引物特异性退火,HotStarTaq Plus DNA Polymerase 保证了严格的热启动以阻止非特异性扩增。无论是一步法还是两步法试剂盒都最大限度地减少了各种条件的优化,具有无可匹敌的高特异性和高灵敏度(Figure 3,4),适用于各种普通的和快速 real-time PCR 仪。 |
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Figure 3. 高灵敏度的两步法real-time PCR(在快速PCR仪iCycler iQ上)检测人白细胞中MYC的表达。采用10倍稀释的cDNA为模板(从100ng到0.1ng),结果表明使用QuantiFast Kit 能够获得较低的CT 值,灵敏度更高。 |
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Figure 4. 高特异性的一步法real-time RT-PCR(在快速PCR仪LightCycler2.0上)检测HeLa细胞中BCL2的表达。采用10倍稀释的RNA为模板(从100ng到0.1ng),结果表明使用QuantiFast Kit 能够获得 高特异性的扩增(熔解曲线呈单个峰),和更高的灵敏度(较低的 CT 值)。 |
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宽广的线性范围
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QuantiFast SYBR Green Kits可以对更宽广的线性范围内的模板精确定量,即使是低拷贝模板的微小差别都能够被清楚地区分出来(Figure 5)。 |
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Figure 5. 清楚区分低拷贝模板的微小差别(在Mastercycler®eprealplex.仪器上检测Y染色体上特异的单拷贝基因SRY)A 从1000个拷贝到1.5个拷贝被清楚的区分开 B 宽广的线性范围
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订购信息:
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用于探针法快速real-time PCR (两步法)和 RT-PCR (一步法)
超快速real-time PCR- 节省多至60%的时间
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独特的快速PCR buffer 中包含正在申请专利的Q-Bond 分子,显著缩短了变性、退火和延伸所需要的时间(Figure 1,2)。Buffer 中还包含 HotStar
Taq®Plus DNA Polymerase, 95°C激活只需3分钟。一步法 RT-PCR 中提供的经优化的QuantiFast RT Mix仅用10分钟即可合成 cDNA。 |
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Figure 1.A 新型的正在申请专利的PCR buffer 含有独特的Q-Bond分子,可增强Taq酶与引物的亲和力,加快酶、引物和模板复合体形成,因此缩短了引物退火的时间 。B无Q-Bond 分子时,引物和聚合酶是先后陆续地与模板结合,延长了退火的时间。 |
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Figure 2. 与QIAGEN标准的real-time PCR 试剂盒QuantiTect系列比较,QuantiFast Probe Kits 节约多至60%的时间 A 两步法real-time PCR B 一步法real-time PCR在几种普通PCR仪上的结果L: LightCycler®2.0;A1:ABI PRISM®7900; A2: Applied Biosystems®7500; A3: ABI PRISM 7000. |
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高特异性,高灵敏度
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QuantiFast Probe Kits 以预混液形式提供,快速PCR buffer 中的KCl 和 NH4Cl 平衡体系促进引物特异性退火, HotStarTaq Plus DNA Polymerase保证了严格的热启动以阻止非特异性扩增。 无论是一步法还是两步法试剂盒都最大限度地减少了 各种条件的优化,具有无可匹敌的高特异性 和高灵敏度(Figure 3,Table 1),适用于各种普通的和快速 real-time PCR 仪。 |
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Figure 3. 高灵敏度的一步法real-time RT-PCR(在快速PCR仪Applied Biosystems 7500 Fast System上)检测白细胞中IL12RBI 的表达。采用10倍稀释的RNA为模板(从100ng到0.1ng),结果表明使用QuantiFast Kit 能够获得较低的 CT 值,提高了检测的灵敏度。 |
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宽广的线性范围
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QuantiFast Probe Kits 可以对更宽广的线性范围内的模板精确定量,107 线性范围内的模板都可以被检测到(Figure 4)。 |
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Figure 4. 高灵敏度的两步法real-time RT-PCR(在LightCycler 2.0.上)检测b-2 microglobulin。QuantiFast Probe Kits提供 A更高的灵敏度和 B宽广的动态范围。
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相关产品信息:
√经验证的用于real-time RT-PCR的引物对
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