原理:

genomONE_clip_image002.jpg  待转移的分子(如DNA,蛋白,Antisense Oligonucleotide, siRNA等)与HVJ-Envelope (HVJ-E) 混合后,形成了HVJ-E载体。利用病毒衣壳蛋白的侵染能力,在融合蛋白(F)的作用下,直接与细胞融合,将分子转入目标细胞或组织。
* HVJ-E:Hemagglutinating Virus of Japan Envelope。
** 现已有200多篇文献使用该试剂盒,如需样本案例,请向我司索取。

◆ 优点、特色:

  目前市面上独一无二的转染试剂盒,可用于细胞、组织和活体动物。可用于:
siRNA
  少量siRNA也可高效发挥敲除作用,无需化学修饰siRNA,高表达量。
DNA
  无论序列长短、线性或环状均可
Oligonucleotides
  DNA, RNA
蛋白
  保持酶和抗体的功能性与特异性
体内转染 !!
  大量操作和文献引用证明HVJ-E载体可直接将目标分子转移到活体动物产生作用。
高通量筛选
  可同时转染多种分子

1.  运用范围广
  GenomONE HVJ-E载体试剂盒可将多种分子(质粒DNA、siRNA、寡核苷酸、蛋白、抗体等)转进培养细胞(贴壁和非贴壁细胞)和组织。也可用于敏感原代细胞和 活体动物转染。每种领域的GenomONE-Neo运用情况,均有大量文献报道。(如需文献列表,请向我司索取)
2.  安全性
  与阳离子脂质体不同,GenomONE-Neo是通过膜融合作用将分子导入细胞,而脂质体转染的内吞作用可能造成转染分子经溶酶体作用而降解。 GenomONE-Neo 内含完全灭活的HVJ病毒颗粒,其具有侵染力而无潜在增殖能力,使用非常安全,无需特殊的防护措施      
3.  方便简单
  GenomONE 即开即用,试剂盒内包含了操作中主要使用的HVJ-E冻干粉和各种辅助试剂

◆ 案例、应用:
  GenomONE™-Neo和传统的脂质体转染和电穿孔法相比,有更高的转染效率和更低的细胞毒性,可更有效的发挥siRNA的knock-down作用。

in vivo
【大鼠颌下腺逆行注射siRNA】
  Ca2+-dependent Cl channel protein (rCLCA)表达的特异性抑制。
  免疫染色

non-injection side

rCLCA siRNA-injection side

  rCLCA siRNA(2 nmol)和GenomONE-Neo(2AU)混合后,以逆行注射的方式注入大鼠颌下腺。四十八小时后,用免疫染色检验siRNA注射对氯离子通道蛋白表达的抑制作用。
ST:纹状管,G:颗粒曲管,A:腺泡

【相关文献】
  K. Ishibashi et al., J. Dent. Res., 85(12), 1101-1105 (2006).

■ in vitro
【难转染细胞——U937细胞RNAi】
  总所周知,用脂质体和电转的方法将siRNA转到U937人单核细胞白血病细胞中非常困难,但我们通过实验证明,siRNA与GenomONE-Neo结合后转染该细胞,其knock-down效率可达85%以上。
U937细胞经siRNA转染72小时后收集,用RT-PCR和WB分别检测mRNA和蛋白量的变化情况。

Real-time PCR
Western blotting

左图:转染Cathepsin G的特异性siRNA后,其对应的mRNA减少到14%
右图:转染Cathepsin G的特异性siRNA后,其蛋白水平减少到15%

【相关文献】 
  Y. Tsuchiya et al, Free Radical Biology & Medicine, 43, 1604-1615 (2007).

品牌
货号
产品名称
包装

Cosmo

ISK-GN-001-EX

GenomONE™-Neo EX HVJ-E 1 vial Transfection Reagents
 GenomONE™-Neo EX 仙台病毒包膜(1只装)转染试剂

1 set

Cosmo

ISK-GN-004-EX

GenomONE™-Neo EX HVJ-E 4 vials Transfection Reagents
GenomONE™-Neo EX 仙台病毒包膜(4只装)转染试剂

1 set



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